基因編輯范文

導語：如何才能寫好一篇基因編輯，這就需要搜集整理更多的資料和文獻，歡迎閱讀由公務員之家整理的十篇范文，供你借鑒。

篇1

現在研究人員已經能用CRISPR基因剪刀來編輯豬、魚、猴子、羊、兔子、老鼠、蝴蝶等動物的基因。下面可以梳理一下CRISPR基因剪刀編輯動物基因產生了哪些對人類有益的典型動物。

治療杜興氏肌萎縮小鼠

杜興氏肌肉營養不良癥（又稱杜興氏肌萎縮，DMD）是遺傳性肌肉萎縮疾病。該病的致病基因存在于X性染色體中（Xp21），是通過性連鎖隱性遺傳而致病。該病由表達肌萎縮蛋白的基因受損引發。肌萎縮蛋白能夠增強與保護肌纖維，當肌萎縮蛋白缺失時，骨骼肌與心肌將會發生退化。

男性只有一個X性染色體，因此該病患者大多為男性，患者經常需要坐輪椅，利用呼吸機輔助呼吸，壽命一般在25歲左右。若女性的一對X性染色體中的一個攜帶有變異的杜興氏肌萎縮基因，便成為一個杜興氏肌萎縮的攜帶者，其兒子有二分之一的機會成為患者，其女兒則有二分之一機會成為杜興氏肌萎縮基因攜帶者。

目前，對于這種疾病還沒有有效的治療方法，CRISPR基因剪刀的出現為根治這種疾病帶來了希望。CRISPR基因剪刀需要與Cas9配合操作，后者是一種由核糖核酸（RNA）指導的細菌核酸內切酶家族，被CRISPR系統用來在特異性的基因序列位點上識別和切割雙鏈DNA，因此通常稱為CRISPR- Cas9基因剪刀。

CRISPR-Cas9基因剪刀當然不能先在人身上使用來治療疾病，而是要進行動物試驗?，F在，研究人員利用CRISPR-Cas9基因剪刀對患杜興氏肌萎縮的小鼠進行試驗，獲得了較好的效果。

對小鼠治療杜興氏肌萎縮的原理是，CRISPR-Cas9基因剪刀可通過一節RNA將Cas9酶移動到基因組中導致該病的致病基因位置，然后該酶能夠將特定的致病DN段切除，隨后細胞通過損傷修復機制將斷裂的DNA鏈連接，或者利用DNA模板創造新的序列。

現在，美國西南醫學中心的研究人員利用腺病毒將CRISPR-Cas9基因剪刀導入杜興氏肌萎縮小鼠胚胎中，以切除有缺陷的編碼肌萎縮蛋白的基因片段，結果使得出生后的小鼠能夠產生新的肌萎縮蛋白，改善了小鼠杜興氏肌萎縮的癥狀。

另外，美國杜克大學的另一個研究小組也利用CRISPR-Cas9基因剪刀，直接對成年小鼠的腿部肌肉進行治療，結果讓小鼠的肌肉產生了正常的肌萎縮蛋白，力量得到增強，而且還改善了小鼠心臟等其他部位的肌肉力量。

這些研究結果也意味著，CRISPR-Cas9基因剪刀可以用來治療人的杜興氏肌萎縮，但是，還需要先進行人體試驗，并且需要得到倫理批準。

人血白蛋白（HSA）是人血漿中的蛋白質，其作用既廣泛又重要，因為它們在體液內可以運輸脂肪酸、膽色素、氨基酸等，同時能維持血液正常的滲透壓。人血白蛋白還可用于治療休克與燒傷，用于補充因手術、意外事故或大出血所致的血液丟失，也可以作為血漿增容劑。

但是，如果人血白蛋白只從人體獲取，如從獻血者的血液中提取，不僅數量有限，而且價格昂貴。因此，研究人員一直希望利用基因工程改造動物，如豬或羊來生產人血白蛋白。現在的CRISPR-Cas9基因剪刀為實現這一想法提供了理想的工具，因為通過基因編輯動物，如編輯豬，可以讓豬生產人血白蛋白。

但是，基因編輯豬也會有兩種結果，既產生豬血白蛋白，也可產生人血白蛋白，要解決這個問題，就只能是在編輯豬的基因時，把敲入的人類基因放在位于豬血白蛋白產生基因的下游。北京蛋白質組研究中心的研究人員通過使用CRISPR-Cas9基因剪刀，將人血白蛋白的基因敲入到豬血白蛋白基因位點下游起始密碼子，希望人血白蛋白基因能在豬內源性白蛋白基因的轉錄調控下表達，同時阻止豬內源性白蛋白基因的表達。

研究人員在10只巴馬母豬體內植入了300個改造過的受精卵，之后有5只豬成功懷孕，產下了16只巴馬豬仔。結果發現，這16只豬仔都帶有預期敲入的生產人血白蛋白的基因，在它們的血液中也能檢測到人血白蛋白。不過，各只幼豬體內的人血白蛋白含量有所不同。因此，這只是一個初步的成功。

更重要的是，要在未來的繁殖試驗中查驗敲入的人血白蛋白基因是否能在這些豬的后代中遺傳下去。如果能穩定遺傳下去，或許未來能讓這些基因編輯的豬生產人們所需要的人血白蛋白。

人體器官供不應求制約了器官移植治療疾病和挽救人的生命，因此，一直以來，研究人員在想方設法采用動物的器官供給病人移植，豬的器官就被視為是一個很好的人類器官的代用品。

但是，采用豬的器官要解決兩大問題：一是豬的器官可能引發器官受者的免疫排異反應，二是豬身上的一些隱藏的病毒和微生物可能對人有害。

豬的器官對于人是異種器官，異種器官移植面臨的免疫學排異反應表現為超急性排斥反應（HAR）、急性血管排斥反應（AVR）、細胞介導的排斥反應和慢性排斥反應。1993年，美國匹茲堡大學的外科醫生庫珀等人發現，大多數人類免疫反應的肇事者就是源自豬血管內皮細胞上的抗原，稱為α-1，3-半乳糖，這是一種糖分子，能在幾分鐘內引發器官排異。但是，一種名為α-1，3-半乳糖基轉移酶的物質對于產生這種糖是必需的，將產生這種酶的基因敲除，就有可能緩和免疫排異反應，從而讓豬器官供人類移植。

另一個問題是，豬體內有多達幾十種潛藏的或休眠的逆轉錄病毒（PERV）。盡管對豬的這些逆轉錄病毒是否對人類有害存在爭議，但較為普遍的看法是，如果使用豬的器官，就應當消除這些隱患，以免移植豬器官后引發其他疾病。因此，如果要使用豬的器官，就必須敲除豬體內這些逆轉錄病毒的基因，以確保萬無一失。

于是，去除或修改豬的α-1，3-半乳糖基轉移酶和其他幾十種逆轉錄病毒基因就歷史地落到CRISPR-Cas9基因剪刀的肩上。美國哈佛大學的丘奇教授領導的團隊在2015年10月宣布，他們的兩個研究小組已經能完成去除或修改豬的α-1，3-半乳糖基轉移酶基因和其他幾十種逆轉錄病毒基因的任務。

一個研究小組利用CRISPR-Cas9基因剪刀對一組豬胚胎進行了20多個基因的改造，其中就包括編碼豬的α-1，3-半乳糖基轉移酶的基因，從而阻止了豬細胞表面的α-1，3-半乳糖產生，也就消除了豬器官上面的抗原，可以避免豬器官移植到人體時觸發免疫反應。

另一個研究小組利用CRISPR-Cas9基因剪 刀編輯豬胚胎中的62個豬內源性逆轉錄病毒基因，讓這些病毒失活。這項工作非常重要，因為這些病毒嵌入在所有豬的基因組中，無法進行處理或是被中和。由于擔心它們有可能給人類患者帶來疾病，豬器官遲遲不敢用于人類。

現在，由于解決了這兩個問題，即消除了引發免疫反應的α-1，3-半乳糖基轉移酶基因和豬內源性逆轉錄病毒基因，下一步將有可能把豬的器官移植給人。不過，在對人進行移植前，還要通過動物試驗來驗證，例如，對狒狒和猴子移植經過CRISPR-Cas9基因剪刀編輯的豬的器官，如肺、心臟和肝臟。

美國馬里蘭大學醫學院的外科醫生已經在做這種動物試驗。他們從一頭經過CRISPR-Cas9基因剪刀編輯的成年豬身上摘下肺，移植給一只6歲的狒狒。未來，這一研究結果將會公布，以此論證，豬的器官是否可以移植給人。

大力士和天狗

除了豬與人的生理和代謝相似、器官大小差不多之外，狗與人的生理也比較接近，因此，研究人員一直希望建立狗的動物試驗模式，為人類服務?，F在，CRISPR-Cas9基因剪刀的出現讓中國研究人員創造了一種特殊的狗，一只稱為大力士，一只稱為天狗。

中國科學院廣州生物醫藥與健康研究院的賴良學團隊利用CRISPR-Cas9基因剪刀敲除狗的肌肉生長抑制素基因，以增強狗的肌肉能力，因為該基因對骨骼肌生長具有抑制作用，被敲除后，肌肉生長發育能力就會增強。

研究人員最初利用CRISPR-Cas9基因剪刀對60多個狗胚胎進行編輯，然后把胚胎植入母狗體內孕育，誕生了27只小狗，但只有2只（一公一母）小狗的肌肉生長抑制素基因被敲除。肌肉生長抑制素基因被敲除的狗的肌肉在4月齡時就顯得比普通狗更為發達，研究組將兩只狗分別命名為大力士（公）和天狗（母）。

預計這種基因敲除狗在成年后將具有更強的運動能力，適合狩獵以及軍事應用。由于狗與人的代謝、生理以及解剖特征相似，這類由CRISPR-Cas9基因剪刀編輯的狗會被用于治療人類的一些遺傳病，如帕金森病、重癥肌無力、肌萎縮側索硬化癥（ALS，漸凍人癥）的試驗。

篇2

農業時代的開啟

“遺傳”，聽起來是個人人都能理解的名詞。中國人說“種瓜得瓜，種豆得豆”，英美人說“like father like son”。這些俗語里反映的生物代際之間的相似性，就是遺傳。先人們大概早就發現，不管是動物還是植物，不管是生物的外形、行為，還是性格，這些性狀都能在一代代的繁衍中頑強地延續和保留下來。

實際上，早在人類文明開始之前，人類就已經充分―盡管也許是下意識―觀察到了遺傳現象的存在，甚至已經開始利用遺傳規律改善自己的生活了。

現代人類的祖先可以追本溯源到數百萬年前的非洲大陸。在兩百多萬年的無盡歲月里，先祖們在非洲大陸上采集植物果實、捕獲動物，過著靠天吃飯、隨遇而安的日子。人類文明的曙光出現在距今十幾二十萬年前。那時，現代人的直系祖先―人屬智人種―出現在非洲大陸，并且很快一批批地走出非洲，在全世界的各個大陸和主要島嶼上開枝散葉，也把采集和狩獵的固有天性帶到了世界各地。在那個時候，還壓根看不出我們這些身材矮小、面相平凡的先祖會在日后成為整個地球的主宰。

然而，就像突然擁有了某種未知的魔力一般，差不多從一萬年前開始，在世界各地快樂采集和狩獵的智人先祖們，幾乎在一眨眼間就改變了賴以生存的生活方式。這些變化開啟了農業時代，也最終催生了今天建立在發電機、汽車、互聯網和生物技術基礎上的全新人類社會。而這一切變化的開端，就是祖先們對于遺傳規律的利用。

在賈雷德?戴蒙德的名著《槍炮、病菌與鋼鐵》中對此有著生動詳盡的討論。就在人類先祖走出非洲的必經之路上，地中海東岸生長著繁茂的野生小麥，它們的種子富含蛋白質和淀粉。不難想象，當生活在中東新月沃地的人類先祖們在偶然間發現這種植物后，一定會如獲至寶地將它們作為日常采集和儲藏的對象。對于先祖們來說，這和他們數百萬年來在非洲大陸的日常采集工作并無分別。

但是如果先祖們想要把這些野生小麥挖出來，為他們提供穩定的食物來源，就會遇到一些棘手的問題。野生小麥的麥穗會在成熟后自動從麥稈上脫落，將種子盡力播撒到周圍的泥土里。這是這些禾本科植物賴以生存繁衍的性狀之一，但這也使得人類先祖想要大規模收獲小麥種子變得非常困難。后來，在某個不知名的具體年代，生活在中東地區的遠古居民們無意間發現了一些遺傳變異小麥。這些小麥的麥穗即便成熟以后，也不會自動脫落。

泛生子的概念

從理性高度思考遺傳本質

很容易想象，如果這些變異小麥出現在野外，我們只有死路一條。因為它們完全無法通過脫落的麥穗散播自己的后代。但這些變異植株對于我們的先祖們來說卻無比珍貴，因為這樣的遺傳突變小麥會大大方便他們在固定時間大批收割麥穗、儲存麥粒！更要緊的是，先祖們一定也在無意間發現了遺傳的秘密―種瓜得瓜，種豆得豆，因此這些仿佛是上天賜予般的神奇的小麥種子，也將會頑強地保留這種對人類先祖而言―而不是對小麥自身，極其有利的性狀。所以我們可以想象，先祖們可能會將這些奇怪的植物小心移植到村莊周圍，用心呵護，直到收獲第一批成熟的種子。這些種子將成為下一年擴大種植的基礎。就這樣，伴隨著一代代人類先祖們的細心發現、栽培和收獲，符合人類需要的優良性狀被保留了下來，一直保留到今天。這些無意間發現的遺傳突變小麥，可能標志著人類農業社會的開端。

最早從理性高度思考遺傳本質的，是同樣生活在地中海邊的古希臘人。在古希臘哲學家德謨克利特和希波克拉底看來，遺傳現象必然有著現實的物質基礎，不需要用虛無縹緲的神來解釋。在他們的想象里，遺傳的本質是一種叫作“泛生子”的微小顆粒。這種肉眼不可見的顆粒，在先輩的體內無處不在，忠實記錄了先輩從形態到性格的各種性狀，并且會在過程中進入后者體內。以泛生子顆粒承載的信息為藍圖，子代得以表現出對先輩們的忠實模仿。

必須承認，泛生子的概念本身，其實并沒有解決任何實際問題。或者刻薄點說，這只是把人們習以為常的遺傳現象用一個聽起來晦澀難懂的名詞概括了出來而已。但是這個從現象到概念絕非毫無用處。至少，借用這個概念，人們可以把許多看起來很不一樣的現象聯系起來。

例如，無性生殖―微小的細菌和酵母能夠一分為二產生兩個后代；有性生殖―雌雄家畜后會產生出一群嗷嗷待哺的小崽兒；甚至還包括果樹的嫁接―為什么果樹嫁接后的果實會帶有接穗和砧木的共同特征，不就是因為泛生子顆粒能夠從砧木毫無障礙地流動到接穗里面去，和接穗的泛生子合二為一嘛。

因此，這個生命力頑強的概念從古希臘時期一直流傳到了近代。甚至在19世紀中期，在達爾文創立進化論，為地球生命和人類的起源找到科學解釋的時候，他仍然借用泛生子的概念作為自然選擇理論的遺傳基礎。

進化論遭到的批評

宗教人士的攻擊與嚴肅的科學批評

在達爾文看來，一個生物個體的所有器官、組織乃至細胞，都磧兇約鶴ㄊ艫姆荷子顆粒。手的泛生子記錄著每個動物的手掌大小、寬窄、掌紋乃至毛發的生長位置，眼睛的泛生子當然少不了記錄眼睛的大小、虹膜的顏色等。在的過程中，來自父母雙方的泛生子融合在一起，共同決定了后代們五花八門的遺傳性狀。

更要緊的是，泛生子攜帶的生命藍圖一旦出錯，就會導致后代遺傳性狀的“突變”，而這些突變，就是達爾文進化論中自然選擇和適者生存的物質基礎。正是因為有突變，一代代生物個體才會具有微小但能夠穩定遺傳的差異，而這些遺傳差異影響著生物個體在環境中生存和繁衍的能力，并最終導致適者生存。

達爾文的進化論在誕生后遭到了猛烈攻擊，特別是在宗教界人士和虔誠的信徒們看來，達爾文的學說褻瀆了人類萬物之靈的神圣性，也把傳說中按照自己的模樣造人的上帝置于可有可無的尷尬地位。但很少有人知道的是，進化論同樣遭遇了嚴肅的科學批評。熱力學創始人之一、物理學家開爾文勛爵當時估算出地球的年齡至多不會超過一億年，而這點時間遠遠不夠積累出達爾文進化所需要的五花八門的遺傳突變（當然，后來人們意識到地球的年齡遠大于此）。

古生物學家們對此發出了詰難，按照進化論，地球上必然存在許許多多物種之間的中間形態，但是它們的化石又在哪里呢？有一個批評可能是最致命的，因為它聲稱發現了進化論和遺傳融合理論的深刻矛盾，換句話說就是，達爾文辛辛苦苦為進化論找到的遺傳基礎，可能根本不支持進化論的聲明！這一批評來自蘇格蘭工程師、愛丁堡大學教授亨利?弗萊明?詹金。他評論說，按照達爾文的進化論，生物的遺傳物質需要經歷漫長、微小的突變過程，才能產生足夠顯著的形狀變化，最終造就地球上千萬種五花八門的物種。

新書速遞

冷暴力

作者：[法國]瑪麗-弗朗斯?伊里戈揚

出版社：后浪丨北京聯合出版公司

出版日期：2017年6月

定價：38.00元

本書首次提出了“精神虐待”這一概念，它廣泛發生在婚姻、家庭和職場中，施虐者通過拒言語歪曲、諷刺、嘲笑、輕蔑、否定人格等常用手段來欺凌、控制受虐者，使這種關系持續下去，讓受虐者無法逃脫。

日本新中產階級

作者：[美國]傅高義

出版社：上海譯文出版社

出版日期：2017年5月

定價：60.00元

傅高義在學術生涯之初被斥為“鄉下人”后，意識到一個社會學家如果從未在另一種文化中生活過，何談理解本國社會？1958年至1960年，他來到東京市郊展開田野研究，描寫日本社會快速變遷之際的“新中產階級”―工薪族和他們的家庭。此書是他的成名作。

外婆的道歉信

作者：[瑞典]弗雷德里克?巴克曼

出版社：天津人民出版社

出版日期：2017年5月

篇3

“隊長，那些病毒體已經沖上來了。”

“什么？那些東西竟然突破了我們的五道防線？”

“是的，他們擁有尖利的爪子和極快的奔跑速度，而且那些大的病毒體還有能發出一種毒氣！”。

“你去讓01號小隊帶一些重武器和彈藥，我們只帶了輕武器和少量的子彈，對付那些病毒體還遠遠不夠。”

“是，隊長。”

“隊長，那些病毒體已經快突破到我們這里了，根本出不去?。?rdquo;

“那我們只好搏一搏了，告訴隊員們，讓他們放近了病毒體再打，不要浪費子彈，我們的子彈不多了。“

“隊長！“

“哦，原來是K博士啊，有什么事嗎？”

“隊長，我知道這棟樓里有隱形通道，離我們這里不遠，可以出去。”

“那好，你先帶隊員們出去，我和02小隊留下掩護你們”

“不行隊長，你得先出去，要不然我們誰能安下心啊？”

“你們快出去！我一會就出去。”

“砰！”

“隊長，那些病毒體已經沖破了我們的最后一道防線，你快走啊！”

“啊…………”

“不好了，隊長被感染了，大家快走??！”

第二章

“怎么辦，隊長被那些東西感染了，我們一定要為隊長報仇??！”

“我們還是先問問K博士這到底是怎么回事吧，一會還要與那些病毒體戰斗呢。”

“嗯。”

“K博士！”

“哦，原來是隊長手下的兩位得力干將啊，有什么事嗎？”

“我們是想問問這些病毒體是怎么回事？”

“哦，是這個問題啊，我也一直在研究這些病毒體，在剛才與那些病毒體戰斗時，我發現從病毒體內飛濺出的液體不是血液，而是含有X成分的混合液體，這種液體一旦沾附在人的皮膚上，會被感染成與母體相同的傀儡，這些傀儡與其它病毒體不一樣的一點在于被感染成傀儡后20個小時就會蒸發成有Z成分的蒸氣。據說是一種叫SLX的病毒氣體被人吸入體內后，會改變人體的基因，僅僅幾秒鐘就會變成病毒體。”

“那我們怎樣才能將這些病毒體的基因改變成人的基因呢？”

“要改變這些病毒體的基因只能把一種叫FK的液體與X成分混合，才能將病毒體的基因改變，而這兩種東西只有地表20000米以下的地方才有，想拿到這兩種東西跟本就是妄想。”

“如果我們一直與病毒體戰斗，我們必定失敗，使地球陷入終極黑暗??！”

“還是用最后的辦法，G計劃，雖然能讓那些病毒體全部死亡，但是我們也會死亡。”

“那就是舍小家保大家。”

兩個人回到隊中了，把這個計劃與隊友們講了，沒有一個人反對。

尾聲

K博士把G計劃完成了。

病毒體、隊員們和他們親愛的隊長在一時間內都化為了烏有。

G計劃是什么呢？

就是投擲一顆F-SX型中子彈……

篇4

人類在追求美的過程中，創造了許多美的載體，琴棋書畫，無一例外。所謂“琴棋書劍詩酒花”，“琴”首當其沖，古琴之聲近于天籟，琴是極清幽高潔之物，彈奏時須靜，環境靜和人心靜，“獨坐幽篁里，彈琴復長嘯”，琴韻是古今文人墨客不可或缺的精神生活的重要組成部分。陳源在《聽琴》里幽默地說：（英國人）不愛莎士比亞你就是傻子，（中國人）不愛古琴你逃不了做牛。

葉靈鳳《憔悴的弦聲》，卻傳遞了這樣奇特的信息：兩個互不相識的人，可以通過琴聲成為知音，產生“同是天涯淪落人”的共鳴。讓人聯想到俞伯牙與鐘子期的傳說，聯想到潯陽江邊江州司馬的故事。

對比琴的莊重與繁文縟節，“葉笛”這一小巧的樂器則顯得親切隨意。中國人口眾多，歷史悠久，音樂形式自然也是多樣的，拈一枚葉子，吹出動聽的音樂，或許更貼近自然，更貼近我們回歸自然的夢想?？姵缛旱摹度~笛》超越了笛聲的空靈，深化的主題，使文章厚重起來。

對比這些輕靈的或是沉重的聲音，“安塞腰鼓”則是“生命的贊歌、力量的贊歌?！蔽恼潞凸穆暎瑯託鈩莅蹴?，同樣酣暢淋漓。使人為之振奮，讓人感受到來自黃土高原的純樸而年輕的力量，一種讓人激動不已的崇高感。

音樂源于什么？我想，音樂一是源于人們對美的追求，對自然的改造；二是源于自然本身。大自然賜于我們許多無價的財富，天籟就是其一，天籟給我們創作音樂的靈感，因為只有這種聲音，才堪稱“天然去雕飾”，我們才能層層剝去浮躁的現實世界的外衣，尋找到“真”。周同賓的《天籟》不止寫聲音，還寫人。寫天籟的自然優美，寫人的純樸善良。

篇5

按照銀監會2014年12月向商業銀行下發的《商業銀行理財業務監督管理辦法（征求意見稿）》（下稱“《征求意見稿》”）的意見，理財資金服務實體經濟是國家支持實體經濟的一大基調，在這一精神要求下，銀監會鼓勵商業銀行設立直接融資工具，對接企業融資需求。目前商業銀行理財資金投資于實體經濟主要通過以下直接或間接方式：債券、非標準化債權類資產、部分權益類資產、理財直接融資工具、信貸資產流轉項目、商品類以及部分其他資產。數據顯示，目前理財資金投資商業、金融等服務業較多。

監管新規打破剛性兌付

目前，監管層對商業銀行理財資金入市持謹慎態度，并不斷要求銀行理財資金服務實體經濟?！墩髑笠庖姼濉穼︺y行資金入市有如下規定：理財資金投資不得有以下行為：第一，投資于境內二級市場公開交易的股票或與其相關的證券投資基金;第二，投資于未上市企業股權和上市公司非公開發行或交易的股份;第三，對于具有相關投資經驗，風險承受能力較強的高資產凈值客戶、私人銀行客戶及機構客戶的產品，不受本條控制。

另外，考慮到銀行資金通過券商、信托等通道入市的可能性?！墩髑笠庖姼濉芬幎?，理財資金運用應以直接投資為主，確實需要利用通道投資的，原則上僅可嵌套一級通道業務，杜絕多重嵌套多重投資模式，進一步約束銀行理財資金入市。

當前情況下，銀行理財資金入市主要通過三種曲線渠道：券商兩融受益權、傘形結構信托和股票結構化投資產品。

券商兩融受益權一般都有高質量資產作保證，風險較低，收益率較高，是銀行、基金、資管青睞的投資品種。但是目前監管條例規定不允許銀行使用表內資金投資券商兩融受益權，但是表外資產不受約束。據估計，銀行理財資金投資兩融受益權規模為3000億元，在近期股市行情持續走強的情況下，券商融資需求也在增加，未來銀行理財資金投資于兩融受益權的規模將隨著股市的走強而擴大，需要警惕的是，監管層對于股市高杠桿的嚴格控制。

投資傘形結構信托，即由銀行發行理財產品認購信托計劃優先級收益權，獲取優先固定收益，融資客戶認購劣后收益權，根據證券投資信托投資的表現，獲取剩余部分收益。優先級買入方主要為銀行，劣后級投資者主要為私募和高凈值股票投資者，傘型結構信托杠桿最低為1：2，最高為1：5。數據顯示，目前傘形結構信托規模為1500億元，因此，粗略估計銀行理財資金通過傘型結構信托入市規模約為750億元到1250億元，整體規模不大，但是發展速度很快，近期部分地區證監局開始叫停新增傘型信托，表明監管層對于股市杠桿的擔憂。

二級市場股票結構化投資產品是指銀行籌資資金作為優先級，財務投資者作為劣后者，二者形成資產管理計劃，進行二級市場買賣。這一產品和傘形結構信托類似。

此次《征求意見稿》的出臺，市場主要關注點包括“打破剛性兌付”和“允許商業銀行以理財產品的名義開立資金賬戶和證券賬戶等相關賬戶，鼓勵資產產品開展直接投資”。而且，2015年《商業銀行法》的修改也有可能對這些方面進行重新立法，這將為銀行理財業務的發展帶來新的機遇。

當前，中國商業銀行理財產品仍以封閉式非凈值型為主，截至2014年6月30日，其占比已經達到了77.08%，這種封閉式非凈值型理財產品經常存在剛性兌付。一方面投資者缺乏相應的投資知識，傳統的思想使得投資者在購買銀行理財產品時，對理財產品的購買條款理解不足，誤以為銀行理財產品預期收益率就是保證收益率，在收益率不及預期甚至出現本金虧損的情況下，就會出現投資者與銀行的糾紛;另一方面，銀行在開展理財業務時也存在不盡職的情況，投資者教育不到位，在理財產品投資收益率不及預期甚至出現本金虧損的情況下，銀行為避免糾紛也多做出兜底等剛性兌付行為，投資者也會不再關注理財產品的風險，將其當作存款一樣進行投資。此外，中國利率管制和高利率也為銀行理財資金提供了較好的投資收益保障，一旦利率市場化加速導致利率降低，銀行理財產品當前的高收益也會面臨挑戰。

打破銀行理財產品剛性兌付的重要措施之一是實現理財產品凈值化。數據顯示，截至2014年6月30日，銀行理財產品中非凈值化產品占比為94.87%，凈值化產品占比為5.13%。凈值化產品有利于提高理財資金投資的透明度，有利于投資者理解理財產品的風險。目前，理財產品凈值化受到諸如投資品種的限制。數據顯示，截至2014年6月30日，理財產品資產約有68.49%投資于債券及貨幣市場、現金及銀行存款，非標債權約占22.77%，協議存款和非標債權由于缺乏良好的流通市場，其風險定價不夠成熟，未來改革的方向是資產證券化，為其提供資產定價和交易的平臺，促進理財產品的凈值化。

2013年10月，部分商業銀行開始試點債權直接融資工具和銀行發行資產管理計劃。通過與理財產品的對比可以看出，銀行資產管理計劃主要特點有：定期公布凈值、客戶承擔風險、透明度高。這也是《征求意見稿》要求的體現，實現理財業務真正回歸到代客理財，達到“賣者有責，買者自負”的效果。在試點過程中仍然有一些問題，諸如，預期收益率仍然繼續誤導投資者，信息披露不完善。

結構型理財產品是將存款、零息債券等固定收益產品與各類金融衍生品組合在一起而形成的新型金融產品。結構性理財產品越來越受到銀行的重視，主要有以下三點原因：第一，結構性產品的固定收益投資部分在會計核算上可計入結構性存款，有利于增加銀行存款規模;第二，結構性理財產品有助于打破銀行剛性兌付，受到銀行歡迎;第三，結構性理財產品從原理上是把高風險和低風險的金融產品組合在一起，滿足了中等風險偏好投資者的喜愛。

銀行理財業務困境

中國目前的理財人群以中小投資者為主，中短期理財產品受歡迎程度較高。在這種情況下，商業銀行把一般類的理財業務放到個人金融業務板塊，以充分發揮商業銀行大零售的優勢，主要提供標準化產品;同時針對富裕階層，商業銀行一般設有理財中心，提供半標準化、半個性化的理財產品;對于超高端客戶，商業銀行一般設立私人銀行或者財富中心，突出其私密性、專業性和專屬性，全面提供個性化、定制化產品，目前，中國商業銀行私人銀行業務剛剛起步，方興未艾。同時，商業銀行針對不同群體，根據客戶分層，結合其他業務部門，推出不同的卡服務和套餐。

從總體情況看，中國商業銀行大零售理財發展快速，而且這部分理財需求占到全部理財業務的絕對多數，各大商業銀行也爭相布局大零售，拓展理財業務。但是針對富裕階層和高端凈值客戶的服務還有待發展，這塊業務主要受到以下因素的制約：首先，專業人才缺失，盡管高端理財服務前景很好，但是受傳統觀念影響，優秀人才從事此項業務的積極性不高，而且當前，私人定制化服務不到位，仍然以銷售理財產品為主，這無法體現和發揮優秀人才的價值;其次，由于國外私人銀行等高端理財服務主要通過全權委托，但是中國商業銀行才剛剛試水，短期內難以取得客戶信任;第三，當前商業銀行收入以利息收入為主，中間業務收入由于利潤占比較低，在全行業務板塊中不受重視;最后客戶分層不明晰，大部分大型、中型商業銀行只有零售理財和私人銀行兩個部門，對于中間富裕階層沒有分層。

中國商業銀行理財資管業務一般包括財富管理部門、資產管理部門、資產托管部門以及私人銀行部。一般情況下，商業銀行財富管理的組織模式分為三種：掛靠模式、平行模式和獨立模式，目前中國商業銀行財富管理處于剛起步階段，財富管理多數掛靠于零售部門或者個人金融業務板塊下，未來發展方向是專業化，品牌化。

一般而言，掛靠在零售部門的財富管理業務屬于二級部門，國內多數商業銀行屬于這種情況，鮮有商業銀行把財富管理與私人銀行作為一級部門或者大事業部。美國商業銀行經歷較多的重組和并購，業務整合明顯，因此將業務設置成大板塊模式，類似于大事業部制，大中型銀行把全球財富管理與私人銀行作為一大業務板塊，與商業銀行、零售業務等平行。

私人銀行起源于歐洲，已經歷百年歷史，中國私人銀行業務才剛剛開始，但是發展很快，截至2014年6月30日，16家上市銀行已經有13家開通私人銀行業務，私人銀行所在地多為上海和廣州。據不完全統計，目前國內商業銀行的私人銀行管理的資產達到4.5萬億元，私人銀行客戶數量也達到35萬人，人均管理資產規模超過1000萬元。

目前，16家上市商業銀行中有13家開設私人銀行部，南京銀行鑫梅花理財中心類似于私人銀行，未來估計會有其他中小股份制銀行推出私人銀行。私人銀行門檻規模為600萬元或800萬元，部分大行達到1000萬元。從網點數量來看，截至2014年6月30日，中國銀行設立33個私人網點，農業銀行設立23個，建設銀行10個，招商銀行34個，平安銀行12個;建設銀行設立財富中心338個，中國銀行設立財富中心273個，招商銀行設立財富中心55個。

中國商業銀行私人銀行發展時間較短，目前處在起步階段，業務不夠成熟，由于受到監管制度的束縛、管理經驗不足、缺乏業務人才等原因，中國商業銀行私人銀行業務下一步發展面臨較大挑戰。在經歷了幾年快速擴張之后，目前私人銀行業務已經滑落到私人銀行關注度的第六名，而排在前三名的分別是個人消費貸款、財富管理和個人經營性貸款。但是在西方，私人銀行業務一般排在一級或者二級，地位足夠重要，比如匯豐銀行的全球私人銀行就作為四大業務板塊之一在全球開展業務。

2013年，國內商業銀行私人銀行規模大幅增長，中行私人銀行業務收入增長超過70%，民生銀行私人銀行業務手續費和傭金凈收入增長122.97%，并沒有形成良好的業績增長點。資產管理業務發展較好的招商銀行披露，其私人銀行業務在2010年實現凈利潤4億元，占當年凈利潤的1.6%。

近兩年成立的私人銀行虧損不斷，在跑馬圈地的背景下，面臨“福礦不富”的困局。目前私人銀行的富豪客戶主要是創一代、富一代，多為企業主，留住這些客戶，就將給銀行帶來更多的公司業務資源，而且有利于降低銀行和企業之間的信息不對稱，這對于商業銀行更加重要。

總體上看，中國私人銀行還沒有發生質變，如何突破傳統的理財銷售模式是當前私人銀行發展的關鍵，而突破的關鍵又在于銀行經營全面化，即擁有全牌照的銀行將具有優先發展的條件，國內目前平安銀行、中信銀行依托背后金融控股集團，可以為私人銀行客戶跨越銀行、資管、保險、信托、稅務等全方位服務，真正做到專屬性和專業性。招商銀行的理財業務發展最為可觀，其私銀客戶遠超其他中小股份制銀行，并與國有大行齊頭并進，而且其創新基因更強。

當前中國私人銀行的發展情況與銀行業發展階段密不可分，在利率市場化不斷推進和金融自由化趨勢的引導下，銀行業越來越重視中間業務收入，比如投資銀行、理財資管等。目前私人銀行業務仍然處于掛靠于零售部門，部分商業銀行抱有不落后的態度開展私人銀行業務，并沒有形成良好的利潤增長點，相反它卻成為了非私人銀行業務收入增長的保障。

銀行理財轉向資管

從2004年光大銀行推出首款理財產品算起，商業銀行理財業務已經走過了10年歷程，理財業務規模不斷擴大，滿足了不同層次投資者的需求，實現了居民財富的保值增值。2013年以來，互聯網金融的崛起，吸納了部分居民儲蓄和理財資金，給商業銀行理財業務帶來競爭壓力，2014年數據顯示，商業銀行儲蓄存款和理財資金規模同時下降。在降息通道已經打開的情況下，商業銀行理財產品的預期收益率出現微降，發行數量也有小幅減少。單純依靠投資債券和貨幣市場，很難再為投資者取得滿意的投資回報。此外，在利率市場化和民營銀行的沖擊下，國有銀行和股份制商業銀行也在積極拓展中間業務收入，理財資管業務是其中重要一項。

銀行業開展理財資管業務最大的優勢在于產品銷售和客戶數量，最大的劣勢在于資產管理能力?；鸷腿虛碛邢鄬ν晟频耐堆畜w系，經營比較成熟，但是銀行的銷售渠道對基金而言不可或缺。未來中國商業銀行理財資管業務的發展方向主要是著力發展個人理財業務。

《征求意見稿》對商業銀行開展理財業務做了進一步規定，鼓勵商業銀行直接投資，最多使用一層通道，避免層層嵌套，降低投資和交易成本，減少杠桿。據初步估計，券商托管的通道類業務高達8萬億元，銀行理財資金是主要的來源。去除通道、轉向直接投資對商業銀行提出了更高的要求，尤其體現在投資和研究能力。

研究分析、投資和交易能力是銀行理財業務轉型資管業務不可或缺的能力，較強的研究能力為投資和交易提供了基礎保障，這也是投資者非?？粗氐囊幻妗Ｅc基金、券商相比，銀行業由于長期受到嚴格監管，對資產管理涉足深度無法與基金、券商相比，這也是制約銀行業資管業務的重要因素。當前理財資金主要投資債券和貨幣市場，權益類投資較少，而且商業銀行多借助通道進行多元化投資，而資管業務投資方向幾乎覆蓋所有市場投資品種，商業銀行需要在投研方面提前布局，不斷提升代客理財的能力。可以考慮的一種形式是，銀行資管投研可以模仿基金公司，在建立自身投資和研究部門的基礎上，依托券商研發部門，等于壯大了買方力量。

目前，商業銀行開展理財資管業務與券商、基金和信托等專業性資管機構相比，有明顯的劣勢，首先是監管層的限制很嚴，尤其是對權益類投資品種的限制，這極大限制了商業銀行對產品線的豐富。從金融自由化趨勢來看，商業銀行理財資金投資股票、金融衍生品等權益類資產的限制將會打破。目前，按照監管允許的原則，商業銀行可以在開放式凈值型理財產品和結構化理財產品方面發力，一方面可以打破剛性兌付，減輕商業銀行兌付壓力;另一方面迎合投資者需求。商業銀行在自身投研基礎上，開發針對高凈值人群的理財產品，比如招商銀行針對金葵花客戶推出的“金葵花”焦點聯動系列產品，產品覆蓋股票、債券、存款、黃金等品種。在多樣化產品的基礎上，為客戶提供全面的服務，囊括財富管理、養老、旅游娛樂等多重領域。

理財直接融資工具是一種新型的創新金融工具，2013年銀監會開始組織部分商業銀行試點理財直接融資工具業務，2014年，試點范圍進一步擴大，已有20多家商業銀行參與試點。中國銀行新推出理財直接融資工具對接中鐵二十三局，以期支持實體經濟發展。《征求意見稿》第三十七條對商業銀行開展理財直接融資工具提出要求，商業銀行發起設立理財直接融資工具，應堅持投資資金與企業融資需求的直接對接，單獨建賬管理和風險隔離，資金投向明確，直接服務實體經濟。由于理財直接融資工具對于銀行貸款具有替代功能，監管層樂于看到理財資金投向實體經濟，這也是政策性金融的體現。但是商業銀行在從事理財直接融資工具時，會考慮利潤因素。

中國商業銀行理財資管部門多隸屬于零售或者個人金融板塊，獨立性和重要性地位不高。理財業務部門改革應伴隨著商業銀行業務變革而進行，在非利息收入不斷受到重視的條件下，理財業務部門，包括資管部門和私人銀行部門應該獲得更多的獨立地位。因此，在部門設置上把大資管部門作為一個整體作為一級部門，按照客戶分層的原則，個人理財業務可以放在個人金融或者零售金融板塊，為個人客戶提供標準化金融產品;為私人銀行部門配備專業私人銀行家，并提供業務后臺支持，以保證私人銀行的私密性和專屬性;資產管理部門可以更好的發揮與其它業務部門的聯動效應，包括產品開發和銷售，為該類客戶提供半標準化、半定制化的服務。

另外一個重要的改革思路是子公司制度，實現法人獨立運營。目前監管層對于理財業務、私人銀行部門的子公司制改革已經取得一致意見，未來將主要進行試點。2013年底，交通銀行資產管理部宣布探索事業部制改革，2014年7月，銀監會下發《關于完善銀行理財業務組織管理體系有關事項的通知》，銀行理財實業部制改革開始全面推動。數據顯示，目前，已經有450多家銀行完成理財業務事業部改制。

事業部制改革對銀行理財業務部門的單獨核算、風險隔離、行為規范、歸口管理等方面提出了新的要求，明確了理財業務部門經營決策權和一定程度的人、財、物支配權。從實際效果看，改革之后，銀行理財部門仍然為銀行內部，沒能實現真正的風險隔離和獨立經營決策，內部考核和薪酬激勵機制仍受制于銀行業平均水平，這使得銀行理財資管無法與資管同業展開更好競爭。

銀行理財業務部門和私人銀行部門下一步將從事業部制過渡到子公司制。目前中信銀行等銀行擁有資管子公司，子公司制改革帶來的好處主要有以下幾點： 第一，獨立經營決策，子公司制具有更好的風險控制的效果，可以將破產風險控制在銀行外部;另外更高的獨立性也有利于理財資管業務真正回歸“代客理財”，消除投資者心目中的銀行保本的影子，打破“剛性兌付”。

第二，回歸本源，強化激勵。銀行理財資管業務作為非傳統銀行業務，通過子公司制獨立運營，有利于理財資管業務回歸本源，以往銀行為了存款而沖時點，手段之一就是通過理財業務。理財業務的回歸有利于同業競爭和分業監管，銀行理財業務獨立法人經營，有利于理財資管與券商、基金等資管公司展開公平競爭，同時也有利于分業監管。此外，作為理財資管公司，其薪酬考核也將更多按照同業標準，這將對從業人員薪酬待遇有所提升，同時對從業人員的要求也會更高。

過去十年，銀行理財實現了從小到大的變化，2014年理財規模已經達到了約18萬億元。受政策套利和監管影響，銀行理財呈現出畸形的發展路徑，未來十年，理財產品低風險、高收益的情況一去不復返，銀行理財業務回歸代客理財、轉型資產管理業務已經成為業內和監管層的一致共識，這既是一種回歸正路，也是向更高層次的邁進。

在新的局面下，大銀行和中小銀行以及城商行開展理財資管業務應區別對待，未來十年，大銀行在市場中仍將占主導地位，主要以開放式、凈值型和結構類為主，其客戶優勢更加顯現，信譽優勢也將對客戶產生吸引作用，傳統渠道優勢在客戶服務方面會有新的作用，但同時，產品凈值化以后，管理規模大也將是大行資產管理的一大難題，規模太大，勢必會影響產品收益率;相反，小行具有更好的靈活性，資產管理規模小，而且未來資產管理業務拼的是管理能力和投資能力，規模并不是最主要的，小行的劣勢主要是客戶渠道和信譽無法與大行相比，以及產品工具偏少，因此，小銀行更需要努力提升投資和研究能力。

小銀行做資產管理需要突出差異化特色。第一，做強固定收益率資產，向凈值型產品轉變。固定收益率產品具有較高安全性，通過凈值化，又可以提高產品流動性，形成安全性和流動性兼備的差異化特色，在留住現有客戶的基礎上，吸引新的客戶。第二，跨界合作，拓展銷售渠道，豐富產品線，通過券商、信托等渠道，拓展投資品種，彌補工具不足的缺陷，同時通過其他商業銀行，拓展銷售渠道。大銀行具有強大的國家信譽以及客戶優勢，擁有廣泛的銷售渠道和產品線，良好的信用風險控制。國內大行一般都會有下屬子公司，包括信托、基金、保險、券商、資產管理公司等，這也是大行開展理財資管業務的獨特優勢。

篇6

【關鍵詞】 小瞼裂綜合征； FOXL2； 卵巢功能早衰； 突變

FOXL2基因是一個2.7 kb的單外顯子基因，編碼376個氨基酸，預期的蛋白質屬于翼狀螺旋/叉頭型轉錄因子調節家族，包含一個特有的101個氨基酸的forkhead DNA結構域和一個與此分離但功能尚未闡明的多聚丙氨酸肽段。小瞼裂綜合征（BPES）是表現為瞼裂狹小、上瞼下垂和倒轉型內眥贅皮等一系列癥狀的常染色體顯性遺傳病。臨床上分為兩型：Ⅰ型：女性患者不育，原發閉經或提前絕經、小子宮和卵巢功能早衰；Ⅱ型：男女患者均可生育。目前研究證實FOXL2基因與BPES的發病密切相關，是首選致病基因。

1 材料與方法

1.1 材料 參考The human FOXL2 mutation database（http：//medgen.ugent.be/foxl2/）[1]，搜集所有報道過的突變，共發現有144個變異位點，其中包括15個單核苷酸多態位點。對這些突變進行統計學處理并分類，同時進行蛋白表達譜分析，各功能區分析，以及患者的臨床特征與突變相關性分析。

1.2 突變位點的研究方法 （1）直接測序；（2）多重性連接依賴的探針擴增法；（3）微衛星位點分析和單核苷酸多態性分析；（4）熒光原位雜交技術分析。

1.3 前期實驗結果的分析 筆者對一期收集到的29例BPES患者血樣進行FOXL2基因突變研究，并將前期實驗中所得的突變結果進行分析歸類[2-3]。

2 結果

2.1 FOXL2的功能區 FOXL2的功能區包括forkhead DNA結合域（第52～152殘基區域）、功能尚未闡明的多聚丙氨酸肽段（221～234位氨基酸殘基區）以及轉錄激活區（第280～320殘基區域）。

2.2 分類結果 突變譜共分10型，具體分型如下：A：蛋白截短，無forkhead DNA結合域及其后的所有氨基酸；B：蛋白截短，包含部分forkhead DNA結合域；C：蛋白截短，包含完整forkhead DNA結合域，無多聚丙氨酸肽段及轉錄激活區；D：蛋白截短，包含完整forkhead DNA結合域和完整的多聚丙氨酸肽段，無轉錄激活區；E：轉錄激活區域突變，蛋白截短或延長，包含完整forkhead DNA結合域和完整的多聚丙氨酸肽段；F：轉錄激活區后的突變，蛋白截短或延長，包含完整forkhead DNA結合域、多聚丙氨酸肽段及轉錄激活區；G：多聚丙氨酸肽段框架內移碼突變，蛋白延長或截短；H：只有錯義突變，單個堿基的替換或顛換；I：包括微缺失及FOXL2基因與其他基因的染色體重排；J：其他突變，包括5′-UTR和3′-UTR區域變異。

2.3 患者的臨床特征與突變相關性分析結果 所有發現突變的患者均為典型的BPES，兩型BPES存在著基因型和表現型的相互關聯。同一個突變可導致明顯的家系內和家系間的表型多樣性，即表現型和基因型的多樣性。

A組突變由于forkhead區域的破壞致DNA結合能力的下降，從而導致FOXL2的單型缺陷；由于缺乏相關的信息，對B組不能作出相關性判斷；C組，蛋白截短，無多聚丙氨酸肽段及多聚脯氨酸肽段，發生POF幾率非常高，多為BPESⅠ型；D組，具有完整的forkhead和聚丙氨酸區域，蛋白截短，家系內存在表現型的多樣性；E組，具有完整的forkhead和聚丙氨酸區域，移碼突變導致蛋白延長，導致Ⅰ型和Ⅱ型BPES；F組的基因型與表現型亦不能作出相關性判斷；G組的多聚丙氨酸肽段突變框架移碼突變，導致聚丙氨酸擴增，發生在Ⅱ型BPES家系和類型不明確的家系中。多聚丙氨酸肽段延長，導致聚丙氨酸擴增，多發生在Ⅱ型BPES家系；H組錯義突變，由于病例數量少及缺乏相關的信息，不能作出判斷；I組發生在散發的患者和家族性BPES，多伴發智力低下；J組未引起任何蛋白變異，由于病例數量少及缺乏相關的信息，不能作出相關性判斷。

單純的卵巢功能早衰（POF）患者中發現的FOXL2的變異均為單核苷酸多態性（SNP），筆者對30例單純性上瞼下垂患者的FOXL2基因進行突變分析時未發現此基因的突變。

2.4 前期實驗中的突變的分析及歸類 筆者對一期收集到的29例BPES患者及100例眼瞼發育正常的人的血樣提取FOXL2基因進行突變研究，發現的3個突變位點分別為892C>T、951～953delC及901～930dup30。

892C>T為無義突變，蛋白截短，包含完整forkhead DNA結合域，但無多聚丙氨酸肽段及多聚脯氨酸肽段，屬于C組；951～953delC為缺失突變后引起移碼突變，蛋白截短，包含完整forkhead DNA結合域和多聚丙氨酸肽段，無多聚脯氨酸肽段，屬于D組；901～930dup30為重復突變，多聚丙氨酸肽段框架內移位突變，蛋白延長，屬于G組。

另外，據報道的中國人BPES患者中FOXL2基因的突變共有24種，除去筆者報道的3種[2-3]，其余21種分組情況如下：475dupC屬于B組；704delG及804dupC屬于D組；1091 delC屬于E組；1041～1042 insC屬于F組；909～938 dup30及933～965dup33屬于G組；H組突變比較多，分別為425 T>C；773C>G；655C>T；370 A>G；340A>G；384G>A；241T>C；650C>G；50CTA及2293-2294insT屬于J組；其中672～701dup30；663～692dup30以及858～874dup17不屬于以上突變分型的任何分組，提示在這些突變區域可能存在其他功能部位[4-13]。

3 討論

轉錄因子的轉錄激活區分為3類：酸性激活區、谷氨酰胺富含區和脯氨酸富含區。國內外學者對FOXL2功能區的研究只提出其forkhead DNA結合區和一個與此分離的多聚丙氨酸區域，并未提及轉錄激活區。通過對FOXL2功能域的分析，未發現明顯的酸性區及谷氨酰胺富含區，只有一個脯氨酸富含區，即280～320區域，此區內脯氨酸含量高達45%，因此，筆者認為此區為FOXL2的轉錄激活區。另外，突變譜的結果亦顯示此區域為突變高發區，認為是由于轉錄激活區的突變使轉錄因子失去轉錄功能而導致其作用蛋白的功能異常，從而導致疾病的發生。

突變類型的分組與De Baere等[14]的分組略有不同，筆者主要是根據FOXL2功能區進行突變類型的分組，如此可以更好的了解FOXL2突變與功能的關系，從而為明確FOXL2的確切致病機理提供依據。De Baere等[14]在對多例BPES家系研究后提出由同一個突變可導致明顯的家系內和家系間的表型多樣性，即表現型和基因型的多樣性，筆者認為主要是由于基因背景不同和基因的相互作用造成的。

FOXL2控制瞼裂發育的目標基因尚不清楚。據推測，FOXL2很可能是控制某些基因，如TGF-α、EGFr、Inhbb、控制睜眼及瞼裂的基因位點，而這些基因與其他與眼前節發育有關的轉錄因子共同影響瞼裂的發育，如Pax6、Bmp4、Bmp7等[15-16]。另外，有研究發現，FOXL2的一個同源基因FOXO對某些調節細胞周期的抗凋亡或促凋亡基因有調節作用。FOXL2可能參與了對胚胎早期眼瞼及眼周肌肉發育過程中某些調節細胞周期的抗凋亡或促凋亡基因的調節，其具體的作用機制，還有待于進一步地研究證實。

綜上所述，FOXL2的突變與BPES發病密切相關，任何區域的突變都可以導致其功能異常，從而導致BPES。多聚丙氨酸區域的喪失與Ⅰ型BPES密切相關。FOXL2的突變與單純性POF及上瞼下垂的發病關系并不密切。

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篇7

北師大版普通高中課程標準試驗教科書生物《必修2》第5章第1節。

2 教材分析

2.1 教材分析

基因突變是高中生物學課程內容標準是北師大版必修2“遺傳與進化”模塊第5章“遺傳信息的改變”第1節內容。本節內容介紹了變異的類型、基因突變的概念、特點、意義、基因突變發生的原因及人工誘變在育種上的應用。教材鐮刀型細胞貧血癥為實例實例引出基因突變現象，既便于學生理解，又從不同的角度分析了基因突變的概念、原因及基因突變的特點。

重點：基因突變的概念、產生原因、結果和基因突變的特點。

難點：歸納總結基因突變的概念和原因；基因突變與性狀的關系；變異的不定向性與總是突變為原基因的等位基因的關系。

前后知識的聯系：與前面DNA的結構和堿基對的排列順序代表了遺傳信息，基因的概念和表達相聯系。與生物進化和育種聯系。

2.2 學情分析

學生通過有絲分裂、減數分裂、遺傳的物質基礎、基因的表達和遺傳的基本規律的學習，對生物的遺傳有了較深入的理解，對于生物的變異現象在生活中也有一定了解，但是對為什么會發生變化？怎樣變化？發生的變化對生物會產生什么影響？，還不知道。因此，根據班級學生的實際情況，在教學過程中需要聯系生活經驗，前面已有知識基礎，適時啟發，及時設疑，經分析、歸納總結，力爭讓學生自己得出結論并理解。

3 設計思想

教學活動圍繞著對基因突變的實例展開，理解基因突變的內涵，把握基因突變的外延、特點以及與生物變異和進化的關系；強化核心概念的教學，注重知識與生活、實踐應用的聯系。

4 教學目標設計

知識目標

4.1 概述基因突變的概念、產生原因和結果；

4.2 舉例說明基因突變可以自發產生，也可以誘發產生；

4.3 舉例說明基因突變有普遍性、隨機性、不定向性、自然突變頻率低和多害少利等特點。

能力目標

4.3.1 自我收集資料并探究和討論，實現自主學習和合作學習的能力。

4.3.2 收集有關人工誘變育種、太空育種等事例，進一步理解基因突變的特點，了解人工誘變在育種上的應用。

情感態度與價值觀目標

（1）探討生物遺傳病的發生是誘發基因突變的結果，預防遺傳病的發生。

（2）收集我國有關人工誘變的事例，培養學生的探究、創新精神和愛國情懷。

5 學法指導

從實例分析入手，按照認知的規律從現象到概念，從宏觀到微觀來歸納總結出基因突變的概念和特點；利用繪圖、前后聯系以及跨學科類比等方法引導學生不斷地探究、思考、分析和討論，幫助學生理解基因突變概念、結果以及與性狀的關系。最后通過概念圖的形式將所學內容進行整合。

6 教學過程

導入：

設疑：自然界生物多種多樣，子代性狀與親代相似的叫遺傳，同時又有子代性狀與親代不同的。這種現象在遺傳學上稱為什么呢？

（學生思考）――變異

提問：在生活中既有父母單眼皮而生了個是雙眼皮的女兒，也有武漢一愛美的女性通過手術整形將自己變成了美女，這是否變異？這種性狀的改變能否傳遞給后代呢？

（學生思考）――是，前者能，后者不能

（教師展示圖片，聯系前面生物表現型與基因型、環境的關系）學生活動：學生觀察圖片并分析討論。

教師總結并板書：變異分為不可遺傳的變異（僅由環境因素引起的性狀改變）和可遺傳的變異，包括基因突變、基因重組和染色體變異。

這節課我們來探討學習可遺傳變異中的基因突變。

板書：第5章 遺傳信息的改變

第1節 基因突變

教師介紹鐮刀型細胞貧血癥的發現過程，聯系到細胞呼吸探討貧血的原因，再展示正常紅細胞與鐮刀型細胞貧血癥患者的紅細胞圖片，證實鐮刀型紅細胞攜帶氧氣的能力不足，聯系血紅蛋白的作用進一步推測血紅蛋白結構可能不同。

1956年，英格拉姆等人分析，發現正常的血紅蛋白和鐮刀型細胞的血紅蛋白有一個肽段的位置不同?；脽粽故菊：彤惓Ｑt蛋白分子的部分氨基酸順序。

正常……纈氨酸―組氨酸―亮氨酸―蘇氨酸―脯氨酸―谷氨酸―谷氨酸―賴氨酸―

異常……纈氨酸―組氨酸―亮氨酸―蘇氨酸―脯氨酸―纈氨酸―谷氨酸―賴氨酸―

設疑：

1、哪個氨基酸發生了改變？氨基酸的種類和排列順序由什么來決定？

2、密碼子的堿基排列順序又由什么決定？

3、鐮刀型細胞貧血癥的直接原因是？根本原因是？

教師總結：鐮刀型細胞貧血癥直接原因是血紅蛋白的一個氨基酸發生了替換，根本原因是基因中一個堿基對的替換導致基因結構的改變。

設疑： 聯系DNA的結構思考除了堿基對的替換外，還有哪些變化會引起基因結構的改變？基因結構改變一定會導致性狀改變嗎？

（學生思考討論并回答）――堿基對的增添或缺失

類比理解：遺傳物質DNA一樣不同的堿基（A G C T）排列順序代表不同的信息。與英文句子由一個個字母組成，如有這樣一個英文句子“The cat sat on the mat”。隨機叫一小組的同學抄下來，每位同學可隨意的替換或增添或減少字母，最后讓學生看變后的意思是否改變，又是否一樣，體會基因突變的方式和根本原因。

練習：就下面已經給出正常的DNA分子的堿基序列，分析當堿基分別發生如下變化時，翻譯成的氨基酸序列將如何變化？ （1）第1個位點上的堿基A被堿基G或堿基C所替代；（2）第5個位點上的T發生了缺失；第5、6兩個堿基發生缺失；第4、5、6三個堿基都發生缺失；（3）第5個位點和第6個位點之間插入一個堿基A；插入兩個堿基A、C；插入三個堿基A、C、G。

問題：從中你能得出哪些結論？

（1）DNA分子中發生堿基對的替換、增添或缺失，都能引起基因結構的改變。

（2）堿基對的替換不一定會引起氨基酸排列順序的改變。

（3）缺失或增加1個堿基或2個堿基比缺失3個堿基的影響大。

1、概念

由于DNA分子中堿基對的增添、缺失或改變都會引起基因結構改變。因此，基因突變的實質就是基因結構的改變。

引入下一知識內容：DNA的結構具有穩定性，復制會解旋為單鏈，那么什么時候容易發生基因突變呢？

2、時期：有絲分裂間期和減數第一次分裂間期

癌癥就是原癌基因與抑癌基因的發生突變逐漸的結果，在生活中有什么因素容易引發發生基因突變呢？

物理因素：在強日光照射下容易得皮膚癌；在醫院放射室工作的醫生容易得癌癥等；

化學因素：咸菜等腌制食品必須檢測亞硝酸鹽的含量，亞硝酸鹽含量過多可能會致癌等）

教師總結誘發基因突變的因素：

3、引起基因突變的因素

1、外因：

（1）物理因素：紫外線、X射線、中子流、激光等；

（2）化學因素：亞硝酸鹽、堿基類似物等；

（3）生物因素：某些病毒、細菌的代謝產物等。

2、內因： DNA復制過程中出錯。

4、基因突變的結果：

（1）產生新基因，是變異的根本來源。

（2）總是突變為原基因的等位基因（在染色體上的位置和控制對象沒變）。

（3）基因突變生物性狀不一定改變（密碼子的簡并性）。

5、基因突變的特點：

自然界中，肝炎病毒會突變；動物、植物、真核、原核等都能突變。說明基因突變在生物界中是廣泛存在的。

（1）：普遍性

資料：幾種生物不同基因的自然突變率

生物名稱 突變類型 突變頻率 單 位

大腸桿菌 組氨酸缺陷型 2×10 ―6 每個配子的突變頻率

玉米 皺縮種子 1×10 ―6 每個配子的突變頻率

果蠅 白眼 4×10 ― 5 每個配子的突變頻率

學生分析：各種生物的突變頻率的數量級別在10―5到10―6，說明突變頻率極低。

（2）基因突變的低頻性――DNA具有穩定性

展示4個幻燈片，引導探究：殘翅果蠅、短腿安康羊、玉米白化苗、圖片。

（3）：基因突變的隨機性

基因突變可以發生在生物個體發育的任何時期；可以發生在細胞內不同的DNA分子上；同一DNA分子的不同部位。

（4）：基因突變的不定向性和可逆性。

以基因A為例，它不但可以突變成為a1，而且還可能突變為a2、a3等一系列的等位基因。如：控制果蠅野生型紅眼的基因（w+）可以突變成白眼（w），也可以突變成杏色眼（wa）、淺黃色眼（wb）、櫻紅色眼（wc）。

（5）基因突變多害少利性――可能破壞與環境協調

引導學生思考分析：生物發生的基因突變一般是利少害多不是絕對的，取決于環境。

教師說明：一個物種在漫長的進化歷程中，由許多個體構成物種，生物發生的基因突變是不少的，其中也有不少的有利變異，所以可以促進生物的進化是很有意義的。

6、基因突變的意義和應用

基因突變是新基因產生的途徑，是生物變異的根本來源，是生物進化的原始材料。

應用一：在培育農作物新品種方面的應用。

舉例：我國培育的太空椒、“黑農五號”大豆等。

學生思考：（1）為什么選擇萌發的種子或幼苗（分裂旺盛）

（2）太空遨游后的種子是否都發生了突變？是否都變得更好了？是否按人們希望的方向在變？已變好的又是否會變回去呢？

歸納總結：應用二：在為生物育種方面的應用。

篇8

[關鍵詞] DNA甲基化；MGMT基因；qPCR；DNA探針；鋸齒狀病變

[中圖分類號] R735.3 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-7210（2014）01（b）-0011-06

Expression and significance of MGMT gene methylation status in colorectal serrated lesions

XU Chunwei WANG Luping GE Chang

Department of Pathology， the Military General Hospital of Beijing PLA， Beijing 100700， China

[Abstract] Objective To discuss patients with serrated lesions tissues MGMT gene methylation status and MGMT protein expression and cancer pathways and the role and clinical significance of MGMT gene in different age paragraph methylation level. Methods From 2007 to 2013 in the Military General Hospital of Beijing PLA， 225 cases of serrated lesions [96 cases of hyperplastic polyp （HP）， 61 cases of sessile serrated adenoma/polyp （SSA/P） and 68 cases of traditional serrated adenoma （TSA）]， 54 cases of tubular adenoma （TA）， 69 cases of colorectal cancer （CRC） and 42 cases of normal colorectal mucosa tissues were selected； MGMT gene methylation status of CpG island was detected by qPCR applications Taqman probe （MethyLight） methods， methylation state of amplification target fragment was verified by by sequencing method， at the same time， MGMT protein expression in 116 cases of serrated lesions （including 52 cases of HP， 41 cases of SSA/P， 23 cases of TSA）， 20 cases of TA， 24 cases of CRC， 24 cases of normal colorectal mucosa tissue was detected by immunohistochemical method. Results The differences of MGMT gene promoter methylation state and degree of abnormal MGMT protein positive degree in the serrated lesions and the control group were statistically significant （P < 0.05）， the negative correlation was found； the positive correlation was found between frequency of MGMT gene promoter methylation and different age paragraph， but the difference was not statistically significant （P > 0.05）. Conclusion Organization MGMT gene methylation may induce the protein expression in the main reason for the downgrade， it plays an important role in serrated canceration pathway of hyperplastic polyps-serrated adenoma-carcinoma.

[Key words] DNA methylation； MGMT gene； qPCR； DNA probe； Serrated lesions

鋸齒狀病變是一組具有鋸齒狀（波浪狀或星狀）結構的異質性上皮病變，包括增生肉（hyperplastic polyp，HP）、廣基（無蒂）鋸齒狀腺瘤/息肉（sessile serrated adenoma/polyp，SSA/P）、傳統型鋸齒狀腺瘤（traditional serrated adenoma，TSA）。新近統計發現，結直腸癌（colorectal cancer，CRC）中60%的來自普通腺瘤，35%來自“增生肉-鋸齒狀腺瘤-癌”這條鋸齒狀通路[1]，特別是鋸齒狀病變的CpG島甲基化表型（CpG island methylator phenotyp，CIMP）。鋸齒狀通路涉及一系列異常的表觀遺傳學修飾[2]。這些異常修飾中以DNA甲基化最常見。DNA異常甲基化分為A型和C型，前者與年齡因素有關，年齡越大，甲基化頻率越高，后者與腫瘤相關，通過引起相關基因表達下調或沉默，促進腫瘤的發生發展[3]。

MGMT為DNA損傷修復基因，定位于人類染色體10q26，全長170 kb，由5個外顯子，4個內含子組成。啟動子富含GC堿基，順式作用元件有CpG島中的6個Spl位點、2個糖皮質激素反應元件（GRE），AP-I元件等。cDNA長約769 bp，編碼207個氨基酸組成的蛋白質。MGMT序列具有相對穩定性，從結腸桿菌到哺乳動物均含有結構一致的“-異亮氨酸-脯氨酸-半胱氨酸-組氨酸-精氨酸-纈氨酸-”（IPCHRV）活性基序列，活性位點在145位半胱氨酸殘基上[4]。本研究通過MethyLight方法，一方面分析鋸齒狀病變中MGMT基因啟動子區CpG島甲基化狀態和免疫組化中MGMT蛋白的表達情況，在基因層面和蛋白層面對MGMT進行初步探究，另一方面分析鋸齒狀病變中MGMT基因啟動子區CpG島甲基化狀態和年齡相關因素情況，在甲基化和年齡上對MGMT進行初步探究。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 標本 收集總醫院2007～2013年病理診斷為各類結直腸息肉和腺瘤切片4810例，從中篩選出腺體具有鋸齒狀特征的息肉及腺瘤，進行組織學診斷及分類。由3名病理醫師按WHO（2010）消化系統腫瘤分類及文獻標準[5-9]4～5輪回顧性閱片。從中篩選出225例鋸齒狀病變（96例HP、61例SSA/P和68例TSA）作為實驗組，并以54例管狀腺瘤（tubular adenoma，TA）、42例正常結直腸黏膜組織和69例CRC作為對照。

1.1.2 主要試劑和儀器 DNA提取試劑盒購自德國QIAGEN公司，甲基化修飾試劑盒為美國ZYMO公司產品，核酸蛋白質濃度測量儀B-500購自上海創萌生物科技有限公司，甲基化陽性/陰性對照為美國ZYMO公司產品，qPCR反應試劑ROX購自TaKaRa公司，Mix購自上海輝睿生物科技有限公司，MGMT抗體購自中杉金橋公司（1∶500稀釋），內參基因β-肌動蛋白（β-actin）引物和探針參照文獻[10]設計，甲基化引物和探針由上海輝睿生物科技有限公司合成。Mx3000P定量PCR擴增儀為美國Stratagene公司產品。

1.2方法

1.2.1 甲基化引物和探針設計 MGMT基因序列參照GenBank（http：//ncbi.nlm.nih.gov），GenBank Accession：NC_000010。甲基化引物和探針由Beacon Designer7.9軟件設計，設計標準：引物擴增片段大小在80～150 bp范圍，引物長度17～25 bp，GC含量在40%～70%，兩條引物的Tm值盡量接近。避免引物內部或之間形成3 bp以上的互補序列。探針長度20～30 bp，探針的Tm值比引物高5～10℃，探針內標或探針與引物之間避免形成3 bp以上的互補序列，對其進行BLAST檢查，引物和探針符合要求，并由上海輝睿生物科技有限公司合成。見表1。

1.2.2 DNA提取 采用QIAamp DNA FFPE Tissue Kit試劑盒提取組織DNA，將含有DNA組織的蠟塊連切5張10 μm的厚蠟膜，嚴格按照試劑盒說明步驟進行操作。并測定其純度和濃度備用。

1.2.3 甲基化修飾 采用EZ DNA Methylation-GoldTM Kit（D5005）試劑盒，嚴格按照試劑盒說明步驟進行操作。經此步后，DNA序列中未甲基化的胞嘧啶（C）轉變為尿嘧啶（U）。

1.2.4 MethyLight PCR反應體系（20 μL）：2×Taq PCR Master Mix 10 μL；修飾后的DNA模板2 μL；上、下游引物各1 μL（10 pmol）；探針FAM 0.4 μL（10 pmol）；ROX 0.3 μL。反應條件：94℃預變性5 min；94℃ 30 s，56℃ 45 s，72℃ 45 s，共50個循環；72℃延伸5 min，4℃冷卻5 min。每例標本設兩個復孔，經亞硫酸氫鹽修飾的Human Methylated & Non-methylated DNA Set作為陽性、陰性對照，水為空白對照。

1.2.5 測序法驗證擴增序列 PCR擴增產物送北京金唯智生物科技有限公司測序，由于擴增序列（94 bp）過小，連接到質粒作為載體后，用通用引物的方法測序，結果如圖1所示，測序目的片段和Beacon Designer 7.9軟件設計序列吻合。

甲基化片段中CpG二核苷酸的胞嘧啶保持不變

圖1 MGMT基因擴增片段部分測序圖

1.2.6 免疫組織化學染色 所有標本常規石蠟包埋，4 μm厚連續切片，60℃溫箱烘烤90 min。采用EnVision二步法，實驗過程嚴格按照試劑盒說明書進行，高溫高壓抗原修復，DAB顯色，磷酸鹽緩沖液（PBS）代替一抗為陰性對照，已知陽性的結腸腺體組織為陽性對照。

1.2.7 結果判斷標準 MethyLight結果判斷標準[11]：同時擴增目的基因（MGMT）和內參基因（β-actin），根據標準曲線得到兩者的原始拷貝數，計算標準甲基化指數（normalized index of methylation，NIM）其定義為：NIM=[（MGMT sample/MGMT positive）β-actin sample/β-actin positive）]×100，其中MGMT sample指樣本中甲基化MGMT基因的拷貝數，MGMT positive指陽性對照中甲基化MGMT基因的拷貝數，β-actin sample和β-actin positve與上述相同。NIM≥4為甲基化，NIM25%～50%為2分，Ⅲ級>50%～75%為3分，Ⅳ級>75%～100%為4分。染色強度計分：Ⅰ級淡黃色為1分，Ⅱ級棕黃色為2分，Ⅲ級棕褐色為3分。每張切片兩種評分之乘積為該切片最后的表達強度：0分為（-），1～3分為（+），4～6分為（++），≥7分為（+++）。

1.3 統計學方法

所有數據采用SPSS 19.0統計軟件，正態分布計量資料以均數±標準差（x±s）表示。甲基化結果運用χ2及Fisher確切概率法，免疫組化結果使用多組有序秩和檢驗，兩組間比較運用Bonferroni檢驗，甲基化和蛋白表達相關性及甲基化和年齡相關性運用Pearson相關法進行統計學處理，以P < 0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 臨床資料特征

225例鋸齒狀病變中HP 96例、SSA/P 61例、TSA 68例，分別占鋸齒狀病變的42.67%、27.11%和30.22%，96例HP中，男63例，女33例，男性多見，年齡31～88歲，平均（56.052±12.448）歲；61例SSA/P中，男43例，女18例，男性多見，年齡23～84歲，平均（56.665±14.976）歲；68例TSA中，男46例，女22例，男性多見，年齡30～85歲，平均（59.470±12.506）歲。

2.2 MGMT基因標準曲線分析

將陽性對照按10的倍數稀釋成1～1×10-6 7個濃度梯度制作標準曲線（其拷貝數為103～109/mL），各濃度梯度反應均做復孔。MethyLight的線性范圍為104～108拷貝/mL，R2為0.942。

2.3 MGMT基因啟動子CpG島甲基化狀態

MGMT基因啟動子CpG島甲基化陽性表達率在正常組、TA組、HP組、SSA/P組、TSA組和CRC組分別為0.00%（0/42）、46.30%（25/54）、26.04%（25/96）、60.66%（37/61）、76.47%（52/68）和68.12%（47/69），各組差異有高度統計學意義（χ2 = 112.790，P = 0.000）。正常組與SSA/P、TSA、TA、CRC組之間差異有統計學意義（P < 0.05），HP組與SSA/P、TSA、CRC組之間差異有統計學意義（P < 0.05），其余各組差異無統計學意義（P > 0.05）。見表2、圖2（見封三）。

表2 MGMT基因CpG島甲基化陽性率統計結果[n（%）]

注：與正常組比較，P < 0.05；與HP組比較，P < 0.05；HP：增生肉；TA：管狀腺瘤；SSA/P：廣基（無蒂）鋸齒狀腺瘤/息肉；TSA：傳統型鋸齒狀腺瘤；CRC：結直腸癌

2.4 MGMT蛋白陽性表達率

MGMT蛋白陽性表達率在正常組、TA組、HP組、SSA/P組、TSA組和CRC組分別為100.00%（24/24）、80.00%（16/20）、98.08%（51/52）、78.05%（32/41）、69.57%（16/23）和70.83%（17/24），差異有高度統計學意義（χ2 = 26.641，P = 0.000）。正常組與HP、SSA/P、TSA、TA、CRC組之間差異有統計學意義（P < 0.05），HP組與SSA/P組、TSA組、TA組和CRC組之間差異有統計學意義（P < 0.05），其余各組差異無統計學意義（P > 0.05）。見表3、圖3。

2.5 MGMT基因甲基化與MGMT蛋白相關性分析

經統計學分析顯示，TA、SSA/P、TSA、CRC三組中MGMT甲基化與MGMT蛋白表達結果差異有統計學意義（P < 0.05），且相關性為負相關，相關系數分別為r = -0.500、-0.361、-0.437、-0.412；HP中MGMT甲基化與MGMT蛋白表達結果差異無統計學意義（P > 0.05），但相關性為負相關，相關系數為r = -0.220。見表4。

2.6 MGMT基因甲基化與年齡相關性分析

經統計學分析顯示，TA、HP、SSA/P、TSA四組中MGMT基因甲基化與年齡差異均無統計學意義（P > 0.05）。MGMT基因甲基化與年齡相關性為正相關，與TA、HP、SSA/P、TSA相關系數分別為0.042、0.009、0.087、0.138。見表5。

3 討論

CRC是最常見的惡性消化道腫瘤之一，全球CRC每年新發病例數達123萬，死亡約為發病率的1/2。近年研究表明，CRC發病率目前仍呈持續增長態勢，其原因之一就是對結直腸鋸齒狀病變認識不足[2，13]。2010年WHO消化系統腫瘤病理學和遺傳學分類中對鋸齒狀病變的分類比以往更為詳細[9]，HP在鋸齒狀病變中最常見，占所有病變的75%以上，根據組織學上的微小差別分為微泡性增生肉（microvesicular hyperplastic polyp，MVHP）、富于杯狀細胞的增生肉（goblet-cell rich hyperplastic polyp，GCHP）、寡黏液型增生肉（mucin-poor type，MPHP）[14]。SSA/P占鋸齒狀病變的15%～25%，根據細胞異型性分為伴/不伴有細胞異性增生型[14-16]。TSA不常見占鋸齒狀病變的1%左右，特征為具有整體復雜結構域纖維狀生長方式，常顯示細胞異型特點，與TA及伴細胞異型的SSA不同[14，17]。TSA一般與高MSI癌無關，可能與低MSI有關[6]。近年來從分子遺傳學角度對鋸齒狀病變進行研究發現，結直腸鋸齒狀病變通路是一個多因素、多階段、多基因連續累積發生的過程，在此演變過程中有眾多CRC相關基因參與。鋸齒狀通路分為：①無蒂（廣基）鋸齒通路：以SSA/P和MVHP為代表，癌變機制為BRAF突變，引起錯配修復基因h-MLH-1甲基化和高水平CpG島甲基化現象，導致腺體不同程度異型性增生直至癌變。②傳統鋸齒狀通路：包括TSA和GCHP，癌變機制為K-RAS基因突變，引起DNA修復基因MGMT甲基化和低高水平CpG島甲基化現象等。MGMT基因甲基化后，引起一些基因沉默，導致腺體異型性增加，進一步發展為癌。鋸齒狀通路中有眾多異?；蚣谆?，若能深入研究并加以利用，不僅可以用于CRC的早期診斷、高危人群的監測、癌變風險評估等，還可為CRC靶向治療藥物提供理論依據支持[1，18]。

在本實驗基因層面研究中發現正常黏膜組織、TA、HP、SSA/P和TSA中均有MGMT基因啟動子CpG島甲基化，實驗組鋸齒狀病變HP、SSA/P和TSA甲基化率為26.04%（25/96）、60.66%（37/61）和76.47%（52/68），對照組正常黏膜組織、TA和CRC的甲基化率為0.00%（0/42）、46.30%（25/54）和68.12%（47/69）。Dhir等[18]在18例TA中檢測到甲基化率為47.1%，29例不伴異型性的SSA/P中檢測到甲基化率為29.63%，19例伴有異型性的SSA/P中檢測到甲基化率為52.63%，在9例HP中檢測到甲基化率為14.29%，本研究中對照組的TA和實驗組的SSA/P的甲基化率與以上研究結果基本符合，但實驗組HP的甲基化率明顯高于Dhir等[18]研究，這可能與樣本量、樣本來源、引物在CpG島的位置不同等因素引起系統誤差有關。本研究對照組與實驗組組間比較過程中，對照組正常黏膜組織與實驗組SSA/P（P = 0.000）和TSA（P = 0.000）有顯著性差異，與實驗組HP（P = 0.230）差異性不顯著；對照組CRC與實驗組HP（P = 0.000），與實驗組SSA/P（P = 0.375）和TSA（P = 0.275）差異性不顯著；對照組TA與實驗組HP（P = 0.012）和TSA（P = 0.001）有顯著性差異，與實驗組SSA/P（P = 0.123）差異性不顯著；實驗組組組間比較過程中，HP和SSA/P（P = 0.000），HP和TSA（P = 0.000）組間有顯著性差異， SSA/P和TSA（P = 0.053）組間差異性不顯著。在本實驗蛋白層面運用免疫組化方法研究中發現實驗組HP、SSA/P和TSA蛋白表達陽性率為98.08%（51/52）、78.05%（32/41）和69.57%（16/23），對照組正常黏膜組織、TA和CRC中蛋白表達陽性率為100%（24/24）、80.00%（16/20）和70.83%（17/24）。與Sawyer等[19]對39例SA運用免疫組化方法發現MGMT陽性表達率為18%（7/39）相比，在本實驗中，SSA/P蛋白陽性表達率[78.05%（32/41）]和TSA蛋白陽性表達率[69.57%（16/23）]明顯高于Sawyer等[9]研究，具體原因可能與甲基化引物設計、樣本來源、樣本量大小等因素有關。本研究對照組與實驗組組間比較過程中，對照組正常黏膜組織與實驗組HP（P = 0.001）、SSA/P（P = 0.000）和TSA（P = 0.000）有顯著性差異；對照組CRC與實驗組HP（P = 0.001）有顯著性差異，但SSA/P（P = 0.515）和TSA（P = 1.000）差異性不顯著；對照組TA與實驗組HP（P = 0.029）有顯著性差異，但與實驗組SSA/P（P = 1.000）和TSA（P = 0.434）差異性均不顯著；實驗組與實驗組組間比較過程中，HP和TSA（P = 0.001），HP和SSA/P（P = 0.006）中組間有顯著性差異，但在SSA/P和TSA（P = 0.452）中組間差異性均不顯著。在本實驗MGMT基因甲基化與蛋白表達相關性研究中，發現在實驗組HP、SSA/P和TSA中分別呈弱相關（P = 0.117，r = -0.220）、弱相關（P = 0.020，r = -0.361）及中等程度相關（P = 0.037，r = -0.437），對照組正常黏膜組織、TA和CRC中，正常黏膜組織運用Pearson法無法計算相關性，TA中呈中等程度相關（P = 0.025，r = -0.500），CRC中呈中等程度相關（P = 0.046，r = -0.412）。通過數據可以看出，在實驗組中HP、SSA/P和TSA基因甲基化和蛋白表達有顯著性差異，相關性分別為弱相關、弱相關和中等程度相關；在對照組中TA和CRC基因甲基化和蛋白表達有顯著性差異，相關性都為中等程度相關。通過基因層面和蛋白層面及兩者相關性的探究，推測在鋸齒狀病變通路中MGMT基因啟動子甲基化有誘導MGMT蛋白表達下調，在鋸齒狀通路的發生發展中起重要作用。在年齡相關性甲基化研究方面，在基因目的序列（-107～-200）這部分的位點上實驗組HP（P = 0.931，r = 0.009）、SSA/P（P = 0.763，r = 0.042）和TSA（P = 0.263，r = 0.138）及對照組TA（P = 0.763，r = 0.042）中差異性均不顯著（P > 0.05），且相關性為弱正相關。

綜上所述，MGMT基因啟動子CpG島甲基化可能導致MGMT蛋白表達下調，與鋸齒狀病變的發生、發展密切相關，在無蒂（廣基）鋸齒通路和傳統鋸齒狀通路中起重要推動作用，是CRC發生重要的分子事件。

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篇9

2、耳筒有零件壞了,貌似修理換零件也找不到配件吧。

3、解鎖打開iphone，進入主屏幕HOME，找到設置應用，觸摸點擊設置。

4、打開設置后，下拉，找到通用設置，打開通用。

5、打開后下拉滑動，找到聽覺這欄，如下圖所示，看到有左——控制鈕——右，我們可以滑動這個控制按鈕向左或者向右，到最左時候就是做左耳機聲音最大，右耳機沒有聲音，反向同理相反。控制按鈕在中間控制線處聲音是均衡的！

篇10

圖一，圖二

所謂烏銅是銅與金的合金，表面烏黑而富有光澤。烏銅走銀法則是將銀屑嵌入烏銅器表面已鏨刻好的花紋內，再加熱將銀屑熔化，使銀與銅成半合金狀態，稍待冷卻，用手急擦，使汗汁浸漬到走銀處，使銅、銀結合處更加穩定和富有光澤。而一般“金銀錯”工藝是將金、銀屑或絲嵌入銅器表面鏤刻的紋路內，再用錯石將其打磨光滑即可。烏銅走銀法來源于“金銀錯”，但工藝更為精湛，所嵌銀絲更細，圖案更為生動傳神，較同時期福建銅嵌銀絲器質量更優，在中國近代銅制品中，堪稱一絕。

烏銅走銀技術起源于清末云南石屏縣。據傳石屏一岳姓銅匠在冶煉紫銅時，不慎將所戴金戒指落入所煉銅中，后來發現其所鑄銅器表面烏黑如煤，遂在銅器表面鏨刻花紋，嵌入銀屑，制成了最早的烏銅走銀器。由于所嵌銀屑與烏銅背景形成鮮明的黑白對比，風格獨特，有較高的藝術價值。

圖1橢圓形烏銅走銀墨盒，長12.7厘米，寬9.2厘米，高5.6厘米。底銘“岳恒”二字。盒面為雙鳳紋，盒周為高士松下對弈圖，所嵌銀絲極細，構圖飽滿，是早期烏銅走銀器中精品。由于烏銅器中含金，生產成本非常高，后來的烏銅走銀器則以紫銅為胎，僅將其表面處理為烏銅，成本大為降低。盡管如此，烏銅走銀器價格在當時仍十分昂貴，非一般人所能問津。烏銅走銀技術在民國年間得到了極大發展，聲名遠播。

圖2為方形烏銅走銀墨盒，邊長9.6厘米，高2.2厘米，底銘“云南岳應”四字。盒面用極細銀絲鑲嵌出一幅江南山水圖，畫面構圖飽滿、細膩，錯落有致，景物自然和諧。盒四周飾以梅花、竹葉及蝙蝠紋，工藝精湛，是晚期烏銅走銀器精品。

圖三，圖五

烏銅走銀技術岳家秘不外傳，民國后期岳家絕后，烏銅走銀技術隨之失傳。當時也有依照生產者，質量稍次。圖3為方形烏銅走銀墨盒，邊長5.8厘米，高2.6厘米，底銘“陳貞”二字。盒面為行草詩一首：“著書懸日月，筮《易》洽風雷。一旦迷津悟，千秋寶鏡開。古句。丁巳季夏書?！弊至鲿场t灑，盒周飾以松、竹、梅、蘭圖，工藝細致，雖非岳家所制，亦不遜色。

圖四

解放后云南老藝人楊用賓反復研究，使烏銅走銀工藝得以恢復，但產品質量遠不如岳家所制。北京人民大會堂云南廳里，巨型屏風“五百里滇池”和“大觀樓長聯”就是這一時期的名作。由于烏銅走銀器成本高，技術復雜，現早已停止生產，真品難覓。

烏銅走銀器以墨盒及煙膏盒居多，亦有花瓶、碗、盤、杯、壺、筆筒等，但存量已十分稀少。圖4為烏銅走銀碗，口徑10.7厘米，高5.9厘米。底銘“岳炳”二字。碗周飾以松樹、仙鶴，隱喻松鶴延年。圖5為烏銅走銀勺，長12.7厘米，寬4.3厘米，器表面為蝙蝠、梅花及竹葉圖，器形雖小，但工藝精湛，與圖4碗配套，極為難得。

烏銅走銀器數量稀少，精品更為難得，目前市場贗品居多，收藏時一定要慎重?，F將一些鑒別要點簡述如下：1.真品表面包漿自然、沉著，烏銅黑如煤色；而贗品包漿浮淺，有“賊光”，表面黑色淺而薄，極不自然；2.真品所嵌銀絲極細，圖案及文字傳神、生動；而贗品線條較粗，圖案及文字呆板，構圖比例失調；3.真品擦洗后表面呈淡紅色，把玩后器表面很快變黑如初，這是由于手中汗漬含有油脂和鹽分，能和烏銅反應使其變黑；贗品表層并非烏銅，故不能變黑。這是鑒定烏銅走銀器真偽的關鍵。但應提醒收藏者不可過度擦洗，否則可能損傷器表面之烏銅層，使品相破壞。