細胞骨架范文

導語：如何才能寫好一篇細胞骨架，這就需要搜集整理更多的資料和文獻，歡迎閱讀由公務員之家整理的十篇范文，供你借鑒。

篇1

1 材料與方法

1.1 實驗材料及試劑

人骨骼肌細胞株（HSKMC）從中國科學院昆明細胞所購買。流式細胞儀購自BD公司，Fluo-3 AM鈣離子熒光探針試劑盒購自invitrogen公司，Olympus熒光顯微鏡，細胞周期與凋亡檢測試劑盒購自武漢碧云天公司。

1.2 方法

1.2.1 HSKMC細胞培養 HSKMC細胞復蘇后，將細胞收入離心管中，1000 r/min離心10 min，棄上清，用高糖DMEM培養液（含20%胎牛血清，10 0000 U/L青霉素、100 mg/L鏈霉素）混勻細胞，轉入25 mL玻璃培養瓶中，在37 ℃、5% CO2濃度及飽和濕度條件下培養，次日換液，以后根據細胞生長情況每48～72 h更換培養液一次，每周傳代1～2次。 [選自《中華急診醫學雜志》2014年第8期,專業提供寫作論文服務，歡迎光臨.]

1.2.2 流式細胞儀鈣離子內流檢測熱打擊對HSKMC細胞膜通透性的影響 將Fluo-3AM鈣離子熒光探針溶于1 mL DMSO中，制成1 μg/μL，取對數生長期細胞，按1×104個/皿密度鋪入60 mm×15 mm細胞培養皿，培養至單層融合后，給予消化，然后將懸浮液按下述方法給予刺激：①對照組（即將細胞置于標準37 ℃、5%CO2濃度培養箱中同其余各組等時間培養）；②43 ℃熱打擊組（將細胞置于43 ℃細胞培養箱中培養1 h）。打擊后同一時間每瓶懸浮液按2 μL/100 μL加入Fluo-3AM鈣離子熒光探針，置于標準37 ℃、5%CO2濃度培養箱共同避光孵育1 h，予以上機檢測。

1.2.3 考馬斯亮藍R-250染色法檢測熱打擊對HSKMC細胞骨架影響 取對數生長期細胞，消化后按5×103個/片密度鋪入6孔板培養玻片，培養至單層融合后，按下述方法給予刺激：①對照組（即將細胞置于標準37 ℃、5%CO2濃度培養箱中同其余各組等時間培養）；②43 ℃熱打擊組（將細胞置于43 ℃細胞培養箱中培養1 h）。應用考馬斯亮藍R250染色：①配制M-緩沖液；②傾棄培養上清，加入1 mL PBS沖洗3次；③吸去PBS，用1.5%TritonX-100搖床震蕩處理8 min，3次；④吸去TritonX-100，用M-緩沖液搖床震蕩洗4次，每次3 min；⑤用3%戊二醛固定10 min，給予M-緩沖液洗3次，每次3 min；⑥用0.2%考馬斯亮藍R250震蕩染色40 min；⑦蒸餾水洗3次，每次孵箱烘干；⑧然后將細胞玻片置于載玻片上，加蓋玻片，于普通光學顯微鏡下觀察；⑨如染色效果好，可用二甲苯處理樣品，5 min，兩次，最后一次不要等樣品干；⑩加一滴中性樹膠，加蓋玻片封片，制成永久切片。普通光學顯微鏡高倍鏡下照片。

1.2.4 流式細胞儀檢測熱打擊對HSKMC細胞周期改變 取對數生長期細胞，按1×104個/皿密度鋪入60 mm×15 mm細胞培養皿，培養至單層融合，按下述方法給予刺激：①對照組（即將細胞置于標準37 ℃、5%CO2濃度培養箱中同其余各組等時間培養）；②43 ℃熱打擊組（將細胞置于43 ℃細胞培養箱中培養1 h）。將43 ℃熱打擊組繼續置于標準37 ℃、5%CO2濃度培養箱孵育，于0、6、18、24 h分別取出后消化，用胰酶消化細胞，至細胞可以被輕輕用移液管或槍頭吹打下來時，加入培養液，吹打下所有的貼壁細胞，并輕輕吹散細胞。具體操作按武漢碧云天公司細胞周期與凋亡檢測試劑盒說明書進行。染色完成后在24 h內完成流式檢測。用流式細胞儀在激發波長488 nm波長處檢測紅色熒光，同時檢測光散射情況。采用適當分析軟件進行細胞DNA含量分析和光散射分析。

2 結果

2.1 熱打擊對HSKMC細胞膜通透性的影響

流式細胞儀檢測結果提示，給予培養人HSKMC細胞不同溫度梯度熱打擊1 h后，如圖1所示，43 ℃熱打擊組鈣離子流式檢測的中位數為91.63，37 ℃對照組中位數為22.98。

2.2 熱打擊對HSKMC細胞骨架影響

本實驗中，同對照組相比，隨著熱打擊程度加強，顯微鏡高倍鏡下可見骨骼肌細胞骨架逐漸出現變粗、變短、出現明顯的應力纖維，見圖2。

2.3 熱打擊對HSKMC細胞細胞周期改變

同正常對照組相比，骨骼肌細胞在熱打擊情況下，DNA含量與細胞周期中各期百分構成比統計結果分別見圖3及表1。3 討論

胞漿Ca2+是細胞的第2信使。細胞內鈣不僅作為一種重要的第2信使廣泛參與細胞的運動、分泌、代謝和分化等多種細胞功能活動的調節，而且胞內鈣離子濃度的變化與調控對于參與維持存在于細胞質膜或細胞器膜兩側的跨膜梯度差，以及介導細胞對外界刺激的應答反應具有重要的調節作用[13]。研究發現， 鈣在細胞損傷過程中起重要作用，各種因素導致的細胞或細胞器內鈣過度集聚可引起細胞結構和功能損害，線粒體和細胞內鈣異常增加程度常作為細胞損傷指征之一[14]。

引起橫紋肌溶解的一個重要的理論就是線粒體Ca2+超載導致線粒體功能障礙[15]。細胞內外的Ca2+水平變化是微小和迅速的，極難測定，目前定量這些變化在技術上仍存在一定困難[16]。通過測定熒光強度來反映細胞中的鈣離子濃度是目前普遍采用的細胞內鈣離子檢測方法。本實驗通過應用流式細胞儀及Fluo-3/AM檢測不同溫度熱打擊后細胞內鈣離子變化。本實驗結果顯示，Fluo-3/AM負載的HSKMC細胞在37 ℃基礎狀態下就有少量鈣離子內流，但隨著熱打擊溫度及時間延長，43 ℃熱打擊組鈣離子流式檢測的中位值為91.63，而37 ℃對照組中位值僅為22.98，提示細胞內鈣離子濃度明顯增加，說明在熱打擊的情況下造成細胞鈣離子內流效應，導致細胞內鈣超載，最終導致骨骼肌細胞損傷、壞死。

細胞骨架是細胞內不同蛋 白質纖維的聚合物和各種調控蛋白交錯連接的網絡結構，它參與細胞分裂及運動、細胞內物質運輸等多種功能，在維持真核細胞的形態、承受外力、胞內運輸、變形運動、信號轉導等方面發揮著重要的作用，而且還參與許多重要的生命活動，包括染色體分離、細胞中各類小泡和細胞器的定向轉運以及白細胞遷移、游動、神經細胞軸突伸展等[17-18]。一般而言，應力纖維是支撐細胞形態的主要結構，其表達的改變往往代表細胞的變形和增殖等變化[19]。本實驗通過應用考馬斯亮藍R250染色法檢測熱打擊對HSKMC細胞骨架影響，隨著熱打擊時間及程度加強，同對照組相比，顯微鏡高倍鏡下可見HSKMC細胞骨架逐漸出現變粗、變短，出現明顯的應力纖維。提示熱打擊可改變HSKMC骨架結構，增加HSKMC通透性，同時使骨架失去正常的網狀有序排列結構，引起細胞收縮，使HSKMC間隙增大，最終會導致HSKMC結構和功能出現改變。

多細胞有機體的發生與發育有賴于細胞增殖、分化和死亡的精密結合， 即細胞周期的正常運行。本研究通過流式細胞儀檢測熱打擊后骨骼肌細胞細胞周期分布，發現骨骼肌細胞在熱打擊情況下，各組G0/G1期DNA相對含量在44.13～62.98之間，與正常對照組對比，當細胞離開熱打擊環境后培養18 h前G0/G1期DNA相對含量明顯高于對照組，培養第18小時才恢復同對照組基本相同，說明熱打擊情況下，細胞周期出現阻滯，細胞被阻滯在G0/G1期，細胞內部活動減緩，處于“休眠”狀態，不能進一步發展到S期和G2/M期，從而不能完成整個細胞的分裂過程，大約18 h左右才恢復至正常狀態。

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篇2

[關鍵詞]衰老； 血管老化； 細胞骨架；人參三七川芎提取物

[Abstract]To observe the effect of extracts of ginseng， notoginseng， and Chuanxiong Rhizome on the cytoskeleton protein F-actin and G-actin of the replicative senescence vascular smooth muscle cells， with human aortic smooth muscle cells （HASMC） as the research object， and the replicative senescence 9th generation cells as the senescence models， the experiment was divided into youth group （5th generation cells）， model group （9th generation cells）， Chinese medicine low dose group （100 mg?L-1）， middle dose group （200 mg?L-1）， and high dose group （400 mg?L-1） and resveratrol group （10 μmol?L-1）. The intervention time was 48 h. β-Galactosidase specific staining method was used to calculate the ratio of blue dyeing cells. CCK-8 method was used to detect the cells proliferation. The flow cytometry was used to analyze the cell cycle. Immunofluorescent staining was used to observe morphological changes of F-actin and G-actin. The western blot assay was used to determine the expression of F-actin protein. Compared with the model group， the Chinese medicine groups and resveratrol group significantly reduced the number of blue dyeing cells， improved the ability of cells proliferation， reduced the number of cells in G0/G1 phase， increased the number of cells in S phase， and reduced the protein expression of F-actin and the formation of stress fibers， with obvious intervention effect and statistically significant difference. Therefore， the replicative senescence vascular smooth muscle cells can be used as the models for senescence research， with significant changes in morphology and protein expression of cytoskeleton protein F-actin and G-actin in the process of cells aging. The extracts of ginseng， notoginseng， and Chuanxiong Rhizome have obvious intervention effect on F-actin and G-actin， and it might be indirectly associated with delaying the aging of blood vessels.

[Key words]senescence； vascular aging； cytoskeleton； extracts of ginseng， notoginseng， and Chuanxiong Rhizoma

目前我國已進入老齡化社會，且形勢十分嚴峻，預計到2050年，老齡化將達到峰值，65歲及以上人口將超過3億，占總人口的20%以上[1]。衰老是疾病發生重要的決定性因素[2]，能夠加速心血管疾病的其他危險因子。血管老化是人體衰老發生的關鍵因素，不僅導致動脈粥樣硬化的發生，促進機體衰老的進程，而且可以誘發多種疾病[3]。血管平滑肌細胞（vascular smooth muscle cells，VSMCs）作為血管壁中膜的主要細胞成分，其表型轉化及伴隨出現的生物學行為改變是血管老化的重要病理學基礎[4]。目前有研究表明，細胞骨架的動態改變是促使平滑肌細胞遷移、增殖及表型變化的重要細胞內信號[5]。肌動蛋白（actin）是細胞骨架微絲的主要成分，通常以單體（G-actin）或聚合體（F-actin）形式存在于細胞內，是研究 VSMCs中細胞骨架改變的重要檢測指標，且其表達變化受細胞內相關信號因子的調控，如熱休克蛋白27（heat shock protein 27，HSP27）、整合素蛋白和凝溶膠蛋白等[6]，其中HSP27調控作用最為肯定。

本課題組一直致力于益氣活血中藥延緩血管老化的研究，對增齡導致的生理性血管老化和高血壓病導致的病理性血管老化進行了較系統的研究，同時，明確了益氣活血中藥延緩血管老化的一些關鍵作用機制，比如抗氧化應激、抗AngⅡ干預等，并明確了益氣活血中藥對血管老化的干預療效。本研究以人主動脈平滑肌細胞骨架的微絲蛋白F-actin和G-actin為對象，觀察益氣活血中藥人參三七川芎提取物對骨架蛋白F-actin和G-actin的干預作用，為進一步研究細胞骨架與血管老化的關系提供實驗依據。

1材料

人主動脈平滑肌細胞HASMC（美國Sciencell公司，Cat No：6110，Lot No：7463）。

SMCM基礎培養基（美國Sciencell公司）；胎牛血清（FBS，美國Sciencell公司）；生長因子（SMCGS，美國Sciencell公司）；雙抗P/S Solution（美國Sciencell公司）；DPBS溶液（美國Sciencell公司）；細胞凍存液CFM（美國Sciencell公司）；胰酶/EDTA消化酶（美國Sciencell公司）；細胞衰老特異性β-半乳糖苷酶檢測試劑盒（杰美基因醫藥上海科技有限公司）；細胞DNA含量檢測試劑盒（細胞周期）（南京凱基生物科技發展有限公司）；CCK-8增殖試劑盒（上海東仁公司）；4%多聚甲醛（北京索萊寶公司）；Triton X-100穿透液（北京索萊寶公司）；羅丹明鬼筆環肽（美國Molecular Probes）；Alexa Flour 488（美國Molecular Probes）；二甲基亞砜（DMSO，北京索萊寶公司）；噻唑藍MTT（北京索萊寶公司）；小鼠F-actin單克隆抗體（英國Abcam公司）；辣根過氧化物酶標記山羊抗小鼠IgG（上海碧云天生物技術公司）；BCA蛋白濃度測定試劑盒（上海碧云天生物技術公司）；超敏ECL化學發光試劑盒（上海碧云天生物技術公司）；高效RIPA組織/細胞裂解液（北京索萊寶公司）。

人參、三七、川芎合劑凍干粉由北京因科瑞斯醫藥科技公司制備提供。藥物均為道地藥材，單味藥成分檢測符合藥典的規定和標準，按3∶2∶4破碎成最粗粉，經乙醇回收提取，濾過，藥渣棄去，醇提液回收乙醇至無醇味濃縮液，繼續濃縮至稠膏，真空減壓，干燥至干膏，粉碎裝袋，每1 g凍干粉含生藥4.286 g。中藥凍干粉用PBS配制成貯存液，以0.22 μm濾器過濾并分裝，質量濃度25 g?L-1，-20 ℃保存。白藜蘆醇（中國食品藥品檢定研究院，批號111535-200502）用DMSO溶解并配制成貯存液，質量濃度50 g?L-1 ，4 ℃保存。

倒置相差顯微鏡及成像系統（德國Leica，型號4000B）；流式細胞儀（美國Beckmam，型號Cytomics FC500）；全自動酶標儀（美國Thermo，型號Multiskan MK3）；激光共聚焦顯微鏡（日本Olympus，型號FV1000）；發光凝膠成像系統（SYNGENE，型號GeneGnome XRQ）。

2方法

2.1細胞培養及傳代細胞培養一般隔天換液，待培養瓶細胞密度在90%以上時進行傳代，棄去原培養基，用DPBS洗2次；加入1 mL DPBS與胰酶/EDTA混合液（比例為1∶4）；室溫放置1.5 min，待細胞變圓時，輕敲瓶底，后加入2 mL完全培養基停止消化，用吸管進行吹打，收集細胞，1 000 r?min-1離心5 min，棄上清加入培養基2～3 mL吹懸，按照1∶2或1∶3傳代培養。

2.2分組及藥物濃度 實驗分為6組，分別為青年組（5代細胞）、模型組（9代細胞）、中藥低劑量組（100 mg?L-1）、中藥中劑量組（200 mg?L-1）、中藥高劑量組（400 mg?L-1）及白藜蘆醇組（10 μmol?L-1），藥物干預時間為48 h。

2.3β-半乳糖苷酶（SA-β-gal）染色鑒定衰老的程度 β-半乳糖苷酶染色法是鑒定細胞衰老的重要指標[7]。將細胞以8×103個/孔接種于24孔板，次日細胞貼壁后，實驗組給予藥物干預，作用時間為48 h。實驗前將GENMED染色液與GENMED稀釋液以1∶20配制成工作液，混勻，置入37 ℃水浴箱預熱。吸去原細胞培養基，加入500 μL/孔的GENMED清理液，并輕微搖晃24孔板；吸去清理液，加入500 μL/孔的GENMED固定液，室溫孵育5 min；吸去固定液，加入500 μL/孔的GENMED酸性液，清洗細胞表面，并重復此操作一次；加入400 μL/孔預熱的工作液，37 ℃孵育過夜，次日在光學顯微鏡下觀察并計數，隨機選取3個視野，計算藍色細胞的數量占總視野細胞數量的比值。

2.4CCK-8檢測細胞增殖能力將細胞以6×103個/孔接種于96孔板，每組設5個復孔，次日細胞貼壁后，實驗組給予藥物干預，作用時間為48 h。每孔加入10 μL CCK-8溶液，放入37 ℃培養箱中孵育2 h，上機檢測，記錄酶標儀所測定450 nm波長的吸光度（A）。

2.5流式細胞儀分析細胞周期常規進行細胞培養，實驗組藥物干預48 h，消化后離心并用DPBS洗滌2次，去除上清，每組加入70%冰乙醇1 mL吹懸固定，4 ℃保存過夜。次日離心后去除固定液，DPBS洗滌1次，離心去上清，每組加入100 μL RNase A 37 ℃水浴30 min，再加入400 μL PI混勻染色，4 ℃冰箱避光放置30 min，后上機檢測。

2.6激光共聚焦顯微鏡觀察細胞F-actin和G-actin結構的改變將細胞以6×103個/孔接種于黑色96孔板，貼壁后，實驗組藥物干預48 h。吸去原培養基，用DPBS清洗細胞2次，加入4%多聚甲醛100 μL/孔，室溫下固定15 min，再用DPBS清洗細胞5 min×3遍；加入0.1% Triton X-100 100 μL/孔，室溫下穿透5 min，再用DPBS清洗5 min×3遍；最后加入羅丹明鬼筆環肽2.5 μL（0.5 U）/孔和Alexafluor488 DNase I 2 μL/孔共染色，避光室溫放置30 min，再用DPBS清洗5 min×3遍，上機觀察F-actin和G-actin的形態學改變。

2.7Western blot 檢測F-actin蛋白的表達細胞樣品中加入100 μL含蛋白酶抑制劑、PMSF的RIPA 裂解液，超聲波破碎儀破碎10 s，4 ℃16 000×g離心10 min，按BCA蛋白濃度檢測試劑盒說明書對樣品蛋白總濃度進行測定，加入樣品1/4體積的5×Loading buffer，100 ℃加熱10 min。進行電泳及轉膜后，5%脫脂奶粉室溫封閉1 h，完成后用TBST洗膜3次，一抗稀釋比例1∶250，4 ℃水平搖床孵育過夜。二抗用5%脫脂奶粉封閉液稀釋，稀釋比例1∶3 000，室溫孵育60 min，TBST洗滌3×10 min。將膜平鋪在干凈的保鮮膜上，滴加配置好的ECL反應液反應2 min，曝光及掃描。

2.8統計學分析應用SPSS 18.0軟件進行統計分析，其中計量數據以±s表示，多組樣本采用單因素方差分析，用Levene法檢驗方差齊性，若方差齊，采用LSD法進行兩兩比較；若方差不齊，則采用Tamhane法。以P

3結果

3.1對SA-β-gal衰老染色的影響通過對各組染色結果的觀察和計數，與青年組相比，模型組細胞藍染數比例增多，具有顯著性差異；與模型組相比，中藥低、中、高劑量組及白藜蘆醇組細胞藍染數比例均明顯降低，均有顯著性差異（圖1，表1）。

3.2對細胞增殖能力的影響各組CCK-8細胞增殖能力的檢測表明，與青年組相比，模型組A明顯減少，具有顯著性差異；與模型組相比，中藥中劑量組A明顯增加，具有顯著性差異，中藥低劑量組A增加，具有差異性，而中藥高劑量組及白藜蘆醇組A增加，但無統計學意義（表1）。

3.3對細胞周期的影響通過對各組流式細胞周期的檢測表明，與青年組相比，模型組G0/G1期細胞明顯增多，S期細胞減少，均有顯著性差異；與模型組相比，中藥中、高劑量組及白藜蘆醇組G0/G1期細胞明顯減少，S期細胞增多，具有顯著性差異，中藥低劑量組則無統計學意義；G2/M期細胞數目變化均無統計學意義（表2）。

A.青年組；B.模型組；C.中藥低劑量組（100 mg?L-1）；D.中藥中劑量組（200 mg?L-1）；E. 中藥高劑量組（400 mg?L-1）；F.白藜蘆醇組（10 μmol?L-1）（圖2，3同）。

3.4對細胞F-actin和G-actin形態學的影響激光共聚焦顯微鏡顯示，青年組細胞排列緊密，F-actin（紅染）主要在細胞表面及外周分布，線條完整連續；G-actin（綠染）主要在細胞的中央區域分布，呈致密的橢圓形，染色清晰、飽滿、圓潤。模型組細胞體積變大，形態不規則，F-actin邊緣毛糙不規整，出現鋸齒樣斷裂，部分呈縱向平行排列，形成大量應力纖維；G-actin向細胞周邊區域伸展，部分出現邊緣變模糊呈絮狀，細胞中央區域染色變弱。模型組與青年組相比，F-actin/G-actin熒光強度比值增大，具有顯著統計學差異。各給藥組F-actin邊緣較模型組清晰光滑，且較少斷裂；G-actin則主要集中于細胞中間，染色略欠飽滿，尚清晰圓潤。與模型組相比，中藥低、中劑量組及白藜蘆醇組F-actin/G-actin熒光強度比值降低，具有統計學意義，中藥高劑量組則無統計學意義（圖2，表3）。

3.5對F-actin和HSP27蛋白表達的影響與青年組相比，模型組的F-actin蛋白表達明顯增多，具有顯著差異性；與模型組相比，中藥中、高劑量組及白藜蘆醇組F-actin蛋白表達減少，具有顯著差異性；與青年組相比，模型組HSP27蛋白表達明顯減少，具有顯著差異性；與模型組相比，中藥低、中、高劑量組及白藜蘆醇組HSP27蛋白表達明顯增多，具有顯著差異性（圖3，表3）。

4討論

衰老是不可抗拒的自然規律，而血管衰老是人體衰老的關鍵始發因素[8]。 在血管老化的過程中，中膜平滑肌細胞高增殖、高移行、分泌性改變是內膜增厚、血管重構的關鍵因素。VSMC發生表型轉化的過程中伴隨著細胞骨架的重構，同時骨架重構又是VSMC由收縮型向合成型轉化過程中細胞收縮能力下降、發生遷移和黏附等改變的病理生理基礎[4]。肌動蛋白是構成細胞骨架微絲的基本成分，以單體G-actin或聚合體F-actin形式存在，肌動蛋白具有收縮、保持細胞的形狀、運動、細胞間黏附等多種功能，同時參與細胞增殖過程[9]。有研究表明，調節機體衰老的多條通路均與F-actin的改變密切相關，如哺乳動物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）通路、胰島素/胰島素樣生長因子（IGF-1）通路和去乙酰化酶（SIRTS）通路等[10-12]。

氣血是構成機體的基本物質，二者關系密切，隨著衰老的進行，氣虛血不行，血虛氣不化，氣虛血少，氣血運行不暢，最終導致氣虛血瘀之證，從而加速了機體衰老的進程。中藥人參、三七、川芎合方屬于益氣活血治法的范疇，在心腦血管疾病中被廣泛應用，三藥合劑具有延緩血管衰老、保護血管內皮細胞及調節血管活性物質等作用[13-14]。白藜蘆醇具有激活SIRT1通路、抗氧化、調節自噬及保持端粒酶活性等作用，是目前比較公認的延緩衰老的對照藥物。

本研究以復制性衰老的血管平滑肌細胞為對象，以β-半乳糖苷酶染色、CCK-8細胞增殖活性和細胞周期作為判斷細胞衰老程度的指標，并觀察人參三七川芎提取物延緩細胞衰老的作用。實驗結果表明衰老的細胞多停滯在細胞周期的G1期，S期細胞數量則減少，且體外增殖能力相對減弱，同時形態學表現出細胞扁平、脹大、顆粒增多的特征，并且在酸性環境下，細胞內β-半乳糖苷酶活性增加，表現為細胞藍染數目增多。藥物干預后，停滯在G1期的細胞數量減少，同時S期細胞數量增加，且β-半乳糖苷酶染色細胞藍染數目減少，表明人參三七川芎提取物具有延緩血管平滑肌細胞衰老的作用。細胞骨架方面，青年組細胞微絲結構以單體G-actin為主，主要在細胞的中央區域分布，呈致密的橢圓形，染色清晰、飽滿、圓潤；聚合體F-actin主要在細胞表面及外周分布，線條完整連續。模型組G-actin向細胞周邊區域伸展，部分出現邊緣變模糊呈絮狀，細胞中央區域染色變弱；F-actin邊緣毛糙不規整，出現鋸齒樣斷裂，部分呈縱向平行排列，且蛋白表達量增加，形成大量應力纖維。藥物干預后，F-actin邊緣較模型組清晰光滑，且較少斷裂，蛋白表達量減少；G-actin則主要集中于細胞中間，染色略欠飽滿，尚清晰圓潤。而HSP27作為細胞骨架蛋白的主要調控因子，反向調節著F-actin的表達。

綜上所述，復制性衰老的血管平滑肌細胞可以作為衰老研究的模型；細胞骨架微絲蛋白G-actin和 F-actin形態及蛋白表達在細胞衰老過程中改變明顯，其可能直接參與平滑肌細胞由收縮型向合成型轉化等衰老的進程；人參三七川芎提取物可以一定程度上延緩血管老化，且對于細胞G-actin和 F-actin有明顯干預作用，其可能間接通過此作用延緩了血管老化的進程。

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篇3

資料與方法

本組107例，男84 例,女23 例。年齡＜17~60歲;左側48 例,右側59 例;橫形骨折39 例,粉碎性68例; 直接暴力72例，間接暴力25例；均為閉合性骨折。

復位方法：患肢取伸直位，或微屈呈15°～30°中立位，術者站于患側，一手拇指及示中指捏擠骨折遠端向上推，并固定之；另一拇指及示中指捏擠近端上緣向外側角向下推擠，使骨折斷端接近。經上述手法，骨折遠近端對位良好，即可暫時固定，然后采用摸法檢查，若殘余的前后移位，手指觸摸不平時，以一手拇食指固定下陷的一端，另手拇指擠壓向前突出的另一端，使之對齊、平整。最后將骨折遠端擠緊，用制備好的抱膝圈固定，如骨折對位較差可隔1～2日再推擠1次，用抱膝圈固定。

固定方法：①夾板的制備：取五層椴木膠合板1塊，長度自患肢大腿中上1/3至踝上2cm，寬度基本與患肢相應橫徑等寬，用脫脂棉及繃帶塑制吻合肢體生理弧度的夾板，用繃帶塑制大小適度的抱膝圈備用。②骨折復位滿意后，先放置超膝后側夾板，然后將抱膝圈套于髕骨周圍，固定帶分別扎在超膝后側夾板上。然后用三列繃帶將患肢與后側夾板纏繞固定，固定后要注意觀察患肢足背動脈搏動情況，以防固定過緊。抬高患肢，做患肢股四頭肌收縮鍛煉及患踝屈伸運動，以加速患肢血液循環，促進消腫。3～5天調整固定1次，隨著腫脹的消退，逐漸縮小抱膝圈，使抱膝圈能起到良好的固定效果。

藥物治療：遵循骨折三期辨證論治的原則,早期活血祛瘀、消腫止痛,內服三七活血膠囊消腫止痛;中期和營生新、接骨續損,內服接骨丹；后期培補肝腎、強壯筋骨,內服壯筋續骨丹，解除外固定后,用我院下肢洗藥煎汁熏洗患肢。

結 果

本組106例均獲得6個月以上隨訪,49例完全無痛、股四頭肌肌力5級、膝關節主動伸直正常，屈曲受限在20°以內、無晚期創傷性關節炎癥狀出現；48例偶有疼痛但不影響日常生活及工作，股四頭肌肌力5級，屈曲受限在20°以內，無晚期創傷性關節炎癥狀出現。10例膝關節疼痛，屈曲受限在30°以內，輕度晚期創傷性關節炎癥狀出現。

篇4

（一）全年蔬菜價格高位運行，走勢與2009年趨同

2010年，全區蔬菜價格（15個蔬菜監測品種平均價格）普遍高于2009年，價格走勢與2009年基本趨同，上半年全區蔬菜平均價格達到2.77元/500克，高于全年平均價格。其中，一季度價格偏高，進入二季度以來，價格開始有所回落，7月份價格達到谷底，之后開始回升，三季度保持小幅上揚趨勢；進入四季度以來，蔬菜價格上漲幅度較大，價格明顯走高，漲幅明顯高于去年同期。從全年價格走勢來看，與去年價格變動趨勢基本趨同，但價格波動較大。

（二）蔬菜價格同比增長明顯，增幅波動劇烈

2010年以來，蔬菜價格漲幅較大，截至11月上旬，較上年平均漲幅超過22%，而進入四季度以來，漲幅一路走高，11月上旬達到41.22%，價格遠高于上年同期。從全年漲幅走勢來看，一季度保持高位，二季度增幅有所減緩，三季度以來增速波動較大。

（三）“大眾菜”價格走勢平緩，“細菜”價格波動劇烈

從各月蔬菜價格情況來看，土豆、蘿卜、白菜等大眾菜價格走勢較為平緩，而黃瓜、西紅柿、豆角、青椒、茄子等“細菜”波動劇烈。黃瓜最高價由年初3.91元/500克到最低7月1.14元/500克，11月上旬達2.5元/500克，并開始逐步走高。青椒最高與最低價相差2.86元/500克，豆角最高與最低價相差3.77元/500克；而土豆、蘿卜、白菜等大眾菜價格最高相差不超過1.25元/500克，且全年價格基本在固定區間平緩波動(詳見圖3-5)。

（四）各地蔬菜漲價明顯，價格過快增長

從自治區價格監測中心監測地區顯示數據來看，11月上旬，除烏海市蔬菜價格低于上年同期外，其它監測地區均高于去年同期，其中，牙克石市漲幅達到71.17%，包頭市、呼倫貝爾市、赤峰市、科爾沁區、集寧區、東勝區、臨河區漲幅超過50%，其它漲幅均超過24%，價格顯著增高。滿洲里市蔬菜平均價格高達3.10元/500克，蔬菜價格最低的赤峰市也達到1.82元/500克。

二、蔬菜價格走勢原因分析

（一）受季節性因素影響，蔬菜價格全年波動較大

受2009年雨雪、冰凍災害影響，全國蔬菜生產受損嚴重，產量大幅減少，加之北方地區連降大雪，運輸受阻，部分地區蔬菜供應緊張。同時，2009年12月下旬國內成品油價格連續上調，使得購進蔬菜的運輸成本增加。隨著春節臨近，蔬菜市場需求量增加，一季度，我區蔬菜價格漲幅明顯，呈高位運行；進入二季度，由于氣溫回升，我區地產蔬菜尤其應季蔬菜大量上市，蔬菜市場供應量大幅增加，蔬菜價格降幅明顯，但土豆、胡蘿卜、蘿卜由于不是大量上市的季節，市場供應依然較為緊張，價格呈現上漲的走勢；三季度，隨著本地菜供應量進一步加大，蔬菜價格基本達到全年最低，呈小幅波動；10月以來，蔬菜價格明顯上揚，在15個蔬菜監測品種中，除白菜、土豆、蘿卜3個當地產蔬菜品種漲幅趨緩外，其它蔬菜價格上漲較快。隨著天氣轉冷，輸入型蔬菜比例增大，進入冬季，運輸用柴油由0號變為－10號、－20號柴油，運輸成本增加。當前全國油氣短缺進一步加劇蔬菜運輸成本，蔬菜價格仍會繼續走高。

（二）冬季輸入菜居多，蔬菜價格受產地影響較大

由于本地果綠蔬菜通過溫室培育成本價遠高于外地菜，而5、6月份收儲菜冬季銷售則需放到恒溫菜室，蔬菜損耗率高，貯存成本大。因此，我區冬季蔬菜供應大多依賴外地調運，僅有部分白菜、大圓菜等冬儲菜能本地供給，外運蔬菜主要來自山東壽光、淄博、河北唐山，云南昆明、廣東、四川、海南等地區。近年來，寧夏、甘肅等地冬季葉綠菜供應量逐步增大。以呼和浩特市為例，進入冬季以來，外地菜供應量占總供應量高達80%-90%。本地蔬菜供給少，對整個市場的影響微乎其微，使得冬季蔬菜價格、供給量主要受制于蔬菜產地。2010年以來，我國氣候表現反常，持續不斷的干旱、雨雪冰凍、高溫暴雨等惡劣天氣，嚴重影響到各季蔬菜的生長，在不少地區鮮菜產量大幅萎縮，使得菜價階段性、季節性價格走高。

（三）農資價格上漲，是蔬菜價格持續走高的趨勢性原因

隨著工業化、城鎮化進程加速，農產品生產三大“基礎成本”――生產資料、勞動力和土地價格剛性上漲漸成常態，農產品進入趨勢性的上漲通道。國家統計局數據顯示，2010年7月以來，我國價格總水平逐月攀升，以農副產品為主的生活必需品價格上漲較快，10月份CPI達到4.4%，創下25個月來新高，而在新漲價因素中，食品類價格上漲10.1％，為CPI漲幅“貢獻”了74％。隨著城市地價快速上漲，拉動了城郊地價，并進一步傳導至農業地價。此外，一些農業龍頭加工企業和種植大戶大規模租地經營，也在一定程度上提高了農村地價，從而抬高農產品生產成本，推升農產品價格。同時，隨著大量青壯年勞動力流入城鎮，“用工荒”現象也在一些地方的農業領域出現，導致農村勞動力價格迅速上升，農產品尤其是蔬菜等勞動密集型產品價格必然會更加高昂。

（四）“城市化”進程加快使得城郊菜地大量被占，直接導致蔬菜價格上漲

近年來，隨著城市化進程不斷推進，城市建設速度加快，城市近郊的土地大量被征為建設用地。2009年，全區城市建成區面積較“十一五”期初增長了17.5%，土地征用面積達到“十一五”期初征用面積的2倍，許多地方的菜地都成了城區的馬路和商品房，而新的菜地建設并沒有及時跟上，造成菜地大幅度減少。同時，城市化向前推進，使得城市人口不斷膨脹，2009年，全區市鎮人口達到1293.5萬人，較“十一五”期初增加了129.9萬人，市區人口密度較“十一五”期初增長了59%，使城市蔬菜消費量大量增加，蔬菜需求缺口加大。呼和浩特市近年來由于城市建設速度加快，近郊的菜地基本有50%被征用成為建設用地，使得蔬菜種植面積因此大幅度減少，本市的蔬菜種植基地只留下8萬畝，保護地溫室大棚不足1萬畝，地產蔬菜供應能力銳減，大量蔬菜依靠外地供應。按照呼和浩特市總人口每人每年最少150公斤的需菜量計算，需要蔬菜量100多萬噸，而目前呼和浩特市全年的蔬菜產量是60萬噸左右，缺口高達40多萬噸。巴彥淖爾市臨河區隨著市區擴展，本地產蔬菜僅能滿足市場需求量的30%， 70%的蔬菜需求要靠外運。與此同時，隨著人口增加及人們生活水平提高，健康觀念改變，對蔬菜特別是“細菜”的需求量不斷增加，加之許多原來自給自足、有富余還出售蔬菜的農民，現在已經變成到菜市場買菜的消費者，也使得蔬菜消費量大量增加。本地蔬菜供應遠遠滿足不了市場需求，直接導致蔬菜價格上漲。

三、對穩定我區蔬菜價格的幾點建議

（一）加大蔬菜生產的扶持力度，保證蔬菜供給

在大力推動工業化和城市化的進程中，重視和關注人們日常生活所必需的蔬菜副食品的生產和建設。各地要切實做好規劃，并在規劃基礎上分步實施好各蔬菜基地的建設，對適宜發展蔬菜生產的地區，建立和發展蔬菜生產基地，保證蔬菜種植面積，特別是要加大對城市周邊蔬菜生產的扶持力度，對城市擴張征用的菜地收取蔬菜基地補償金，并真正用于發展新的蔬菜生產基地，扶持菜農，通過專項的政策性補貼來促動蔬菜的生產和擴大供給，保持蔬菜產業的穩定發展。

（二）加快蔬菜等鮮活農產品 “綠色通道”建設，降低蔬菜運輸成本

運輸成本主要是油價和過路過橋費兩方面，而運輸成本又都增加到菜價里面，增加了市民支出，減少了市民購買量。要進一步完善蔬菜等鮮活農產品運輸“綠色通道”政策，對整車合法裝載運輸鮮活農產品的車輛免收車輛通行費。對蔬菜運銷企業，有關部門應該給予幫助，發放綠色通行證，建立綠色通道，縮短蔬菜運輸時間。同時，蔬菜運銷企業要加強自律，搞好交通法規培訓，杜絕“超重”、“超速”現象發生，保障蔬菜運輸安全。

（三）加大市場設施建設力度，促進蔬菜商品的流通順暢

選擇一批條件較好的大型蔬菜批發市場，通過企業自籌、多元化投資、政府扶持等方式，加強產地蔬菜預冷設施、批發市場冷藏設施、蔬菜低溫配送中心建設，推廣節能環保的冷鏈運輸車輛，配套清選、分級、包裝等凈菜處理及相關設備，改善市場場地、道路、交易廳（棚）、水電、信息服務、質量檢測、電子結算等基礎設施，實現采后快速預冷、商品化加工處理和上市旺季入庫冷藏保鮮。加快城區蔬菜市場和零售網點建設，在場地環境、設施設備、質量安全檢測、垃圾處理、規范管理等方面進行標準化建設，建立便捷、安全、規范、高效的蔬菜零售平臺。

（四）加強市場監管，維護正常市場價格秩序

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關鍵詞：事故車 現場查勘 典型案例 酒駕調包

The substitution case analysis of the drunk driving in accident site survey Sichuan Vocational and Technical College of Communications

Feng Bo

Abstract： The site survey is an important means of evidence collection， it is the important basis of insurance claims and case litigation. The substitution case of the drunk driving is a kind of common cases in the process of site survey. In this paper， it analyses a real case to illustrates the general recognition method for such cases.

Keywords： accident car， site survey， typical case， substitution in drunk driving

引言

現場查勘是指運用科學的方法和現代技術手段，對事故現場進行實地勘察和檢驗，通過分析存留的物證和詢問認證等渠道獲得事故產生的原因，并采用拍照、繪圖等方式將事故結果方便而準確記錄下來的工作過程。它是保險賠付、案件訴訟的重要依據。

酒駕調包是在現場查勘中常常會遇到一類案件。雖然《道路交通安全法》中對酒后駕車行為有明確的處罰規定，同時在保險公司合同條款中，也規定酒后駕駛屬于免賠范圍，但部分駕駛員仍難改酒后駕駛的習慣。在車輛出險后，由于駕駛員擔心受到處罰并且被保險公司拒賠，于是找來他人頂包。在現場查勘過程中，如何對這類案件進行準確識別以避免保險公司損失，是查勘員必備的能力。下面就通過對一個真實酒駕頂包案件的分析來說明針對這類案件的識別方法。

一、出險情況

2012年9月11日凌晨4時左右，羅某稱其駕駛一輛車牌號為粵A××的汽車由梅林關往清湖方向的××大道行駛，為避讓車輛右打方向盤不慎撞上路基，后報保險公司。

二、現場情況

查勘員到達現場時，現場有兩輛黑色轎車停在不遠處，五六個人圍在一起。這些人見查勘員到來，立即駕駛車輛離開。標的車停靠在距路基前方20m的公路邊，一路上留下標的車輪軋過的痕跡，標的車前杠斷裂，內部件于表，方向機斷開，機油撒了一地，車內駕駛員方向盤處安全氣囊爆裂。報案人羅某稱自己是為了避讓旁邊準備超車的車輛，才猛打方向盤，撞上路基的。查勘員到達時除了羅某在現場外，還有車主黃某在現場。黃某一身酒氣，并稱自己也是剛到現場。

三、疑點分析

1.案發時間是當夜凌晨4點多，路上車輛已經很稀少，并且案發道路單向有四根車道。根據經驗，在車少路寬的情況下一般車輛不會亂變道。

2.在詢問過程中，報案人羅某稱車是從車主黃某處借來的，但何時何地借車，駕車從哪里到哪里等細節都說不上來。而一身酒氣的車主黃某卻主動上來向查勘員講解事發經過。

3.整個詢問過程中，羅某神情緊張，常用眼角余光看黃某。

綜上疑點分析，此案很有可能是車主黃某酒后駕車，出險后找來羅某頂包。

四、處理方法

為了印證疑點，查勘員分別讓羅某與黃某分別到標的車試坐一下。黃某一上車就手握方向盤，腳踩踏板，動作自然。而羅某上車后呆滯地坐于座位上，連手都不知道該放哪里好。

接下來，查勘員讓當事人黃某與羅某分別拿出手機，查看他們的通話記錄。通話記錄顯示：在4時以后，黃某與羅某分別與一個叫黃文的人頻繁通電話。車主黃某是4時08分與黃文通電話，而羅某是4時11分與黃文通電話。為何黃某先知道事故發生呢？并且羅某4時12分報的保險公司，此后羅某又頻頻與黃文通話。

圖1 車主黃某坐在駕駛員座位上 圖2報案人羅某坐在駕駛員座位上

圖3羅某電話記錄 圖4 黃某電話記錄

鑒于以上情況，查勘員進一步懷疑駕駛員是黃某而非羅某。

查勘員隨即告知當事人，由于案子較大，必須報交警，然后現場做了筆錄。交警到達現場后，查勘員對交警說明了事故情況，并告知客戶，由于事故較大，且有不明朗的地方，現場無法開單，需要轉保險公司調查。隨后標的車被拖到了交警中隊。

五、處理結果

凌晨八點多，報案人羅某打電話給查勘員稱放棄索賠，希望銷案處理。由此可見，此案為典型的酒駕掉包案件。本案最終以報案人簽字同意銷案告終。

六、案例總結

總結以上案例，可以看出對于識別這類酒駕調包案件的幾個要點。

1.查勘員到達現場后要仔細觀察現場情況，包括道路情況、標的車情況、報案人、車主及周圍環境情況等，看有無不合常規情理現象。此外，若有表1中所列現象，則應引起注意。

2.進行詢問時注意對相關細節進行提問。具體詢問要點可參照表1。若報案人對于多個要點都答不上來，則要引起注意。

3.詢問時注意觀察被詢問人的語速、表情、神態等。若被詢問人說話支支吾吾、神情緊張、東張西望等，可初步判斷其說謊。

4.對疑點進行印證時，可要求報案人及嫌疑人都坐到駕駛員座位上，以觀察標的車座位與人體的吻合情況。

5.可要求查看報案人手機的通話記錄，注意通話時間及通話對象，從中找出與案件相關的蛛絲馬跡。

6.若現場有監控攝像頭，可與監控方協商調取案發時間前后的監控錄像，作為確定案發經過最直接的證據。

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我的畢業設計作的是混凝土框架結構，因此對于混凝土機構的了解要更有針對性。混凝土質量的好壞，既對結構物的安全，也對結構物的造價有很大影響，因此在施工中我們必須對混凝土的施工質量有足夠的重視。混凝土質量的主要指標之一是抗壓強度，從混凝土強度表達式不難看出，混凝土抗壓強度與混凝土用水水泥的強度成正比，按公式計算，當水灰比相等時，高標號水泥比低標號水泥配制出的混凝土抗壓強度高許多。所以混凝土施工時切勿用錯了水泥標號。另外，水灰比也與混凝土強度成正比，水灰比大，混凝土強度高3水灰比小，混凝土強度低，因此，當水灰比不變時，企圖用增加水泥用量來提高溫凝土強度是錯誤的，此時只能增大混凝土和易性，增大混凝土的收縮和變形。 綜上所述，影響混凝土抗壓強度的主要因素是水泥強度和水灰比，要控制好混凝土質量，最重要的是控制好水泥和混凝土的水灰比兩個主要環節。此外，影響混凝土強度還有其它不可忽視的因素。粗骨料對混凝土強度也有一定影響，當石質強度相等時，碎石表面比卵石表面粗糙，它與水泥砂漿的粘結性比卵石強，當水灰比相等或配合比相同時，兩種材料配制的混凝土，碎石的混凝土強度比卵石強。因此我們一般對混凝土的粗骨料控制在3.2cm左右，細骨料品種對混凝土強度影響程度比粗骨料小，所以混凝土公式內沒有反映砂種柔效，但砂的質量對混凝土質量也有一定的影響。因此，砂石質量必須符合混凝土各標號用砂石質量標準的要求。由于施工現場砂石質量變化相對較大，因此現場施工人員必須保證砂石的質量要求，并根據現場砂含水率及時調整水灰比，以保證混凝土配合比，不能把實驗配比與施工配比混為一談。混凝土強度只有在溫度、濕度條件下才能保證正常發展，應按施工規范的規定予在養護、氣溫高低對混凝土強度發展有一定的影響。冬季要保溫防凍害，夏季要防暴曬脫水。現冬季施工一般采取綜合蓄熱法及蒸養法。如果是設計造成的缺陷，一般有設計承載力或設計工作條件與實際不符造成裂縫、變形、侵蝕等破壞;如果是使用造成的缺陷，一般有超載、侵蝕、火災、凍融、風化破壞等。

近年來預應力混凝土應用范圍逐漸推廣到更多的結構領域，如大跨超長、超厚及超靜定框架結構，其混凝土強度等級必須提高至c50。在采用泵送條件下，其收縮與水化熱大大增加，約束應力裂縫很難避免，張拉前開裂，張拉后又不閉合，裂縫控制的難度更加困難。預應力結構裂縫允許寬度是嚴格的，預應力筋腐蝕屬“應力腐蝕”并有可能脆性斷裂，預兆性較小，裂縫擴展速度快。裂縫深度h與結構厚度h的關系如下：h≤0.1h表面裂縫;0.1h

應當盡量避免貫穿性及縱深裂縫，如出現該種裂縫應采取化學灌漿處理來保證強度，即貫縫抗拉強度必須超過混凝土抗拉強度。

在修補裂縫前應全面考慮與之相關的各種影響因素，仔細研究產生裂縫的原因，裂縫是否已經穩定，若仍處于發展過程，要估計該裂縫發展的最終狀態。在日本混凝土協會“混凝土裂縫的調查和修補指南”中，對調查的原則、普查、詳查方法均作了詳細規定，主要有：

裂縫的現狀調查(裂縫類型和寬度);有無病害(漏水、鋼筋銹蝕);產生裂縫的經過(發生時間和過程);設計書的檢查;施工記錄的檢查;根據混凝土鉆芯檢查構件的強度、厚度;荷載調查;中性化試驗;鋼筋調查(鋼筋位置、細筋數量及有無銹蝕);地基調查;混凝土分析;荷載試驗;振動試驗。

裂縫的處理

1.表面處理法：包括表面涂抹和表面貼補法

表面涂抹適用范圍是漿材難以灌入的細而淺的裂縫，深度未達到鋼筋表面的發絲裂縫，不漏水的縫，不伸縮的裂縫以及不再活動的裂縫。表面貼補(土工膜或其它防水片)法適用于大面積漏水(蜂窩麻面等或不易確定具體漏水位置、變形縫)的防滲堵漏

填充法用修補材料直接填充裂縫，一般用來修補較寬的裂縫()0.3mm)，作業簡單，費用低。寬度小于0.3mm，深度較淺的裂縫、或是裂縫中有充填物，用灌漿法很難達到效果的裂縫、以及小規模裂縫的簡易處理可采取開v型槽，然后作填充處理。2.

灌漿法

此法應用范圍廣，從細微裂縫到大裂縫均可適用，處理效果好。

2.結構補強法

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【關鍵詞】加油站；火災爆炸；分析與預防

加油站是危險化學品經營企業，所經營的油品汽柴油都是易燃易爆液體。因此分析加油站火災爆炸的原因對其采取有針對性的預防措施，是加油站安全管理的關鍵。下面我們通過對加油站發生的火災爆炸事故案例分類進行分析，并提出相應的預防措施和建議。

一、卸油引起的火災爆炸事故

（1）沙特阿拉伯首都利雅得鬧市區巴塔的一家加油站著

火，時間是2000年8月11日傍晚，燒毀20輛汽車、燒傷3人，大火引起的原因是由于卸油員違規操作導致大火出現。此外，由于利雅得的夏季非常炎熱，到了傍晚時室外溫度還很高，這段時間嚴禁卸油。（2）河北省黃驊市加油站在油罐車向儲油罐內輸油時突發爆炸，時間是2000年9月10日0時30分，事故造成1人重傷、2人死亡，重傷患者98%的Ⅲ度燒傷有嚴重的生命危險。（3）湖北公安縣加油站發生爆燃事故，時間是2002年

01月07日，事故造成2人受傷，1人死亡。該加油站的地理位置是宏泰客運公司院內，西接一集貿市場，東臨車站，地下埋藏儲油罐4個，裝有18噸汽、柴油。事故的主要責任是由于司機彭正秋嚴重違規操作，沒有采用密封式輸油法進行輸油，而是將輸油管直接插入儲油罐所致。員工吳本軍在關閉閥門的時候，由于穿的衣服出現靜電，導致燃爆發生。（4）2011年1月12日

16時45分許，河北省廊坊市和平路一中石化加油站發生起火爆炸事故。廊坊市官方稱，事故未造成人員傷亡，起火原因為油罐車卸油后，靜電火花引發起火爆炸。以上4起事故除一起是由于汽油從量油孔外溢，流入下水道，油蒸汽與空氣形成爆炸性混合氣體，遇火源引起的爆燃，其余2起都是靜電引起的火災爆炸事故。汽油的閃點是-50℃，與空氣的比重為0.67～0.71，爆炸極限約為1.3～6%，它有一個很重要的物理特性就是非常容易氣化，揮發性非常強，有時我們用肉眼也能看到汽油液面有一層蒸騰著的霧氣，1升汽油能揮發成100～400升蒸氣，擴散到很大的空間。有時火源離開汽油似乎很遠，但與汽油蒸氣接觸仍會引起燃燒，如果汽油蒸汽的濃度達到爆炸極限，就會引起爆炸。卸油時充裝過快，無防靜電設施或防靜電設施未起作用和未穿戴防靜電勞動保護護具等，會引起大量的靜電電荷積累（當帶電體因電荷積累達到一定的靜電電位時一般大于

300v）引起放電，引燃引爆油蒸汽而發生的事故。火災爆炸的三個條件為：火源、可燃物、空氣。加油站最需要控制的火源（除明火以外）是靜電放電。靜電放電導致火災爆炸需要具備以下四個條件：一是靜電的來源有的產生；二是使靜電能夠積聚，并且要有足夠大的電場強度和達到起火點放電的靜電電壓；三是靜電放電所得到的能量能夠達到爆炸性混合物的最小燃點；四是靜電放電火花的周圍環境有爆炸性混合物存在，其濃度達到爆炸極限。我們在卸油操作時一定要防止油氣外泄，并防止有明火，同時防止靜電的積聚，卸油作業時要做好以下幾點：一是操作人員必須穿戴好防靜電護具。油罐車卸油前要按裝好防靜電夾鉗。二是通過液位或人工計量檢測確認所卸油品的空容量；防止跑、冒油事故發生。三是采用密封卸油，按工藝要求連接接卸油管；同時暫停加油作業。四是司機緩慢開啟罐車卸油閥，卸油員集中精力監視卸油全過程，隨時處理突發的問題；卸車司機不得遠離現場。五是卸油完畢，卸油員登上罐車檢查確認油品卸凈，關好油罐閥門，使油罐處于密閉狀態。罐車司機應關好罐車所有閥們及帽口，使罐車出于密封狀態。六是引導油灌車離站。七是罐內油品靜止10分鐘后，方可通知加油員開機加油。

二、加油區的火災爆炸事故

（1）位于鄭州市商城路鬧市區的鄭州標準石化有限公司商城路加油站發生爆炸，事故時間2001年7月23日下午3時，事故導致1人重傷，10人輕傷和輕微傷，4人死亡，爆炸直接造成近20萬元的財產損失，有關責任人被判3年有期徒刑。爆炸原因主要是一臺加油機漏油滲入地下室，由于地下室汽油蒸汽揮發遇電打火導致的。（2）一輛摩托車駕駛員到加油站給車加油的時候，把摩托車停在計量機旁，關閉發動機之后用發動機鑰匙打開油箱蓋等著加油。加油員看到客人就迎了上來，將合成樹脂材料的油箱蓋放在旁邊的水泥防護臺上，沒有帶防護手套，直接用手握住加油柄，把加油槍口接近摩托油箱口開始加油。等油加到1.5升時，突然從摩托車加油口處冒出火苗。（3）成都市高新區某加油站內一臺加油機突然發生爆炸，事故發生時間是2001年12月24日上午10：54。對這幾起事故，我們分別作分析：第一起是加油機漏油，加上電氣打火，引起的爆炸事故；第二起是摩托車加油沒有按照規程操作，靜電放電引起的火災事故。員工沒有穿防靜電純棉制服、鞋，加油機接地線損斷，而且在給這臺車加油前已加出了221升，加油之前，沒有按照規定的要求把加油槍應先搭在油箱口，把靜電導走后從新啟動加油泵，由于靜電聚集，在油箱口處引起放電，引燃油箱口汽油蒸氣；第三起是加油機泄露并加油機有爆炸空間，線路漏電引起的爆炸事故。通過分析我們知道要避免以上事故的發生，就要做到以下幾點：一是加油站的設備、設施要定期檢查、檢修、檢測并形成制度。發現問題、隱患要及解決、整改。二是加油站工作人員上班要穿著防靜電工作服具。三是要嚴格執行加油規程，加油站十不準等有關規定。

三、檢修、清罐時引起的火災爆炸事故

（1）在阜新市振興加油總站，阜新遠弘能源科技有限公司租用振興加油總站一個油罐和這個油罐所連接的一把加油槍。2011年9月24日上午9時左右，遠弘能源部門經理胡龍飛雇來劉學云等3名清灌工人，現場簽訂清罐協議后，開始清罐作業，下午四時左右第一個油罐清洗結束，胡龍飛和劉學云結清費用后，李博（站長）提出再清洗一個油罐（汽油罐），向油罐里送風后，李博、李博的妻子、胡龍飛及王昌偉（遠弘能源）陸續離開了油罐區，送風5、6分鐘左右，油罐區域瞬時燃燒起來，清罐的三名工人渾身是火跑出油罐區域。120救護車緊急將三名傷者送往礦總院燒傷整容科急救。事故發生后，海州消防大隊第一時間趕到現場，（當時現場明火已經被加油站的員工撲滅），事故現場保存完好。2011年2月26日，清罐工人劉學云經搶救無效死亡。此次事故造成1人死亡，兩人重傷。（2）在江蘇省宜興市官村鎮春江加油站員工在清洗埋地式柴油罐時發生爆燃事故，事故時間是2001年4月26日14時20分，事故導致1人死亡。（3）在江蘇省興化市唐劉加油站發生油罐爆炸事故，事故時間2002年3月11日下午1時15分左右，當場2人被炸死，另有2人受傷。事故發生的主要原因是由于加油站油罐改造施工，罐內殘余氣油遇到明火引起爆炸。第一起事故是清柴油罐殘留的油蒸汽與當時風機排出的汽油蒸汽混合在一起，油罐區內油蒸汽與空氣混合濃度達到了爆炸極限范圍內（1.3%～

篇8

[Abstract] Wet encased steel strengthening technology is a major means of strengthening existing housing construction, and has been widely used in the engineering actual reinforcement. Combined with an existing building reinforcement engineering in Huizhou city, the wet encased steel strengthening calculation process and matters needing attention are elaborated, and provides some experience and methods for engineering designers on reinforcement design

[關鍵詞] 濕法外包鋼加固 結構膠 灌漿

[Keywords]wet encased steel strengthening technology; structural glue; grouting

中圖分類號：TU753.8文獻標識碼：A文章編號：

1．前言

由于城市建筑空間的日益緊張，考慮到環保，節能的要求，對既有建筑的加固補強研究已經引起了我國土木工程界的廣泛重視。原蘇聯在工程加固方面起步較早，對工業廠房加固設計構造積累了較為豐富的經驗，并出版了專門的結構加固構造圖集；英國，原聯邦德國在混凝土結構缺陷修補，防水與防腐處理方面也積累了一定的經驗。我國截至目前繼續已經頒布了《混凝土結構加固技術規范》，《建筑抗震加固技術規范》，《混凝土結構加固設計規范》等行業指導規范和《磚混結構加固與修復》圖集。

外包鋼加固法是混凝土加固技術中的一種，適用于使用上不允許增大混凝土截面尺寸，而又需要大幅度提高承載力的混凝土構件的加固，由于具有施工周期短，對生產生活影響小，設計簡單的特點，在實際加固工程中得到廣泛應用，具體可以細分為干式和濕式兩類，其中又以濕法加固應用較多,一般用于加固鋼筋混凝土梁，柱，桁架，腹桿等構件。

2．濕法外包鋼技術原理和注意事項

2.1 濕法外包鋼加固技術原理

結構濕法外包鋼加固是建筑工程加固技術的一類，也即以乳膠水泥粘結或者以改性環氧樹脂化學灌漿作為粘結劑，將鋼板粘貼在鋼筋混凝土結構的表面，能達到加固和增強原結構強度和剛度的目的。

2.2濕法外包鋼加固主要適用條件

一般濕法外包鋼技術可以用于軸心受壓構件正截面加固，偏心受壓構件正截面加固，受彎構件正截面加固以及受彎構件斜截面加固計算，主要適用于需大幅度提高截面承載力和抗震能力的混凝土梁、柱的加固。

2.3濕法外包鋼加固的注意事項 濕法外包鋼加固過程應注意如下事項：外包鋼灌縫膠縫厚度的控制，宜在3~5mm；對于表面，包括混凝土表面和型鋼表面，應涂抹高強度等級水泥砂漿防護層；型鋼應優先考慮角鋼，具體規則依據計算而定；作為綴板的扁鋼和角鋼焊接要求應嚴格遵循焊接規范要求；外包鋼連接和錨固應可靠，簡單；同時對于采用化學灌漿的外包型鋼表面溫度應該控制在小于60度，對于具有腐蝕性介質的環境應該對型鋼構件采用相關防護措施。

3．某既有加固項目應用分析

3.1 項目概況

本項目為惠東縣稔山鎮辦公樓惠州市某辦公大樓，結構為六層框架結構，辦公樓部分框架柱出現鋼筋銹蝕影響正常使用，根據甲方要求，需要把原結構中受損柱進行受力分析加固補強計算。

3.2 具體計算分析

考慮到具體結構地處沿海旁，海水咸份對周圍環境產生影響，重新設定環境類別為二類，因此考慮外包粘鋼加固。

根據對既有建筑的鑒定報告提供的數據，利用電算分析工具進行模型分析，對照原設計圖紙配筋，找出強度承載力不滿足要求的構件，進行外包粘鋼加固

具體柱構件加固結構設計施工，平面圖及柱圖如下圖示：

計算依據：

《混凝土結構設計規范》GB50010-2002、《混凝土結構加固設計規范》GB50367-2006、

《建筑物結構安全性檢測鑒定報告》，報告編號：D2008JD0458；

《鉆芯法檢測混凝土強度檢測報告》，報告編號：F2008（02）0188

二、已知參數：-

1、軸心受壓構件（矩形）正截面加固計算公式：

N≤0.9φ(fc0Ac0+ f'y0 A's0-+αa f'a A'a)

2、根據有關規范及依據可知：

根據鑒定報告，取一邊柱代表計算，bXh=400X500,加固后BXH=500X600，L0/b=3600/500=7.2,按插入法φ=0.98，

計算過程，按《砼規范》，

Nmax=0.9φ(fcAc+ fy As)=3969K N

按《砼結構加固設計規范》

N≤0.9φ(fc0Ac0+ f'y0 A's0+αa f'a A'a)

A'a≥【N/（0.9φ）－fc0Ac0－ f'y0 A's0】/αa f'a=1.72cm2

實取4 L 80×5等邊角鋼，Aa=4*7.912=31.65cm2

4L80X5等邊角鋼滿足。

1）第一層估算柱力為1500KN，（依報告）

按四級抗震等，軸壓比=N/ fcAc

加固后每邊加大100 mm，砼強度C20，

加大截面后軸壓比=N/ fcA'c=0.52,符合規范要求。

2）第二層估算柱力為1200KN，（依報告）

按四級抗震等，軸壓比=N/ fcAc

加固后每邊加大100 mm，砼強度C20，

加大截面后軸壓比=N/ fcA'c=0.42,符合規范要求。

3.3 注意事項：

1）對粘合面進行打磨時，必須漏出混凝土新面并保證表面平整，四周磨出小圓角，用鋼絲刷刷毛，并用壓縮空氣吹凈。

2）鋼板粘結面必須進行除銹和粗糙處理，打磨粗糙度越大越好，打磨紋路和鋼板受力方向垂直。

3）用丙酮或酒精清洗混凝土，鋼板表面，要求混凝土，鋼板表面無灰塵，無油污

4）將清洗后的鋼板套入錨固螺栓，利用螺栓塊調節鋼板和混凝土之間的空隙，根據混凝土表面的平整情況，空隙厚度一般控制在2~3mm

5）將配置好的液態結構膠裝入灌漿罐中，啟動空壓機和灌漿裝置向鋼板和混凝土表面之間的空腔內灌漿，灌膠壓力為0.2mpa，壓力應從低逐漸升高，達到0.2mpa時應保持穩定

6）混凝土表面應用角磨機打磨處理，清除表面松散物和油污，直至完全露出新面，鋼板粘結面必須進行除銹和粗糙處理，直至完全出現金屬光澤，并要求粗糙度越大越好，打磨紋路和鋼板受力方向垂直。加固施工必須要有加固施工資質的單位

4．總結

外包粘鋼加固技術從理論和工程實踐上已經得到了比較完善的研究，但進行的具體的加固補強處理時必須要對既有建筑的材料進行鑒定，依據現有相關規范和電算結果對比原圖紙找出有待補強構件，施工操作必須嚴格遵循施工順序，嚴格依據施工圖紙施工，加固完成后必須做好相關檢驗。本工程交付使用后證明加固效果良好，業主評價較高，滿足了設計之前的各種要求，取得了較好的社會效益和經濟效益，是一個成功的外包粘鋼加固設計項目。

參考文獻

【1】《混凝土結構設計規范》GB50010-2002 《混凝土結構加固設計規范》GB50367-2006

【2】《外包鋼加固鋼筋混凝土構件的計算及有限元分析》

篇9

[關鍵詞] 甲狀腺功能亢進；甲狀腺激素；骨代謝相關細胞因子；骨代謝

[中圖分類號] R581.1 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-7210（2012）08（c）-0052-03

Study on the changes of bone metabolism related cytokines and bone metabolic indexes of patients with hyperthyroidism

WU Ping

Department of Endocrinology, Qianjiang Central Hospital of Chongqing City, Chongqing 409000, China

[Abstract] Objective To study varying pattern of bone metabolism related cytokines and bone metabolic indexes of patients with hyperthyroidism. Methods 64 cases of patients with hyperthyroidism in our hospital from May 2010 to January 2011 were selected as the observation group, at the same time 64 healthy personnel were selected as the control group. The thyroid hormone, bone metabolism related cytokines and bone metabolic indexes between the two groups were detected and compared. Results Thyroid related hormones: FT4, FT3 and PTH of the observation group were all higher than those of the control group; TSH was lower than that of the control group (P < 0.05). Bone metabolism related cytokines: IL-6 of the observation group was higher than that of the control group; CT, TNF and IGF-Ⅱ were all significantly lower than those of the control group (P < 0.05). Bone metabolic indexes: Ca2+, AKP, BGP, I CTP and P I NP of the observation group were all higher than those of the control group; BMD was lower than that of the control group (P < 0.05). Conclusion Changes of bone metabolism related cytokines and bone metabolic indexes of patients with hyperthyroidism are obvious, and it should be paid enough attention during treatment.

[Key words] Hyperthyroidism; Thyroid hormone; Bone metabolism related cytokines; Bone metabolic

甲狀腺功能亢進（甲亢）在臨床上主要歸屬于自身免疫性疾病，患者表現為機體代謝紊亂，同時血清中存在的抗甲狀腺激素可刺激甲狀腺細胞分泌過量的甲狀腺激素[1]。另外，甲亢患者機體除表現出甲狀腺的癥狀體征及甲狀腺激素的變化外，較多其他因子也可隨之波動，對其進行研究可以進一步為甲亢的診斷治療提供依據[1-2]。以往較多研究認為，甲狀腺激素與骨成熟、發育有關[3-5]。本文筆者就甲亢患者骨代謝相關細胞因子及骨代謝指標的變化規律進行研究，現將研究結果報道如下：

1 資料與方法

篇10

子亡夫故悲情難抑

兒媳攜孫出走雪上加霜

2012年6月15日，武漢石門峰陵園。陳曼華一手牽著6歲的孫子小寶，另一手捧著丈夫張洪的骨灰壇，站在兒子張心的墓前：“兒啊，你的小寶來看你了！媽來看你了！你爸怕你一個人太孤單，也來陪伴你了……”

丈夫亡故的“頭七”還未滿，陳曼華這天回漢口的家，忽然發現孫子小寶和兒媳伍霞都不見了。遍尋無果后，她得出結論：伍霞帶著孫子跑了！她一下癱在地上：“老頭子啊，我這是造了什么孽啊……”

1969年，在武漢船舶廠工作的陳曼華不顧父母的強烈反對，嫁給遠在大西北某軍企工作的張洪。雖然兩地分居，但陳曼華愿意。1972年，兒子張心出生。然而幸福的生活沒維持多久，陳曼華的公婆相繼暴病身亡，留下張洪4個未成年的妹妹。

丈夫遠在大西北，28歲的陳曼華毅然扛起了照顧丈夫4個妹妹的重任。日子過得異常艱難，她就帶著妹妹們去挖野菜，刨苕根，以補貼家用……1978年，幾經周折，陳曼華離開武漢調到赤壁一家軍工企業，張洪也從大西北調到赤壁山區工作。這樣，一家人團圓了。豈料，1981年7月，張洪被診斷為“鼻咽部漿細胞惡性腫瘤”，經過兩次手術，他暫且保命。此后，家里平靜了幾年。

2002年，陳曼華的獨生子張心和通山女孩伍霞成家，幾年后生下兒子小寶。可2012年，張心突然被查出也患了絕癥――胃癌，且是晚期。一家五口，一夜之間出現兩個絕癥病人。悲痛之下，本已闖過癌魔奪命關口的張洪舊病復發，父子倆同時住進了湖北省人民醫院。為了給兒子省下救命錢，張洪不愿再進行手術，只想把錢都花在救治兒子身上。然而，他還是沒有挽回兒子的命。2012年寒涼的早春，陳曼華的獨生子張心沒能熬過美麗的春天，先一步離開早年患癌癥的父親而去。

黑發人送白發人的悲劇，讓張洪身上的癌魔如同點燃導火索的定時炸彈。2012年6月，張洪也撒手人寰。臨終前，他最為牽掛的是兒媳和孫子，他拉著陳曼華的手叮囑：“一定要把他倆安頓好，把孫子的戶口遷回武漢……”

丈夫去世后，陳曼華希望實現丈夫的遺愿，夢想把孫子的戶口遷回武漢老家，唯一的辦法就是媳婦改嫁到有武漢戶口的男人，然后，孫子才能隨母親投親靠友進武漢。可她沒想到，在這個悲苦的當口，本該與自己相依為命的伍霞，卻給這個風雨飄搖的家傷口上撒下一把鹽，帶著兒子人間蒸發了！

陳曼華狂躁不安，與兒媳的往事刺痛著她的心。痛定思痛，他心情漸漸平靜下來，還是得顧全家庭大局，實現丈夫在世時一直糾結在心里的夢：把孫子的戶口轉到武漢。首要面臨的是，做通兒媳伍霞的工作。

伍霞，1975年生于咸寧通山一個農家。她技校畢業，經媒人牽線，嫁給了張心。因公公常年治病，家庭并不寬裕，她和婆婆時常發生家庭糾紛。

2003年，張洪病情再度復發，情急之下，陳曼華不顧兒媳的強烈反對，將蒲圻一套小產權房賣了十多萬元用于丈夫的急救。而這套房，是她承諾準備過戶給兒媳的。房子沒了，伍霞一氣之下遠走深圳打工。兒媳走后，陳曼華又當奶奶又做媽地養育小寶。2007年，陳曼華退休后，用兩口子以及兒子多年積蓄在武漢買了一室一廳的二手房，全身心撫育這個孩子，并將孫子送進一家雙語幼兒園上學。盡管如此，婆媳之間的房產硝煙并未散去。在伍霞看來，老公走了，公公也不在世了，家庭收入只有婆婆1000多元的退休金，這個家讓伍霞徹底失望……

陳曼華的親友們猜測，伍霞可能帶著孩子回了咸寧山區娘家。如果貿然去那里找小寶，婆媳之間難免發生沖突。即使找到小寶，伍霞也絕不肯讓婆婆把孩子帶回武漢，弄不好，兩個家庭為爭奪孩子還會發生過激行為。親友們于是勸說陳曼華一邊冷處理，一邊從查找伍霞的下落。

婆媳艱難的較量

寬恕的力量告慰亡者

漫無目標的等待，折磨著風燭殘年的陳曼華，她幾天不吃不喝。然而，在經受這么多年風風雨雨的洗劫之后，她就像拳擊運動員一樣，練就了抵御生死打擊的“抗打力”。她要等，等著自己的寶貝孫子某一天從天而降。

這天，一個來電讓她驚跳起來，竟是小寶的來電。原來，小寶果真被伍霞帶回通山老家大山深處，但這個聰穎的孩子還記得奶奶家的電話。于是，趁外婆家沒人，就拿起電話打通了奶奶家的電話：“奶奶，我在外婆家里……”可話還沒完，電話那頭被大人掐斷了。得知孫子的下落，陳曼華淚流滿面。“我的孫子還安然無恙，他好好的呢！”

此時，陳曼華哪里知道，丈夫死后，伍霞對這個家，尤其對婆婆已經失望，開始考慮自己的未來：自己還年輕，不可能守著一個孤老婆子一輩子，這個家又該何去何從？重重糾結下，她做出一個決定：偷偷將兒子雪藏老家，不讓婆婆見面，也不讓婆婆知道孫子的下落。她要以此窺探陳曼華下一步的打算，也冷靜下來思考自己人生的出路……

然而，伍霞畢竟出生于一個淳樸的山民之家，父母從小就教育她與人為善。這個家的厄運讓她心痛的同時，她也對婆婆很是同情：老年喪子喪夫的痛，該讓她如何承受？

一個月過去，她焦躁起來，擔心婆婆想孫子鬧出人命。2012年7月的一天，她悄悄潛回武漢，偷偷打聽到婆婆安然無恙后，就租房住在武漢打工。

兒媳的到來，很快被陳曼華的親友打聽到，陳曼華歡喜不已，于是幾番周折打聽到兒媳的住處，開始“談判”。

婆媳見面，分外尷尬。好半天，陳曼華才顫抖著說：“為了小寶有個好的前途，你得在武漢重新組成家庭……”這話還沒出口，伍霞就來氣，以為婆婆不準她改嫁呢：“嫁不嫁人跟你婆婆沒關系，還以為是舊社會，死了老公女人得守寡終生。”兒媳的話，讓陳曼華一陣心痛：“我這也是為你們娘倆好。”陳曼華把話挑明了。“既然你想到媳婦重新成家能夠有利于孫子，你當初怎么不為我考慮？做你張家媳婦這多年，為你張家生兒育女，我憑什么一走了之？”說到這里，伍霞提起當初住房也被公爹在世時為了治病賣了的事：“雖然產權不是我伍霞的，但是我是你張家媳婦呀，現在連房子都沒有住的。”

陳曼華和媳婦伍霞一天一夜的談判以無果告終。第二天，一夜未眠的陳曼華痛定思痛之后，打算先把孫子弄回武漢上學，暫時跟著自己吃住，其他的事情再商量。事實上，伍霞出走之后，心里雖然痛恨婆婆，但想到她看不見唯一血脈的那種失落，她還是準備去告訴婆婆將把孩子接回來。

兩個人再次見面。在尷尬的一瞬間，還是陳曼華把自己的想法告訴了伍霞，正在托付熟人為媳婦物色對象。媳婦也告訴婆婆這就去老家接孩子。

2012年9月，小寶回武漢上小學。每天上下學，陳曼華接送。看著這對祖孫血脈相連，伍霞一路偷偷跟在后面。在伍霞看來，婆婆顯然在和自己爭奪孩子。

幾天后，伍霞將兒子接到自己身邊，再次向陳曼華提出當初房產之爭的事情。陳曼華這才發現，兒媳其實還在糾結那套房子，然而，房子早賣了，她也沒有錢補償他們娘倆。左思右想后，陳曼華做出一個決定：為媳婦在武漢重新成個家，看能不能找一個有武漢戶口的“上門女婿”，結婚后就跟自己住在這一室一廳的房子里。日后，再把孫子的戶口投親靠友轉來武漢就行了。

這是一個大膽的決定。古往今來，只有母親為女兒找婆家的，哪有婆婆為兒媳找婆家的？而且還準備搭上一套房子，雖然戶主房產權還是自己，但是，“請神容易送神難”，一旦媳婦嫁人住在自己房子里不走，又容不下這個外人婆婆那就倒霉了。這個決定，陳曼華著實痛苦了好久，但想到孫子有歸宿，自己受點委屈又有什么關系呢？而自己已風燭殘年，給他們娘倆找個歸屬，這才是自己要做的！

年已70歲的陳曼華于是放下老臉，幾經周折再次找到伍霞“談判”。婆婆的到來，讓伍霞警惕。丈夫沒了，這個家對她全然沒有意義，她一度對陳曼華不冷不熱。

陳曼華說：“是我們張家對不起你，讓你和孩子受苦了。心心就這樣走了，留下你們孤兒寡母，我心里也不好受。若有來生，讓他再彌補你吧。我也老了，活不了幾年，你和孩子也是我最后的牽掛。你也很年輕，還要成家，所以，我想，幫你找個人家，我那房子總是你兒子的，這樣我也放心走了……”

伍霞一直以為，婆婆的到來就是和自己搶孫子的。在老一輩觀念里，血脈香火根深蒂固。然而，她沒想到，陳曼華竟是來為自己找婆家而愿意提供住房。對婆婆的決定，她有點受寵若驚，然而，她又很快警覺。陳曼華似乎看出了她的顧慮，說：“你放心，你再婚后，小寶依然是你兒子，吃飯上學的錢還是我負擔。我也不會拖累你……你要是不信，我們可以立下字據為證。”

燃燒的悲情走向重生

帶著婆婆一起出嫁

又經過一個月的四處奔走，陳曼華的苦心終于得到回報。在中山公園里，伍霞約見陳曼華見面，跟在伍霞身邊有一個陌生男子。伍霞說他叫王浩，在郵局工作，看見陳曼華到處為媳婦找個好婆家的信息后，與伍霞投緣，今天特地和伍霞來見一見婆婆。

陳曼華一看這王浩，感覺他比較老實，印象不錯，首先想到，不會到了自己家里把我這老太婆折磨死吧，于是問王浩在哪里知道伍霞的信息的。原來，陳曼華幾乎一有時間，她都去中山公園的自由戀愛的露天相親場所，一邊掛字條，一邊坐在那里和爹爹婆婆天，這里大多數都是上輩人為下輩人代替找對象的地方，也有男女們自己來找對象，卻假裝幫別人查看信息的。因此，王浩告訴陳曼華，說陳師傅您放心好了，我早就注意到你，看見您為媳婦找男家，的確很好奇，于是多次側面打聽，所以，確認您是個好心的婆婆，這媳婦伍霞也許不錯。這樣，就和伍霞掛上鉤了。

陳曼華一聽，驚喜不已，原來這王浩很有心機啊，不過看人外貌不錯，也有一份基本工作，起碼不愁生活吧。她當場就說，蠻好的，你們能走到一起，我這個以前的婆婆感到高興。陳曼華這時有點吞吞吐吐地說：“伍霞告訴過你我們的具體家庭背景沒有啊？”

這時，伍霞開口了，說：“王浩知道了，只是有一個要求不知道你怎么樣。”陳曼華立即問：“你說，是么事？”伍霞說：“房子是太小了，我們結婚住在一起很不方便，三代人一室一廳。”陳曼華點頭，說：“擠哈子么辦呢。”伍霞直接說了：“你能不能出去租一間房子單獨住，我們給房租？”

伍霞這話一出口，陳曼華沒想到，這不是還沒有進門就趕走我這個老婆子嗎！頓時，傷心的淚水差點落地，卻狠狠地吞了回去，她好半天才回過神來，說：“好吧，希望你把小寶帶好就是了，以后我住哪里再說吧。”這時，王浩一把拉著陳曼華的雙手，激動地說：“謝謝您！伍霞開玩笑逗您呢。”