細胞增殖論文范文10篇

【摘要】本研究以內皮細胞培養液（EndoM）培養小鼠骨髓內皮細胞，探討粒巨噬系集落刺激因子（rmGMCSF）對骨髓內皮細胞增殖的影響。用EndoM培養小鼠骨髓內皮細胞，通過WrightGiemsa染色計數內皮細胞集落、應用免疫熒光法觀察內皮細胞表型；加入不同濃度的GMCSF，通過集落形成率、MTT法和流式細胞術檢測內皮細胞生長周期，觀察GMCSF對內皮細胞體外擴增的影響。結果表明：EndoM誘導的骨髓細胞可以生成內皮細胞集落，vWF檢測呈陽性；集落形成率檢測及MTT法測定均證實GMCSF對內皮細胞的增殖具有明顯的促進作用；生長周期檢測結果顯示，GMCSF處理組的細胞進入S期的比率為9.3%，而對照組為2.1%，說明GMCSF可以通過促使內皮細胞進入S期而加快細胞的分裂，促進細胞增殖；比較第1代和第4次傳代后細胞的生長曲線，兩者無明顯差別，說明多次傳代后的細胞仍保持傳代早期的增殖潛能。結論：GMCSF對內皮細胞的增殖具有促進作用，經多次擴增傳代后內皮細胞的增殖潛能無明顯改變。

【關鍵詞】骨髓內皮細胞GMCSF細胞增殖

EffectsofGranulocyteMacrophageColonyStimulatingFactoronGrowthofMurineBoneMarrowEndothelialCells

AbstractThepurposeofthisstudywastoinvestigatetheeffectsofgranulocytemacrophagecolonystimulatingfactor(GMCSF)onthegrowthofmousebonemarrowendothelialcells.Endothelialcellculturemedium（EndoM）wasusedtoculturemurinebonemarrowendothelialcells.EndothelialcellcolonieswerecountedundermicroscopebyWrightGiemsastaining.TheeffectofdifferentconcentriationofGMCSFontheproliferationofbonemarrowendothelialcellswasobservedbytheformationofendothelialcellcolonies,MTTandflowcytometry.TheresultsindicatedthattheendothelialspecificmarkervWFwasexpressedbythecolonycells,GMCSFpromotedtheproliferationofbonemarrowendothelialcellcoloniesandMTTconfirmedtheeffectofGMCSFonpromotingtheproliferationofbonemarrowendothelialcells.TheresultofdetectingcellcycleshowedthattherateofcellsenteringintoSphasewas9.3%inGMCSFaddedgroupandtherateofcellsenteringintoSphasewas2.1%incontrol.Therewasnosignificantdifferenceincellgrowthcurvebetweenthefirstpassageandfourthpassage.ItisconcludedthatGMCSFcanpromotetheproliferationofbonemarrowendothelialcells,theproliferationpotentialofbonemarrowendothelialcellsbetweenthefirstandfourthpassagenosignificantlychanges.

Keywordsbonemarrowendothelialcells;GMCSF;proliferation

JExpHematol2007;15(3):622-625

論文關鍵詞糖尿病足中醫證型脛后動脈血管細胞核增殖相關抗原臨床研究

論文摘要目的：探討糖尿病足中醫辨證分型與血管細胞核增殖相關抗原的表達差異。方法：對32例截肢的糖尿病足患者按中醫辨證分為氣血兩虛瘀阻證、脈絡瘀熱證、脈絡熱毒證和氣陰兩虛瘀阻證，分別對其截肢肢體的脛后動脈應用免疫組化法對細胞核增殖相關抗原（Ki67）的表達進行觀察、分析。結果：Ki67的陽性表達與糖尿病足動脈硬化閉塞程度呈負相關，與血管炎癥病變程度呈正相關。結論：炎癥在糖尿癥的大血管病變的過程中起到了重要的作用。

糠尿病足是糖尿病的嚴重并發癥，據統計1996年全球糖尿病患者1．2億，預計到2025年，將達到2．5億以上，而大約15％的糖尿病患者將在其生活的某一時間發生足潰瘍或壞疽[1]。目前對于糖尿病足病因及發病機制雖然還不是完全清楚，但大家公認糖尿病合并大血管病變導致動脈粥樣硬化是糖尿病足發病的最主要因素。現將2004年10月～2005年5月間我們收治的32例糖尿病足患者的截肢動脈標本的血管細胞核增殖相關抗原(Ki67)與其中醫辨證分型的相關性研究情況報告如下。

1臨床資料

1．1一般資料：32例均為天津醫科大學代謝病醫院和天津中醫學院第一附屬醫院2004年10月～2005年5月間的住院患者，其中男性24例，女性8例；年齡50～86歲，平均年齡69．2歲；糖尿病病程最長30年，最短6年，平均18±2．4年。

1．2診斷標準：糖尿病足的診斷標準采用2000年中華醫學會糖尿病學會第二屆糖尿病足會議所制訂的“糖尿病足(肢端壞疽)檢查方法及診斷標準”。

【摘要】目的探討人乳鐵蛋白(hLF)對體外培養細胞生長特性的影響。方法MTT法評定hLF對人鼻咽癌細胞、中國倉鼠卵巢細胞、人肝臟細胞的生長抑制作用。結果乳鐵蛋白對人鼻咽癌細胞系CNE的增殖有抑制作用并呈現劑量依賴性，對正常細胞無抑制作用。結論hLF可能是一種效果較好的新的抗腫瘤化學劑。

【關鍵詞】人乳鐵蛋白；癌細胞；細胞增殖

人乳鐵蛋白(HumanLactoferrin，hLF)是主要存在于人乳清中的球蛋白，乳汁中特別是初乳中含量最高，具有廣譜抗菌、抗病毒、抗腫瘤等作用。國外有學者將其應用于腫瘤患者的治療，但是對其作用機制的研究較少。目前國內較少有關于hLF作用于細胞的報道，我們選用易早期轉移的鼻咽癌(NPC)細胞作為研究對象，以中國倉鼠卵巢細胞(CHO)、人肝臟細胞(L02)作為正常細胞對照，觀察hLF在體外是否具有抑制癌細胞生長的作用，探討hLF抗腫瘤的作用機制，從而為腫瘤的治療提供研究基礎，為臨床實驗及應用提供新的理論依據。

一、材料與方法

1.1材料人鼻咽癌細胞(CNE)、中國倉鼠卵巢細胞(CHO)、人肝臟細胞(L02)均購自中國科學院上海細胞資源中心。重組hLF(Lot:L0520，溶于PBS中，儲存濃度5mg/ml，-20℃儲存備用)和噻唑藍(MTT，Lot:M2128)均購自Sigma公司。RPMI1640、胎牛血清購自HyClone公司。其他試劑均為分析純。

1.2實驗方法

引言

HBV感染患者和幾乎全部HCV攜帶者有可能發展為肝硬化，亦是造成肝硬化發病率居高不下的主要原因，而肝硬化中約30%患者可并發肝癌［1］.AFP升高、肝硬化伴細胞不典型增生或細胞增殖活性增高成為肝癌發病的高危因素［2］，因而慢性肝病、肝硬化的防治十分重要論文.如何延緩肝纖維化形成進程或逆轉至正常，已成為肝硬化及肝癌防治的中心問題.因此，研制有效且可長期服用的預防制劑也越來越引起人們的關注.健脾扶正法是中醫臨床防治肝硬化與肝癌常用的方法之一［3］.本科室根據中醫基礎理論及臨床實踐研制的以健脾益氣立法，由淮山藥、山楂、大棗等藥食同源中藥組成的肝復健沖劑，在臨床肝硬化防治過程中取得較好療效.

1材料和方法

1.1材料SD雄性大鼠，體質量150~180g，由第四軍醫大學實驗動物中心提供.二乙基亞硝胺(DEN)購自Sigma公司.天狼紅（解放軍第475醫院贈送）.PCNA檢測試劑盒購自DAKO公司.中藥飼料：肝復健沖劑按30.4g・kg-1均勻混合于基礎飼料中壓制而成（第四軍醫大學實驗動物中心提供）.

1.2方法

1.2.1模型建立大鼠適應環境3d隨機分為模型組（Model）及中藥組(Ganfujian，GFJ)，每組各30只，分別以0.1g・L-1DEN自由飲水，同時分別給予基礎飼料或含中藥的飼料喂養.16wk時停用DEN飲水及中藥飼料.考慮到造模過程大鼠有一定死亡率，分別于建模開始后每4wk兩組各處死5只大鼠，剩余大鼠留繼續觀察.取肝組織固定于100g・L-1甲醛溶液，石蠟包埋，切片厚4μm.常規HE染色、切片膠原特殊染色及免疫組化染色.

【摘要】目的研究大蒜素對胃癌BGC823細胞增殖的影響。方法通過細胞培養技術、瑞氏染色、MTT實驗方法，觀察大蒜素對胃癌細胞生長的影響。結果BGC823細胞在大蒜素的作用48h后，出現體積變小、核固縮等形態學改變。大蒜素對胃癌細胞的生長曲線有明顯的抑制作用，其抑制作用與大蒜素的濃度和時間呈正相關。結論大蒜素對體外培養的BGC823細胞具有明顯的增殖抑制作用。

【關鍵詞】大蒜素;胃癌;BGC823細胞

大蒜在我國民間藥用已有三千多年的歷史，在《本草綱目》和《驗方新編》中就有關于大蒜藥用價值的記載[1]。大蒜素(又名大蒜注射液)是對大蒜進行重整獲得的揮發油，有效成分為大蒜辣素。大蒜辣素不僅具有抗菌消炎的作用，而且可以抑制多種癌細胞的生長并誘導其凋亡。胃癌的發生和發展與細胞凋亡關系密切，誘導細胞凋亡已成為治療胃癌的新手段。大蒜素作為一種可誘導細胞凋亡的天然藥物，有望為胃癌治療開辟一條新途徑[2]。本研究將對大蒜素抑制胃癌細胞的生長作用加以探討論文。

1材料與方法

1.1材料

大蒜素注射液(三硫二丙烯)購自安徽華源醫藥有限公司，BGC823細胞為吉林醫藥學院檢驗系細胞培養室凍存細胞株。

【摘要】目的比較人羊水源性及臍血源性的間充質干細胞(MSCs)分離、培養及其生物學特性，為組織工程選取種子細胞提供實驗依據。方法用貼壁分離培養的方法分離兩種來源的間充質干細胞，觀察其形態與生長曲線，并用細胞化學染色的方法測定其生物化學特性。結果兩種來源的標本均可成功分離出MSCs，但是孕中期羊水源性MSCs增殖能力要明顯強于新生兒臍血源性的MSCs，二者有相似的生物化學特性。結論孕中期羊水與新生兒臍血來源的MSCs是很好的組織工程種子細胞,新生兒臍血來源的MSCs的增殖能力相對較弱，應用受到一定的限制。

【關鍵詞】孕中期羊水;間充質干細胞;臍血

間充質干細胞(mesenchymalstemcells，MSCs)具有多向分化潛能,是細胞治療及基因治療的理想種子細胞。已有研究顯示羊水[1]和臍血[2]可以分離出MSCs，那么這兩種來源的MSCs有哪些異同呢?為此本研究將對孕中期人的羊水及新生兒的臍血進行間充質干細胞的分離與培養，并對其基本生物學特性進行了比較研究，為組織工程選取種子細胞提供基礎性實驗依據，現報告如下論文。

1材料與方法

1.1標本來源

羊水標本取自2008年3月至2010年3月吉林醫藥學院附屬465醫院婦產科，妊娠在15～22周的引產羊水35份;32份臍帶血標本取自正常足月剖腹產或足月正常產乙肝病毒檢測陰性的孕婦。取標本前均征得孕婦本人同意，研究獲得吉林醫藥學院附屬465醫院道德倫理委員會批準。

論文關鍵詞：凋亡；中藥；綜述

論文摘要：就近年來中藥抑制細胞調亡的文獻進行整理，從中藥調控細胞凋亡途徑、影響凋亡信號傳導、調控凋亡相關基因表達、調控細胞因子4個方面進行系統綜述。認為中藥在抑制細胞凋亡方面有較好的作用。

細胞凋亡(apoptosis)是一種細胞生理性死亡的形式，是多細胞有機體為保持身體組織穩定、調控自身細胞增殖和死亡之間的平衡、由基因控制的細胞自動性死亡過程，在機體的生長發育、衰老、免疫調節、內環境穩定以及腫瘤、感染、自身免疫性疾病等生理病理過程中均有重要意義。機體通過凋亡過程來清除體內不需要或有害細胞，或通過抗凋亡過程維持細胞功能。抑制凋亡在維護生命個體的穩定、抗衰老等過程中有很重要的作用。近年來有關中藥抑制細胞凋亡的研究日漸增多，研究涉及缺氧、缺血等因素導致的神經系統、心腦血管、胃腸功能損傷的保護、腫瘤治療(放、化療)后骨髓、免疫功能損傷的防治等方面。中醫藥可對細胞凋亡過程的不同環節進行調節，進而抑制細胞凋亡，維持機體內平衡，阻止組織病理過程的惡化。

1通過調控細胞凋亡途徑抑制凋亡

機體內存在多條細胞凋亡的信號轉導途徑，其中內源性的線粒體細胞色素C途徑和外源性的死亡受體途徑所介導細胞凋亡是目前研究較多的途徑。

1．1通過調控線粒體細胞色素C途徑抑制凋亡許多研究結果均表明，線粒體在細胞凋亡過程中起著“主開關”作用，是最重要的途徑之一，其通過Cyt－C途徑誘導細胞凋亡。在細胞凋亡信號的刺激下，會使caspases激活，胞質Ca2+水平升高，產生ceramide，諸如此類的改變會直接或間接地引發線粒體通透性轉變孔道(PTP)開放，使能量產生中斷，線粒體內膜跨膜電位(△ψm)的下降，并導致外膜破裂，釋放出Cyt－C等各種活性蛋白，Cyt－C從線粒體內釋放是關鍵的一步。胞漿內的Cyt－C在dA7P存在下，與凋亡蛋白酶活化因子－1(Apaf－1)結合，誘導caspase－9前體的寡聚化，并形成凋亡體。凋亡體的形成可激活caspase－9，繼而活化Caspase－3，啟動Caspase的級聯反應，引起細胞凋亡。

經皮腔內血管成形術(PTA)是治療冠狀動脈及周圍動脈狹窄的有效手段,但約有25%～60%的病人術后發生再狹窄。金屬內支架的應用降低了PTA術后急性閉塞的發生率,但并未能徹底解決再狹窄的問題論文。大量實驗研究及臨床觀察表明再狹窄與血栓形成、內膜增厚和血管重構有關,內皮細胞的損傷、修復及功能改變在其中扮演重要角色。

一、內皮損傷、血栓形成與再狹窄

PTA可造成血管損傷，內皮的剝脫造成內皮下組織的暴露,血小板立即通過VonWillebrand因子（VWF）黏附于內皮下的基質,隨后發生聚集并釋放α顆粒成分,其釋放的血小板衍生生長因子(PDGF)可能與中膜平滑肌細胞的激活和遷移有關［1］。最近的研究表明血小板減少可抑制已激活的平滑肌細胞從中膜向內膜遷移。由內皮損傷引發的凝血過程將形成附壁血栓,血栓的形成不僅可造成血管的急性閉塞,而且為平滑肌細胞內遷提供了框架,血栓的機化可直接引起內膜增厚,而且血栓中的凝血酶本身就是強力的平滑肌細胞致分裂原［2］。實驗證明損傷部位內皮的早期重建可抑制血小板附著和血栓形成［3］。

二、內皮細胞和內膜增厚

血管損傷后出現的組織愈合反應可造成不同程度的內膜增厚,其中包括3種主要成分:平滑肌細胞、內皮細胞及細胞外基質。損傷后30分鐘就可以檢測到平滑肌細胞早期激活的標記——核原癌基因的表達［4］,活化的平滑肌細胞從收縮表型轉向合成表型，從而引發平滑肌細胞的增生遷移和基質的合成。平滑肌細胞增生后向內膜遷移，遷移到內膜的平滑肌細胞部分繼續增生。有作者認為平滑肌細胞的增生和分裂是兩個不同的機制［5］，一些因素只影響其中一個而不影響另一個，PDGF是平滑肌細胞向內膜遷移強力的趨化因子，成纖維細胞生長因子b（bFGF）則是平滑肌細胞的致分裂原。平滑肌細胞要穿過細胞外基質和彈力層才能到達內膜，其遷移過程與纖維蛋白溶解酶原激活物及金屬蛋白酶（MMP）的增加有關。

三、內皮細胞與血管重構

論文關鍵詞：糖尿病；糖尿病腎病；糖尿病心臟病；糖尿視網膜病變；糖尿病神經病變

論文摘要：細胞凋亡是糖尿病慢性并發癥發病機制之一。糖尿病腎病(DN)、糖尿病心肌病、糖尿病視網膜病變(DR)、糖尿病神經病變等多種DM慢性并發癥的發生與細胞凋亡密切相關。其中凋亡相關基因BCL-2、Bax、Fas、BCL-XL、Pax-3及一些胞內信號轉導分子等可能對組織細胞的凋亡進行調控。

糖尿病慢性并發癥發病機制極為復雜，細胞凋亡是近年來關注的又一熱點。由糖尿病引起的細胞凋亡有3種途徑：一是有線粒體介導的內源性細胞凋亡激活途徑，二是由死亡配體和死亡受體結合的外源性細胞凋亡激活途徑，三是由內質網介導的細胞凋亡激活途徑。本文對糖尿病腎病(Diabeticnephropathy，DN)、糖尿病心肌病、糖尿病視網膜病變(Diabeticretinopatthy，DR)、糖尿病神經病變等多種糖尿病(DM)慢性并發癥與細胞凋亡的關系進行闡述，以期為中醫藥措施的干預治療提供參考。

1細胞凋亡與糖尿病腎病

糖尿病腎病(DN)是DM的主要慢性并發癥之一，超過了30%的終末期腎功能衰竭是由糖尿病腎病所致。腎小管上皮細胞在高血糖狀態下，抗凋亡基因BcL-2、BcL-x表達降低，而促凋亡基因Bax表達增加，從而使細胞凋亡數目增加，故認為DM高血糖狀態下的代謝紊亂改變了凋亡調節基因的表達，使細胞凋亡增加是發生DN的原因之一。近來的研究證實腎小球內足細胞的缺失是早期DN的特點，此特點也就決定了DN是一個逐漸加重的過程。那么在DN早期是什么原因引起了腎小球內足細胞的缺失呢?在1型DM(Ins2AkitaAkitamice)和2型DM(Leprdb/dbdb/dbmice)大鼠在高血糖狀態下足細胞的凋亡顯著增加。由葡萄糖誘導的活性氧自由基(reactiveoxygenspecies，ROS)產物在體內及體外均激發了足細胞的凋亡和衰竭。這一結果暗示足細胞的凋亡和衰竭代表了1型DM和2型DM大鼠糖尿病腎病的一個新的早期的病理機制。首次證明過氧化物酶體增生物激活受體PPARa是核受體家族配體基因的一個成員，其可使過氧化物酶體增殖，這種增殖可在腎臟顯著的表達，并且在脂質代謝和血糖內環境的穩定起了很重要的作用。通過使用已敲除PPARa的大鼠及體外培養腎小球系膜細胞，證實PPARa在DN發病機制中的作用，發現PPARa的不足，加速了DN的進展，這是因為PPARa的不足引起了甘油三酯的濃度、循環游離脂肪酸、炎癥反應及胞外基質形成增加、腎小球的凋亡所致。提示促PPARa藥物可以作為治療1型糖尿病腎病的一個有效措施。研究發現還原型輔酶Ⅱ(NADPH)氧化酶的長期抑制阻止了腎小球足細胞的凋亡，改善了足細胞功能的衰竭、腎小球系膜間質的增厚及單側喪失排泄能力(VAE)(indb/dbmice)。另外足細胞的凋亡程度與尿蛋白漏出量相一致，并且足細胞的凋亡先于足細胞的丟失(inAkita減少37%，db/db減少27%)[1-2]。

2細胞凋亡與糖尿病心肌病

論文關鍵詞:植物組織培養褐變酚類物質多酚氧化酶醌類物質

論文摘要:植物組織培養過程中，褐變問題普遍存在,與菌類污染和玻璃話現象并稱為植物組織培養的三大難題。針對褐變難題，本文結合相關資料，對影響褐變的因素作了全面分析，褐變的影響因素是復雜的，隨植物種類外植體的部位幾生理狀況培養基及培養條件的不同而危害的程度有所不同，對這些因素是內因外界影響作用作了分析并針對這些因素提出了相應的解決措施。

在許多植物組織培養過程中，常遇到褐變問題。褐變主要發生在外植體，在植物愈傷組織的繼代、懸浮細胞培養以及原生質體的分離與培養中也經常發生。褐變產物不僅使外植體、細胞、培養基等變褐，而且對許多酶有抑制作用，從而影響培養材料的生長與分化，嚴重時甚至導致死亡。本文探討植物組織培養中褐變現象的影響因素、機理及防范措施，對我們進行科學研究或工廠生產，包括植物組織的培養,原生質體、懸浮細胞和植物器官的培養都有著十分重要的現實意義。

1褐變原因及危害

褐變是指外植體在培養過程中,自身組織從表面培養基釋放褐色物質,以致培養基逐漸變成褐色,外植體也隨之進一步變褐而死亡的現象。褐變的發生與外植體組織中所含的酚類化合物數量多少及多酚氧化酶活性有直接關系。很多植物，尤其是木本植物都含有較高的酚類化合物，這些酚類化合物在完整的組織和細胞中與多酚氧化酶分隔存在，因而比較穩定。在切割外植體時，切口附近的細胞受到傷害，其分割狀態被打破，酚類化合物外溢。對于外植體本身來講，酚類物質從外植體切口向外溢出是一種自我保護性反應，可誘導植保素或無物理屏障的形成，以防止微生物侵染組織。但酚類很不穩定，在溢出過程中與多酚氧化酶接觸，在多酚氧化酶的催化下，迅速氧化成褐色的醌類物質和水，醌類物質又會在酪氨酸酶等的作用下，與外植體組織中的蛋白質發生聚合，進一步引起其他酶系統失活。從而導致組織代謝活動紊亂，生長停滯，最終衰老死亡。此外，由于組織的老化病變也會使多酚氧化酶激活而引起褐變。

2褐變產生的機理