細胞器范文

導語：如何才能寫好一篇細胞器，這就需要搜集整理更多的資料和文獻，歡迎閱讀由公務員之家整理的十篇范文，供你借鑒。

篇1

“細胞器―系統內的分工合作”一節是人教版生物必修一第三章第二節的內容。本節課的知識目標為：說出線粒體、葉綠體的結構和功能;得出“結構與功能相適應”以及“細胞器之間既有分工又有合作”的觀念。細胞器的內容對于高一學生是非常抽象和難以理解的，在之前的學習過程中學生很少使用顯微鏡，即使用了顯微鏡，學生能觀察到細胞就已十分不易，要觀察到細胞器，如葉綠體和液泡則更加困難。如何讓學生在已有的背景知識下，學習并理解分離細胞器所采用的離心技術，如何引導學生形成細胞器之間是協同合作的關系是下面著重探討的內容。

1 導入細胞器概念的類比

手機作為現代通訊工具給人們的生活帶來了無數的便利。手機在最基本的通訊功能的基礎上還衍生出了許多其他功能，如視頻聊天、導航、瀏覽新聞、聽音樂、看視頻、拍照、攝像等。如今手機也已經成為學生群體中必不可少的溝通和交流的媒介。筆者就以學生非常熟悉的手機作為類比對象，導入細胞器一節。在課前，教師引導學生回顧手機的功能，并啟發學生思考手機要實現這些功能所需要的零部件，從而順利啟發學生思考：“細胞作為生物體結構和功能的基本單位，細胞能夠完成呼吸作用、分裂、分化、分泌蛋白質這些復雜的生命活動，植物細胞還能進行光合作用，那么細胞中是否也存在零部件呢？”這樣引出細胞器的概念。手機和組成手機的零部件之間的關系與細胞和細胞器之間的關系非常類似。細胞器作為一個全新的概念，學生無法理解其與細胞之間究竟是何關系。在手機與手機零部件的類比下，學生便可以在第一時間熟悉細胞器原來就是細胞中的有一定結構和功能的基本單位。

2 探究細胞器思路的類比

如果想要研究手機中零部件的結構，只需將手機拆開，用肉眼觀察相應的零部件便可以得知;而在細胞中，人們無法再用肉眼去一一觀察細胞器，因為細胞太小，需要借助特殊的“眼睛”的幫助――顯微鏡，從而順利地引出首先用顯微鏡看細胞器來觀察細胞器結構的思路。隨后，便向學生介紹顯微鏡的發展過程，介紹目前生物科學研究中常用的掃描電子顯微鏡。之后，繼續啟發學生思考：如果想要研究這些零部件都有哪些種類和具體的功能，要將不同的零部件區分開，挨個地進行研究，與研究細胞器功能的思路是通的。首先要將不同的細胞器區分開，究竟如何將這些細小的細胞器分開，筆者則用“粉筆盒”的案例做類比。假設細胞就是一個粉筆盒，粉筆盒中已知有物體，因為搖動粉筆盒會發出聲響，但并不知道粉筆盒中具體有哪些物品，這些物品分別是怎樣的結構，就像學生已知細胞中有細胞器（光學顯微鏡可以觀察到有葉綠體、線粒體），但具體有哪些細胞器，對這些細胞器的結構特點、功能、名稱都不知曉。如果想要研究細胞器的具體類別、結構和功能，就要將它們分離，想要研究粉筆盒中具體有什么物品也需要將粉筆盒中導致聲響產生的物品進行分離，從而啟發學生思考如何分離盒中的物品（提示學生盒子可以打開，但開的方式由學生決定）。學生自然而然就想到粉筆盒中的物品可能有不同的體積，可以利用過濾的想法，在盒子表面打許多等大的孔（由小到大的順序），再將粉筆盒搖晃，就可以根據體積將粉筆盒中的物體分離開。

接著，繼續啟發學生若將打孔的方法應用到細胞上會不會有問題，能否順利進行，學生自然會想到細胞過小，且無法知道最小的細胞器具體有多大，在細胞上打孔難度極大，也不知道孔該打多大。順著學生的思路，教師繼續啟發學生可以從描述物體特性的另一個角度“質量”來思考。教師可通過借助“旋轉飛椅”（人坐在由鏈條牽引的椅子上由慢到快被甩到空中旋轉的游樂設施）的案例，幫助學生得出離心的技術方法。因為在相同轉速下，體重輕的人被甩得更高更遠，而體重相對較重的人會被甩得相對較低也離地面更近。教師利用手機、粉筆盒、旋轉飛椅三個類比，可順利地幫助學生理解科學家探究細胞器結構和功能時所采用的思路。

3 “細胞器之間的協調配合”的類比

篇2

關鍵詞：細胞器知識 中學教學 教學延伸

高中生物人教版必修1《分子與細胞》第3章“細胞的基本結構”中，細胞器相關知識的教學活動是重點和難點。細胞器種類繁多，功能和結構各異，識別和記憶的內容很多。教材提到：線粒體是細胞的“動力車間”，葉綠體是植物細胞的“養料制造車間”和“能量轉換站”。線粒體和葉綠體中含有少量DNA和RNA。至于其中的核酸（DNA、RNA）的功能就沒有做詳細介紹。但是習題中經常會出現要應用這些知識解決的一些問題。

下面我就列舉幾個在平時經常會涉及有關細胞器知識的判斷題，給予歸納總結。

問題1：某細胞中，一條還未完成轉錄的mRNA已有核糖體與之結合，并翻譯合成蛋白質，則該細胞一定不可能是真核細胞。

問題2：在根尖細胞中進行DNA轉錄的結構只有細胞核。

大部分學生認為這兩個判斷的答案是正確的。

問題1中的表述可以得知，該細胞可以邊轉錄邊翻譯。而真核細胞轉錄在細胞核內進行，翻譯在細胞質（核糖體）中進行的。很顯然轉錄和翻譯不是同步的。而原核細胞無細胞核只有擬核，在轉錄還未結束的同時就可以進行翻譯了。

問題2中根尖細胞中核內含有DNA，可以進行DNA轉錄。

拘于高中生物教材中的知識回答似乎沒有太大問題。因為高中教材雖然介紹了在線粒體、葉綠體中含有DNA和RNA，那么其中的基因是如何表達發揮作用的呢？

研究發現，線粒體和葉綠體中除有DNA外，還有RNA（mR―NA，tRNA，rRNAl、核糖體等，說明這兩種細胞器都具有獨立進行轉錄和轉譯的功能。就內共生學說看，線粒體和葉綠體都是被真核生物內吞的原核生物，所以線粒體和葉綠體與原核生物類似，其中的DNA不與蛋白質構成染色體，而是環狀DNA，并且具有自己的核糖體。由此來看，它們的基因表達過程應該與原核生物的相同，在轉錄的同時，正在延長的mRNA～：就可以開始翻譯了。

經過上面知識的補充、延伸，發現問題1的錯誤在于忽略了真核細胞內細胞器（線粒體、葉綠體）的轉錄翻譯也是同步的。而問題2中根尖細胞內的轉錄還可以發生在細胞器（線粒體）內。

問題3：在真核細胞中，DNA的復制在細胞核中完成，而蛋白質的合成在細胞器中完成。

問題4：在一個正在分裂的大腸桿菌細胞中，既有DNA的復制又有轉錄與翻譯過程：在一個人體的神經細胞中，只有轉錄與翻譯過程，沒有DNA的復制過程。

同樣大部分學生認為這兩個判斷的答案是正確的。

真核細胞的DNA主要分布在細胞核內，只有細胞分裂時細胞核內的才能進行DNA復制。而只要是活的細胞，均可以進行轉錄、翻譯過程。人體的神經細胞是高度分化的細胞，失去了分裂能力，不進行DNA復制，只有轉錄與翻譯過程，沒有DNA的復制過程。

線粒體DNA、葉綠體DNA都呈雙鏈環狀，與細菌DNA相似。而且其中的DNA都可以自我復制，復制也是以半保留方式進行的。它們的復制都受細胞核的控制，復制所需的DNA聚合酶都是由核DNA編碼，在細胞質核糖體上合成的。而且細胞器的復制與細胞分裂不是同步的。

經過分析，如果只考慮細胞細胞核中DNA，則問題3、4這兩句話都是對的。但是如果考慮到人的神經細胞內的細胞器中DNA的復制，那么這兩題的敘述顯然是不夠正確的。

問題5：細胞分裂過程中葉綠體、線粒體是如何增殖的？分裂后細胞器的數量會均等嗎？

在高中生物教材必修1《細胞的增殖》一節中提到，正常動物細胞中的中心體由兩個相互垂直的中心粒構成。在細胞分裂間期一個中心體復制，形成兩個中心體，并在前期逐漸移向兩極，發出星射線形成紡錘體。細胞分裂后每個子細胞中又各含一個中心體。

細胞分裂中不僅要進行染色體的復制并且平分到兩個子細胞中，各種細胞器同樣要增殖，隨著細胞質的分裂進入子細胞中，不同細胞器其增殖方式亦有所不同。

線粒體的增殖是由原來的線粒體分裂或出芽而來的。線粒體的DNA進行復制，線粒體中部縊縮或中間產生隔膜而一分為二。有的線粒體以“出芽”方式進行繁殖，先在線粒體上出現球形小芽，然后與母體分離，不斷長大而形成新的線粒體。

葉綠體由原生質分化而來，葉綠體靠分裂而增殖，這個分裂是靠中部縊縮而實現的。

細胞器經過復制增殖后，子細胞中的各種細胞器數量并不一定是均等分配的。因為細胞器并沒有類似紡錘體的幫助精確平分的機構。不過細胞質近似液體，所以細胞器原本分布就較勻，所以細胞質一分為二后兩個新細胞中細胞器數量近似。

問題：6：內質網是細胞內蛋白質合成和加工，以及脂質合成的“車間”。

篇3

【摘要】 目的研究西黃丸抑瘤作用對腫瘤細胞周期的影響。方法采用體內體外兩方面實驗進行。體外實驗：將西黃丸浸提液加入人原發性肝癌細胞株SMMC7721培養基中，72 h后流式細胞術測定SMMC7721細胞的細胞周期；體內實驗：連續10 d給予移植性U14荷瘤小鼠模型西黃丸，10 d后流式細胞術測定U14細胞的細胞周期。結果在體外實驗中，西黃丸（200 μl/ml）使SMMC7721中G0-G1期細胞比例顯著低于腫瘤細胞對照組，G2-M期增多；在體內實驗中，西黃丸高劑量組（0.96 g/kg）中也導致U14細胞G0-G1期細胞比例顯著低于模型組，G2-M期細胞增多。結論 體內、體外研究結果顯示西黃丸可特異性地將腫瘤細胞阻滯在G2-M期，提示西黃丸可以通過影響腫瘤細胞周期來發揮抑瘤效應。

【關鍵詞】 西黃丸 抗腫瘤 細胞周期

AbstractObjectiveTo study the antitumous effect of Xihuang Pill on cell cycles of cancer cells. MethodsLeachate of Xihuang pill was used to treat human malignant tumor cell strains（SMMC7721）in vitro， after 48 hours the cycle of tumor cells was determined by flow cytometry. At the same time， Xihuang pill was used to treat tumor-bearing mice (U14) for 10 days in vivo， the cycle of U14 cells was determined by flow cytometry. ResultsExperiment in vitro showed that the proportion of G2-M of SMMC7721 treated by leachate of Xihuang pill was high (P

Key wordsXihuang pillt； Antitumous effect； Cell cycle

西黃丸為中藥抗癌名方，功效活血化淤、清熱解毒、消腫止痛。臨床文獻報道，西黃丸用于乳腺癌、肝癌、白血病等多種惡性腫瘤的治療，取得了肯定的療效。在既往的研究中發現，西黃丸可抑制腫瘤細胞的生長。為了進一步研究西黃丸抑瘤的特點，筆者采用體外、體內實驗的方法，考察了它對腫瘤細胞周期的影響，具體實驗如下。

1 材料

1.1 藥物西黃丸，九寨溝天然藥物集團有限公司生產，批號030501。體外實驗采用西黃丸低溫浸提液，體內實驗采用西黃丸混懸液進行。西黃丸低溫浸提液制備方法：采用密閉容器，以預冷4℃的RPMI-1640培養液浸泡西黃丸24 h（比例為0.1 g/ml），超聲振蕩助溶2h，復以4℃下繼續浸泡48 h后取上清液，用0.22 μm微孔濾器過濾后，得到西黃丸低溫浸體液。實驗時用RPMI-1640培養液稀釋至所需濃度使用。

1.2 試劑

RPMI Medium 1640培養基Gibco公司，批號1165062；胰蛋白酶（Trypsin，1：250）Serva公司，批號27043C； RNA酶（RNase）Roche公司，批號90436528；新生小牛血清(Newborn Bovine Serum，NBS)三利生物制品廠，批號20040101；碘化丙啶（Propidium Iodide， PI）Sigma公司，廣州展晨生物科技有限公司進口分裝。

1.3 細胞株

人原發性肝癌細胞株SMMC7721，由成都中醫藥大學病理教研室提供。細胞株用含10%新生小牛血清的RPMI-1640培養基培養，細胞貼壁達80%時傳代。

1.4 動物

昆明種小鼠，雌性，18～22 g，成都中醫藥大學實驗動物中心提供，批號SCXK（川）2004-11。

1.5 儀器Beckman Coulter Epic XL 流式細胞分析儀；Heraeus BiofugeStratos低溫離心機。

2 方法

2.1 體外實驗

2.1.1 分組

體外實驗分對照組（含人腫瘤細胞）、實驗組(含人腫瘤細胞和西黃丸浸提液，設兩個濃度100，200 μl/ml）。

2.1.2 方法

取對數生長期的SMMC7721，0.25%胰蛋白酶消化，計數細胞，用1640培養基稀釋成5×105/ml濃度的單細胞懸液，然后取每孔1 000 μl，接種到6孔板上，置37 ℃，5 %CO2，飽和濕度的細胞培養箱中，培養6 h待細胞貼壁后，設對照組、實驗組，均設4復孔。對照組用等體積1640培養液代替受試藥物，實驗組加入不同濃度的藥物，每孔200 μl。6孔板置37 ℃，5 %CO2，飽和濕度的細胞培養箱中，培養72 h后。棄培養液，收集6孔板內的細胞，PBS洗滌離心后，70%乙醇固定12 h，去乙醇，經PBS洗滌2次，加PI染劑混勻，置4℃冰箱避光染色30 min后，上機檢測細胞周期，每次測定10 000個細胞。

2.2 體內實驗

2.2.1 小鼠移植性惡性腫瘤細胞株

小鼠宮頸癌U14由成都中醫藥大學病理教研室提供。

2.2.2 小鼠移植性腫瘤的接種與傳代

根據文獻方法［1，2］將液氮凍存昆明小鼠子宮頸癌瘤株進行復蘇，經體外培養增殖，生長穩定后以5×106細胞量接種于昆明小鼠腹腔內，待其長出癌性腹水后傳代培養至5代，取小鼠無血性的癌性腹水，供接種使用。實驗時將第5代的腫瘤小鼠癌性腹水用無菌生理鹽水調整細胞數至5×106，接種于昆明種小鼠右側腋窩皮下（每只皮下注射0.1 ml），建立移植性U14荷瘤小鼠模型。

2.2.3 動物分組

實驗時取昆明種小鼠30只，按體重分層隨機分為3組，每組10只動物，分模型對照組、西黃丸高劑量組、西黃丸低劑量組。各組均使用移植性荷瘤小鼠。

2.2.4 給藥及實驗方法

模型對照組給予等體積蒸餾水灌胃；西黃丸低劑量組給予西黃丸混懸液0.48 g/kg灌胃給藥（西黃丸每日人用量6 g，以50 kg為正常人體重計算，給藥量相當于人用量9倍）、西黃丸高劑量組給予西黃丸混懸液0.96 g/kg灌胃給藥（給藥量相當于人每日用量18倍）1次/d，于動物接種后1 d開始給藥。連續給藥10 d，處死動物，剝離皮下瘤塊，在PBS中用眼科剪將瘤塊剪碎后，經300目篩過濾除去成團細胞，離心800 r/min，5 min，取上層液體，經1 500 r/min離心10 min，棄上清，離心后得的細胞，再次經PBS洗滌1次后， 70%的乙醇固定24 h。去乙醇，經PBS洗滌2次，加PI染劑混勻，置4℃冰箱避光染色30min后，上機檢測細胞周期，每次測定10 000個細胞。

2.3 統計學方法

用《中國醫學百科全書·醫學統計學》統計軟件包PEMS3.1進行。

3 結果

見表1～2。表1 西黃丸對SMMC7721細胞周期（72h）的影響（體外）(略)

表1可見，與腫瘤細胞對照組相比，西黃丸浸提液100，200 μl/ml使G0-G1期細胞明顯減少(P＜0.01)；西黃丸浸提液200 μl/ml G2-M期細胞比例明顯增高(P＜0.01)。

表2可見，與模型組相比，西黃丸高劑量組使G0-G1期細胞明顯減少（P

4 討論

西黃丸出自清代王洪緒所著的《外科全生集》，為治療“乳巖”之家傳秘方，由牛黃、麝香、乳香、沒藥4味中藥組成，方中牛黃別名犀黃，牛黃產于西北者，又叫西黃，故西黃丸也稱犀黃丸。其主要功效為活血化淤、清熱解毒、消腫止痛。它組方簡單，療效確切，臨床應用廣泛，為中醫抗癌名方。目前較多的臨床研究報道：西黃丸用于肝癌、乳腺癌、白血病、肺癌等惡性腫瘤的治療，取得了肯定的療效。既往的研究發現，西黃丸對腫瘤細胞具有明顯的抑制作用，但抑制作用發生的細胞周期環節是本次研究的焦點，故我們采用體內、體外兩方面的實驗，對此環節進行了研究。

細胞從一次分裂結束到下一次分裂結束的一個周期稱為細胞周期。增殖型細胞的細胞周期分為4期，即G1期(DNA合成前期)、S期(DNA合成期)、G2期 (DNA合成后期)、M期(有絲分裂期)。有時細胞長期處于靜止的非增殖狀態，常稱為G0期［3，4］。流式細胞技術(Flow Cytometer， FCM)是細胞周期研究中常用手段，能夠對細胞和細胞器及生物大分子進行高達每秒上萬個染色體的分析。具有速度快、精確度高、準確性好的特點，是目前最先進的細胞定量分析技術。

在既往的文獻中，有報道顯示［5，6］，抗癌中藥的作用是將腫瘤細胞阻止于G0-G1，使腫瘤細胞處于相對靜止狀態而發揮抑瘤作用。

篇4

[關鍵詞]血管內皮祖細胞；CD133(AC133)：免疫磁珠

[中圖分類號]Q254　[文獻標識碼]A　[文章編號]1008―6455(2007)01―0015－04

一般認為內皮祖細胞(endothelial progenitor Cell，EPC)僅見于胚胎時期，但近年來，越來越多的證據表明在成年個體中也存在少量的EPC。1997年ASahara等報道在成人外周血中分離出EPC，體外培養呈梭形，具有形成管腔樣結構的能力，且能夠表達成熟內皮細胞的特異性抗原，在動物實驗中可參與新生血管的形成，此后，又陸續觀察到骨髓和臍帶血中均存在EPC。EPC具有促進血管新生，加速缺血組織血管化的作用。本實驗采用免疫磁珠法從人臍血中分離培養EPC，觀察EPC在體內缺氧條件下分化成內皮細胞，并參與血管生成，為治療性血管發生研究及組織器官移植提供種子細胞。

1　材料和方法

1．1主要試劑及標本來源：胃癌GC7901細胞株由第四軍醫大學實驗動物研究中心細胞庫提供)；ACD―B抗凝液(上海市血液中心)：1．077淋巴細胞分離液(天津TBD公司)；免疫磁珠試劑盒(挪威DYNAL公司)；Fibronectin(美國Sigma公司)：異硫氰酸熒光素(FITC)CDl33單抗(美國R&D公司)；抗人vWF單抗(英國Serotec公司)；F1RC－二抗及辣根過氧化物酶標記二抗、CD34單抗(丹麥DAKO公司)；EGM-2MV培養基(美國Cambrex公司)；細胞熒光染色試劑盒(PKH26 Red Fluorescent Cell Linker Kit，Sigma，美國)；人纖維蛋白原(Fibronogen，Sigma，美國)：人凝血酶(Thrombin 500，IMMUNO AG，奧地利)：PGA真皮替代物(NEOVEIL，日本)。BALB／c，nu／lnu裸小鼠15只，雌雄不限，鼠齡4～6周，體重18～23g(第四軍醫大學實驗動物研究中心)；人臍血標本來源于本院34例婦產科健康產婦(產婦均知情同意)。

1．2　EPC分離及誘導分化培養：ACD-B抗凝臍血，1：2加入磷酸鹽緩沖液(PBS)稀釋，取7ml緩慢加入3ml淋巴細胞分離液，621×g離心30min，取單個核細胞層，PBS洗滌3次去血小板。免疫磁珠與FITC-CDl33單抗室溫孵育30min，PBS洗去多余單抗。將包被FITC-CD133的免疫磁珠加入單個核細胞中，室溫孵育30min，置于磁場中1min，棄細胞懸液，參照免疫磁珠試劑盒說明書分離出CD133+細胞。加入EGM-2MV培養基(hEGF，Hydrocortisone，VEGF，FGF-B，R3－IGF－1)，接種于包被Fibronectin的25cm2培養瓶中，37℃，飽和濕度培養。24h換液除去未貼壁細胞，3天后半量換液，培養3～4周。檢測指標：①原代EPC的生長曲線：細胞以5×103個／孔的密度接種于96孔板。1～19天，隔日隨機抽取4個培養孔，噻唑藍(MTT)法測定各孔吸光度值，繪制細胞生長曲線。設不加細胞只加培養液為空白對照。②CDl33＋細胞分化：培養5天、10天的細胞分別加入FITC-CDl33單抗、CD34單抗、vWF單抗，室溫孵育30min，PBS洗去多余單抗。加入辣根過氧化物酶標記二抗，二氨基聯苯胺(DAB)顯色；取培養10天的細胞。③行透射電鏡觀察找Weibel-Palade小體。

1．3裸鼠成瘤實驗：常規方法復蘇、培養將胃癌GC7901細胞。取1×106個／1001×1原代培養EPC與1×106個／100μl胃癌GC7901細胞混合接種于裸鼠背部皮下。30天過量麻藥腹腔注射處死裸鼠，取出腫瘤。40g／L多聚甲醛固定12h，常規石蠟切片vWF免疫組化染色。觀察瘤體內EPC參與構成血管情況。

1．4裸鼠皮實驗：取5×106EPC，90g(800rpm)，離心5min棄上清，加入稀釋液(Diluent C)0．5ml，重懸取1μl PKH26熒光染液，迅速加入細胞懸液中室溫孵育2～5min。加入1ml RPM11640／10％FBS培養基中止染色，調整細胞濃度為1×106／ml，熒光顯微鏡下觀察。采用0．3％戊巴比妥鈉腹腔麻醉。裸鼠腹腔注射0．5～0．7ml，3～5min麻醉生效后，根據設計于腹部肉膜層與深筋膜的淺面之間，將皮瓣仔細掀起，熒光標記EPC單細胞懸液100μl(1×105)，分成3點(遠點、中點、蒂部)經皮軟組織面均勻皮下注射于皮瓣。術后7天，過量麻藥腹腔注射處死裸鼠，于皮中段切取組織，大小1．0cm×0．5cm。①細胞示蹤：行冰凍切片，采用570nm波長，熒光顯微鏡觀察。②常規石蠟切片vWF免疫組化染色，觀察EPC參與構成血管情況。

1．5取對數生長期EPC及成纖維細胞與纖維蛋白原溶液(5g/L)按1：2：3混合，加入PGA材料(預先加入20u／40μl凝血酶)，37℃放置10min，混懸液便形成凝膠狀固定于網孔中，加入EGM-2MV培養基培養。培養48h后，移植于裸鼠背部皮下。于裸鼠移植后21天取材，4％多聚甲醛固定。常規石蠟切片，vWF免疫酶組織化學染色，鏡檢。

2　結果

2．1 EPC傳代培養后，細胞形態及密度均勻，前3天為相對抑制期，此后呈指數形式快速增殖，10天后達到80％～90％融合。EPC生長曲線(圖1)顯示：人臍血EPC接種后5天內細胞數量無明顯增加，從第7天開始細胞數量明顯增加，在第16天達到最高峰，以后增殖趨于平緩。

2．2原代EPC貼壁緩慢，24h后懸浮細胞重新接種

培養仍有細胞貼壁生長。EPC在Fibronectin包被的培養皿中培養24h后，可見到部分圓形大單核細胞粘附于培養瓶底，3天后細胞貼壁完全，少量細胞開始伸展，隨著誘導培養時間的延長，圓形細胞逐漸減少，梭形細胞數量逐漸增多。7天左右出現由十數個細胞形成的細胞集落，可見20～30或更多數目細胞排列成內皮細胞特異性條索狀結構或網格狀結構。10天后形成明顯克隆，并有梭形貼壁細胞從其邊緣不斷生成，2～3周，細胞長滿培養瓶底，單層細胞呈多角形融合成片狀(圖2)。

2．3原代培養第10天細胞透射電鏡顯示：人臍血EPC平均直徑15μm，核／漿比例大。細胞膜伸出許多偽足絲，基底膜呈多層。胞漿內可見一種短棒狀小體，含平行管狀的內部結構，即Weibel-Palade小體(圖3)，是內皮細胞最具特征性的細胞器。

2．4　5只裸鼠接種細胞7天后均見腫瘤快速生長，抗人vWF免疫熒光組織化學染色顯示大量EPC參與腫瘤血管構建(圖4)。

2．5　EPC參與皮血管重建的觀察：通過實驗室體外培養，證實染色后細胞增殖活性無明顯變化，在熒光顯微鏡下可以清楚地辨別細胞的輪廓，染料在細胞膜上分布均勻一致。通過移植后7天皮瓣中段真皮下層熒光顯微鏡觀察，發現皮真皮下層存在能激發出紅色熒光的細胞，多呈散在分布，或呈條索狀分布(圖5)，偶可見管狀結構。并通過抗人vWF免疫酶組織化學染色，進一步證實EPC確實參與皮血管重建(圖6)。

2．6 EPC、成纖維細胞與纖維蛋白原混懸液與凝血酶混合后，數秒鐘后即形成膠凍狀，數小時后可見細胞均勻分布于真皮支架的各個層面，并逐漸伸展為梭形或多極狀，貼附于PGA支架纖維材料上(圖7)，隨培養時間的延長，細胞呈簇狀聚集生長。移植21天，真皮替代物支架中的孔隙已完全被細胞和細胞外間質填充，支架部分降解，被大量平行排列的新生膠原纖維所替代，可見大量新生小血管形成，vWF免疫酶組織化學染色陽性(圖8)，表明種植的EPC具有生物學活性，參與血管化過程。

3　討論

內皮祖細胞(endothelial progenitor cell，EPC)是一類能循環、增殖并能直接分化為血管內皮細胞(endothelial cells，EC)，但尚未表達成熟血管內皮細胞表型的前體細胞。以前認為EPC僅僅出現于胚胎血管發育階段，在人出生后，并不存在EPC。但最近研究發現在臍帶血、成人外周血、骨髓中的CD34＋細胞或flk 1+細胞或CD133+3細胞離體培養兩周后均能分化為內皮細胞，從而證實成年個體中存在EPCI3-41。并且經異體骨髓移植模型證實，成年個體外周血中的EPC來源于骨髓，在受到血管內皮生長因子(VEGF)、粒細胞／巨噬細胞集落刺激因子(G／M-CSF)等細胞因子以及缺氧刺激后可加速動員入外周血。在動物后肢缺血模型及大鼠急性心肌梗死模型中，人外周血、臍帶血和骨髓來源的EPC移植均取得了很好的療效。為臨床缺血性疾病的血運重建提供了一種新的治療策略。

目前對EPC發育分化的機制尚不十分清楚。EPC從原血干細胞而來，定向分化為內皮細胞，在此分化發育過程中，flk1是最先表達的內皮標志，其次是PECAM和Tie2的表達。成人外周血中的CD34+／ACl33+／flkl+EPC體外培養分化為成熟內皮細胞過程中，干細胞標志ACl33+逐漸下降，2周后完全消失，表明EPC是從原血干細胞到內皮細胞過程中的一個過渡的轉瞬即逝的細胞表型階段，隨著系列定向和分化成熟，在某些基因的調控下，細胞表型逐漸改變。目前尚未發現EPC的特異性表面標記物，CD133是新近發現的干細胞標記，其表達在造血干／祖細胞分化過程中迅速下調，而不表達于CD34-群體。更重要的是CD34+／VEGFR-2+的細胞均表達CD133，這就使CD133成為富集EPC的理想細胞標記。

篇5

第一天去見了主管的經理，據說口才是很棒的，初次見面，感覺她很干練。保險公司的氛圍與其他地方相比是很不同的，這里有一種很活躍的氣氛，在這里真的感受到了一些以前沒有感受過的東西。由于我沒有什么經驗，不能跑業務，所以就呆在辦公室和經理、組訓一起。

在保險公司，每天早上都會有晨會，晨會早上8點準時開始，遲到會扣錢的，但只是形式上的，一般會扣一塊錢的樣子，主要還是調動大家的積極性。晨會由主持人主持，一般就是組訓或負責的經理，但為了鍛煉各個業務員，也經常的會讓業務員上去主持。晨會首先會讓全體同仁起立做晨操，很有激情，在音樂的節拍下做各種滂湃的動作，會舒緩緊張的心情，還會讓沉睡中的身體舒展開。記得第一天去公司，要讓我上臺作自我介紹，本來剛剛到的時候還有些緊張，但跟著做完晨操后緊張感就沒了，很從容的上臺作了自我介紹。在晨會中，還會公布昨天各個業務室的業績，給予鼓勵。從早會中，讓我看到了朝氣，想必開完早會后一天的工作將會充滿激情。

這次實習中，公司召開了兩次產說會，一次是歲歲登高，一次是鴻福年年。通過這兩次產說會，讓我對險種有了新的認識，而且懂得了什么叫有壓力才會有動力。產說會是有關產品的說明會，各個業務員會帶著自己邀請到的客戶來參加產說會，由主講師講解關于這個產品的情況，讓客戶了解到該險種的價值，有何優惠，自己能得到什么利潤，以便客戶選擇適合自己的險種投保。通過講師生動的講解，加上現場回饋獎品，很多客戶都會現場簽單，所以說，產說會被保險公司看作一個和客戶溝通得很好的橋梁。還記得那次歲歲登高的產說會，當時現場簽單的客戶并不多，有5,6份吧。當時一位省公司的講師說，還是因為票價的問題，因為我們的票價太便宜，有時甚至不需要用票，所以業務員就沒有一種壓力，只是隨便邀請一個客戶來聽便完事了，隨便邀請到的客戶又有幾個想真心來簽單的呢。在接下來的一場票價為110元省公司的產說會中，現場簽的都是2萬元以上的單子，開始時，只有幾個業務主管買了票。但是，在那個口才很好的經理的說明下，有越來越多的業務員購買了票，就像那個經理所說的，只要買了票就一定能帶來客戶。果然那天所有買票的業務員都帶來了客戶，而且有了不錯的成績。

還有就是創說會，公司有像是雷霆行動等擴員活動，增員的任務是很重的。業務員會帶領自己邀請的新進人員來聽創業說明會，之后有意者將會留下面試。從事保險行業，首先必須通過從業資格考試，拿到資格證書，于是，新進人員會進行考試培訓。考試內容是關于保險的一些基本知識和其他的與保險相關的法律法規，像是《民法通則》《保險法》《消費者權益保護法》等等。為了了解更多的知識，我和這些新進人員一起進行了學習，在此期間，尤其學到了很多關于保險法的知識，收獲頗豐。

“讓客戶滿意”不是一句空洞的口號。在實際工作中，公司里有許許多多的客戶服務團隊和員工在為此努力。他們在各自平凡的崗位上，勤勤懇懇，認真負責，用微笑耐心的態度和專業的服務水平，讓客戶滿意，用真誠的服務體現自身價值，也在為客戶創造價值。他們也是公司在第一線和客戶打交道的“形象代言人”。

還記得有一次晨會中，經理請來了兩名其他地區的先進工作者和大家交流，至今令我印象深刻。第一位上臺交流的，聲音很響亮，很有自我表現能力，一上臺就唱起了歌以吸引大家注意。這是一位56歲的女士，但是她的語氣，氣色，情緒，都無法讓人猜出她的實際年齡，感覺充滿活力。從她的身上，我看到了激情與真誠的魅力，無論任何人與她想出一段時間后，都會感到她身上所散發的激情，并被此所感染，變得擁有生機活力。在激情的背后，她又不缺真誠，所以很多客戶只對她所推薦的險種感興趣，于是她的業務越來越好。只要對自己工作充滿激情，我想任何工作都會變得有意義。“精誠所至，金石為開”，只有自己真誠地對待別人，別人才有可能接納你，才會信任你，那樣工作也會變得順利。另一位上臺的女士，與前一位是十分不同的，她很文靜，感覺很踏實，也很真誠。這是兩種不同的風格，但她同樣的優秀，據說很快會升為副經理。她不會充滿激情的與你交流，但是，她卻發展了很多的下線，因為她待人真誠，有耐心，很多人都信任她，都愿意跟著她干，于是她的業務室人員越來越多，而且，她關心每個同事。從她身上，我同樣看到了真誠，我想在以后的生活中，無論從事什么工作，都要有對工作的熱情和待人的真誠。

每個營銷員要做得更多，要努力提升自己，要誠信熱情，要學會自我管理，要真正為客戶考慮問題……每一個非保險人也應該對營銷員多一些寬容、多一些理解，對保險多點認識，不要厭惡，不要恐懼——它只不過是一份契約而已。

篇6

受訪嘉賓二：北京市臍帶血造血干細胞庫業務負責人 鄧鉞

（注：本刊記者分別采訪兩位嘉賓）

保存臍帶血早已經不是什么新鮮事了。準媽媽一般會在產前的孕婦學校了解到保存臍帶血的信息，但是，因為缺乏對臍帶血全面和科學的認識，是否保存臍帶血仍然是讓很多準媽媽左右為難的事情。為難的原因大致分兩類，一是相對于近2萬元的自存費用和低概率的重大疾病發生率，保存臍血到底值不值得；二是保存后，看不見摸不著，長期不管不問，臍血庫是否能保證其保存和管理的質量。

臍血的利用，不只白血病

大眾健康：對于公眾來說，了解臍帶血的機會不是很多，有人認為臍血只能治療白血病。

劉開彥：保存臍帶血是為了保存臍血中的造血干細胞。而造血干細胞所治療的疾病不僅僅是白血病。目前，國際上利用臍帶血治療過的疾病已經有80多種，我國目前利用臍血參與治療的疾病也已經有30種以上。1996年，北京大學人民醫院、北京大學血液病研究所建立了中國首家臍帶血造血干細胞庫。2000年，北京臍血庫向北京大學人民醫院提供了第一份臍帶血用于臨床移植，成功救治了一名非霍奇金淋巴瘤患者。時至今日，僅北京臍血公共庫就已經利用臍血治療了500例之多。全國北京市、天津市、上海市、山東省、廣東省、浙江省、四川省共7個臍血公共庫，目前已累計提供了2000份臍血用于疾病的治療。截至2013年底，全球臍血移植超過38000例，絕大多數為非血緣造血干細胞移植。隨著醫學的發展，應用臍帶血造血干細胞治療的疾病種類會越來越多，技術也會越來越成熟。

所以，保存臍血實際上是保存了一種希望，這種希望會隨著醫學科技的發展而越來越豐富。保存臍帶血造血干細胞不僅對個體是儲備或保險，對于血緣相關的親屬或用于公共庫捐贈都有很好的應用前景和價值。

鄧鉞：保存臍血與買保險有相似的地方。有車一族年年都會為愛車購置保險，但不見得年年都會用到車險。臍血也是一樣。不是為了將來一定會用到而保存，而是為了以后需要的時候有可用。要知道，雖然白血病的發病率為每10萬人約3人，但是對于那些不幸罹患疾病的家庭來說，幾率就是100%。所以是否保存臍血還是取決于公眾的認識。

大眾健康：對于臍血的認識，很多準媽媽沒有得到準確信息的途徑，而網上的信息很多都是片面的，以致于很多準媽媽存有各種疑慮。比如，我在一個人氣頗高的母嬰論壇上，就曾看到有人很肯定的發帖稱，自體移植臍帶血尚無成功先例。利用異體臍帶血移植是已經得到臨床驗證的醫療手段，但自體移植獲得成功的，全世界尚無一例報道。

劉開彥：1998年國際上就有自體臍血移植的報道，目前，全世界已有上千自體臍血治療的病例。2009年，我國成功進行了第一例自體臍帶血移植，治療的疾病為神經母細胞瘤，也是亞洲的首例。這也是北京臍帶血造血干細胞庫首例儲存的臍帶血成功用于臨床。我記得是2009年4月，一名2歲的兒童在北京兒童醫院接受了移植手術。

鄧鉞：我們北京市臍血庫已經成功進行了9例自體臍帶血的移植。去年，我們成功進行了第9例、同時也是我國年齡最小的自體臍帶血移植。一名出生僅3個月的小嬰兒被確診患上了急性未分化型粒細胞白血病。因為孩子年齡太小，所以一度被懷疑為先天性白血病。但幸運的是，通過提取臍帶血樣本，最終確定孩子所患的并非先天性白血病。2013年7月，孩子在首都兒科研究所接受了移植。我還記得，孩子的媽媽在看到我們的工作人員送去救命血時，寫下了“多虧當時留了臍帶血”的字條，她透過厚厚的玻璃窗，含著眼淚一直在點頭。

大眾健康：這個案例真感人！看來，各位準媽媽真的不能隨意輕信網絡信息。剛才碰巧二位所提到的臍帶血移植都是嬰幼兒，我也聽過一些信息，說臍帶血移植只適用于10歲以下兒童，因為臍帶血的數量有限，每一個產婦的臍帶血大概也就是50～80ml，根本不足以用于成人的治療。 這個信息是否也不甚準確？

劉開彥：是的。10年之前，北京大學人民醫院首份臍帶血成功用于臨床的同年，也就是2000年，北京市臍血庫向北京大學人民醫院提供了雙份臍帶血，我們成功救治了一名體重95公斤的白血病患者。這也是我國首例成功移植雙份臍帶血造血干細胞的病例。目前成人的臍血移植，無論國內還是國外，均以單份臍血為主。

大眾健康：95公斤！那不但是成人，而且將近200斤體重的成人，是個質量偏大的成人呀！那是不是成人的治療都需要雙份臍血呢？

鄧鉞：也不盡然。有的成人只要一份也可以成功，也有孩子需要雙份的。這要具體看所患的疾病和治療手段。

大眾健康：剛才劉主任也提到，儲存臍血不僅僅是對將來個體應用，對于血緣相關的親戚也很有應用的可能。這個怎樣理解呢？

劉開彥：就是指臍帶血配型時HLA A 、B、DRB1 6個點位的相合度。對于孩子來說，臍帶血與其100%相合，與孩子的父母為半相合，與孩子的兄弟姐妹25%半相合，25%幾率全相合。對于異體臍帶血移植來說，只有相合度達到一定程度后，才能夠進行手術移植。

大眾健康：我們有沒有為親屬提供臍帶血的成功案例？

鄧鉞：2008年，一位四川的李女士在懷孕37周時被檢查出患有白血病。家人對她隱瞞了病情，曾勸她放棄懷孕接受治療。醫生得知此情況后，建議患者家屬將孩子的臍帶血儲存到北京市臍血庫，以便為日后進行移植治療時使用。當年12月，李女士順利進行了剖宮產手術，并采集了70毫升的臍帶血。生產后，醫生開始為她尋找合適的骨髓，但最終也沒找到配型完全相合的骨髓。于是醫生建議用患者父親配型半相合的骨髓進行移植。為了降低父親半相合骨髓移植的風險，需要使用孩子留下的臍帶血進行輔助治療，來降低排異反應。2009年1月。李女士成功接收了手術。移植1個月后，李女士病情逐漸好轉。原本AB型血的她竟然變成了跟父親一樣的B型血，說明她的造血系統已經重建。

除了自存，您還可以捐獻

大眾健康：很多準媽媽也是考慮到自存費用所以有所猶豫。目前我們的費用是多少？

鄧鉞：目前，在我們北京臍血庫的自存費用為19800元。

大眾健康：這也不算個小數字了，那這19800都包括哪些費用呢？

鄧鉞：我們采集、制備和檢驗的費用是6800元，其余都是年度保管費，每年980元，一共18年。當然，也可以采取按年的方式來繳納保管費用，跟分期付款似的。

大眾健康：除了自存，也可以進行捐獻。那捐獻和自存在采集程序和儲存上有什么不同嗎？

鄧鉞：沒有什么不同，都是一樣的。在孕婦學校的宣傳也是一樣的，都是想讓大家能夠充分認識臍帶血的價值。產婦簽署了知情同意書之后，會拿到一套采集的器皿，然后進產房之后直接交給大夫就可以了。我們的儲存條件也都是一樣的，沒有自存和捐獻之分，都保存在同樣的條件和環境下，完全一模一樣。雖然捐獻的臍帶血存在公共庫，自存的臍血存在自存庫，但這都只是名稱上的不同，在檔案記錄中有所區分，而實際的存儲都是同樣的。

大眾健康：捐獻臍帶血的捐者可以獲得怎樣的利益？

鄧鉞：捐者會得到一份自愿捐獻臍帶血的證書，今后在其本人和親屬需要時，都可以得到臍帶血的優先配型權。

大眾健康：那在捐者需要時，是否也可以使用自己捐出的那一份臍帶血呢？如果可以，這樣跟花錢自存有什么區別？

鄧鉞：捐獻就不是自己的了。就是說，如果是捐獻，臍帶血的所有權在血庫，捐獻者僅僅是有臍帶血的優先配型權，不一定能夠使用到自捐的臍帶血，而且還需要支付相應的配型、使用費用。但如果是自存的，那么臍帶血的所有權屬于自己，無論何時、如何使用、給誰使用都可以由自己支配，而且無需額外支付配型和使用費。

劉開彥：的確有很多家庭是懷著這種僥幸的心理來進行捐獻的。捐獻出來的臍帶血有可能由以下幾種途徑消耗掉。一是臨床。我們2007年加入了中華骨髓庫，將公共庫所有數據納入中華骨髓庫數據配型業務，共用檢索查詢平臺，共同為患者和醫院提供檢索查詢服務。數據都是公開的，所捐獻的臍帶血有可能被需要的患者配走。二是我們每年都要向科研單位提供臍帶血來進行科學研究之用。這部分臍血也出自公共庫。三是每年我們會隨機抽取臍血進行質檢，以確認我們的儲存質量。所捐出的臍血也有可能被抽到。

當然，如果很幸運，捐獻者需要幫助時，所捐出的臍血剛好沒有消耗掉，還在我們臍血庫，那捐獻者當然可以首選這份臍血。

但目前的情況來看，捐獻臍血的過程并不順暢，存在很多問題。

大眾健康：主要都有哪些問題呢？

鄧鉞：最主要的問題就是捐獻者的盲目性。不花錢，對自己也沒什么影響，那捐就捐吧。存在這樣想法的人不在少數，其實他們并不明確捐獻的意義在哪里。所以導致了很多在隨訪中找不到聯絡人或者采集后忽然拒捐，不愿意配合隨訪的情況。比如搬家了，手機換號了，不愿意把寶寶的健康情況告知我們的隨訪人員等等。

大眾健康：這會導致什么后果？

鄧鉞：我們隨訪的內容會關系到這份臍血的有效保存和利用。如果我們不能聯絡到捐獻者，那么這份采集到的臍血就只能作廢了。我們曾經發生過患者配型終于配上了，卻找不到捐獻者的情況。我們的工作人員打了無數的電話，甚至找到當時生產的醫院都未果。最后只能放棄這份臍血。這樣的案例不只一例。

大眾健康：真是太可惜了！您認為捐獻的意義在哪里？

鄧鉞：儲存臍帶血，真的是一生只有一次的機會。這不像獻血，血液會再生，可以重復捐獻。臍帶血只有在懷孕生產時才能采集得到，也不見得所有采集到的臍血都能通過我們的檢測、制備，最終成為一份合格的臍帶血造血干細胞而被保存下來。這份合格的臍帶血，有可能挽救一個人的生命，有可能給予一個家庭莫大的希望，有可能推動我們治愈重大疾病前進的步伐。這是多么美好的事情！在我看來，成功進行捐獻的媽媽本身就已經是崇高和偉大的了。捐獻對母嬰沒有任何影響，如果不捐獻不自存，那這份隨著生命而來的希望之血也就只能消逝在這個世界上了。所以，如果大家沒有條件和意愿進行自存，希望可以捐獻出來。

大眾健康：我記得央視曾公布過一些數據，說自存臍帶血庫的配型利用率很低，我印象中不到2%。而公用庫的配型利用率是自存庫的4～5倍，好像是8%以上。也就是說，公用庫的配型利用率遠遠高于自存庫。

劉開彥：這種情況很正常。因為公共庫是面向公眾開放的，誰都有權力合理的使用它。而自存庫只能是自己或家人使用自己的。再加上公共庫的存儲量少于自存庫，從每年的采集來看，70%是自存的，30%是捐獻的，本身分母的基數不同，那肯定公共庫的利用率要高于自存庫。這是很正常的。

大眾健康：劉主任您建議自存還是捐獻呢？

劉開彥：鼓勵捐獻，自存一定要充分，知情、自愿。公眾應根據自己實際情況和需要選擇是否儲存，是自存還是捐獻。

臍血采集后的“生命”歷程

大眾健康： 我們的自存臍帶血會存18年，18年能保證存放的質量嗎？18年后，這份臍血中的造血干細胞還能保有多少活力？

劉開彥：國外已有報道，凍存23年的臍帶血細胞依然保持良好的活性和植入能力。2013年，北京市臍血庫將一份凍存長達14年的臍帶血成功應用于臨床，細胞復蘇后的活性達到了96.14%。我們的技術是沒有問題的，甚至說已經達到國際領先水平。2005年，我們通過了ISO9001國際質量管理體系認證。2013年，北京市臍血庫獲得了美國血庫協會（American Association of Blood Banks ，簡稱AABB）認證，成為中國首家通過該認證的臍帶血庫。AABB頒布的臍帶血庫相關標準是世界上公認的主要標準，受到全球同行的廣泛認可。全世界除美國臍血庫遵循此標準外，歐洲、美洲、非洲、亞洲等眾多國家和地區的臍血庫均嚴格遵守該標準。北京市臍血庫獲得AABB認證，標志著中國臍血庫已經與國際接軌，并獲得了國際行業標桿的認同。這不但保障了臍帶血臨床應用的安全性，也對進一步規范與提高我國的行業標準起到積極作用。

鄧鉞：合格的臍帶血造血干細胞會被存放在零下196攝氏度的液氮中。這個溫度在醫學上認為是生命靜止的溫度，可以長久地保持造血干細胞的活性。我們的每個液氮罐都有一根真空管路通往室外的大型液氮儲備裝置，可以隨時補充罐中的液氮量，保持液氮液面高度。每個液氮罐都由電腦控制，數據會在監控部門的集中監控下，一旦條件改變，隨時都會報警。我們的這套裝備是從美國進口的，是目前國際上最先進的。通過了AABB的認證，意味著我們存儲的每一份臍帶血都擁有了“國際身份證”，無論在世界上哪一個國家都可以被認可。

大眾健康：我想很多準媽媽都很好奇，自己的臍帶血在采集完成后會被帶到哪里？都要進行哪些步驟？最終會“住”在哪里？您能為我們的準媽媽們描述一下，以便有一個感性的認識嗎？

鄧鉞：采集后的臍帶血會在24小時內由專人取送至臍血庫，工作人員會首先對臍血外觀和相關資料的完整性進行檢查，并對臍血體積進行評估。符合初篩條件的臍血會生成伴隨其一生的條碼編號，然后進入制備流程。制備的目的是去除臍帶血中的紅細胞和血漿，保留富含造血干細胞的有核細胞成分。整個制備過程在符合GMP要求的潔凈實驗室內完成，采用的是國際上最先進的全密閉的自動化處理系統，保證制備效果安全可靠。制備完畢的臍帶血會進行程控降溫，使之嚴格按照每分鐘1℃的降溫速率緩慢冷凍至零下90℃，然后再放入液氮儲存。在臍帶血凍存的同時，針對每一份臍血的一系列檢測也隨之展開。一方面是安全性的檢測：為了最大限度的減少經血傳播疾病的發生，我們除了對乙肝、丙肝、艾滋、巨細胞病毒、梅毒的抗原或抗體進行檢測，同時采用靈敏度更高的全自動儀器對乙肝、丙肝和艾滋病毒的核酸進行檢測；還有臍帶血的細菌/霉菌檢測，使用的也是血站專用的進口培養系統。另一方面是有效性檢測：采用全自動血液分析儀檢測臍帶血有核細胞數量和分類，使用流式細胞儀檢測臍帶血中的造血干細胞數量和活性，通過14天的集落培養評估造血干細胞的增殖和分化能力；這些檢測可保證每份臍帶血中含有足量有效的細胞。還有HLA分型檢測，可用于臨床使用時的配型查詢和臍帶血的身份確認。

篇7

大學的最后一個暑假，我有幸到廣東電信羅定分公司實習，在將近一個月的實習期里，我初步接觸大電信公司的一些運作，積累了一定的社會經驗. 我被安排在ADSL社區實習，負責指導我的是一名姓董的班長，而實習內容主要是ADSL的安裝與維護.經過班長的悉心教導，很快我就熟悉了ADSL的各項原理，實際操作能力也有所提高，以下就是我的一些實習體會. 第一:真誠待人.我剛來報到時，遇到很多新的面孔，由于和他們未熟悉，所以不敢和他們說太多的話，而且對工作未曾了解，開始覺得不太適應.后來我慢慢發現，只要真誠待人，虛心請教同事，他們也很樂意和我交往.還教會我一些技術，由此我深感真誠的重要性，在公司里不但要學會如何做事，而且要學會如何做人.正確處理同事之間的關系是非常重要的，它會關系到你能否開展工作.孤芳自賞并不能說明你有個性，過于清高是很難融入大集體的. 第二:不要偷懶.我曾問班長:"什么樣的員工在企業里會受?"他的回答是不偷懶的員工.我覺得很有道理，試問有哪個老板會喜歡懶惰的下屬的?于是我時刻提醒自己要多干活，盡力把本份工作做好.還記得我曾在超市做兼職時，主管很討厭在工作時幾個人圍在一起聊天的事，所以在工作的時候，就算是生意很淡的時候也不要聊天.由于我時刻牢記這一點，最終努力沒有白廢，我以良好的表現完成了實習. 第三:勤學好問.剛來到單位時，我對很多方面都未熟悉，這就需要我勤學好問.因為經驗是很重要的，我發現引起線路故障的原因有很多，如果沒經驗就很難處理問題.例如有一次，班長接到某音像店的報障后，趕赴現場發現戶主的網絡下行速率不正常，他先后把電話線，調制解制器，甚至電纜也換過仍未解決問題，最后他把端口也換了才排除了故障.遇上如此復雜的問題是比較少見的，可能連經驗豐富的員工也感頭疼.經驗不足的我更需多請教他們.但必須注意的是:在問人之前要分清哪些問題可以問，哪些問題不該問.還要注意在什么時候問會好一點.比如新來的員工就盡量避開報酬這個話題，不要對薪水太在乎，對于新人來說，能學到東西才是最重要的. 第四:講究條理.年輕人剛到工作單位時往往會表現急躁，這是正常的，但最好不要急功近利，急于表現自己可能會使自己處于不利地位.我們要抱著踏實的態度來做事，虛心點往往能得到別人的認同.其實我發覺前輩做事有一點很值得學習的，就是他們做事很講究條理，他們遇到問題會一步步去解決，而不是驚慌失策.例如他們在接到故障時，首先會根據用戶的反映來分析情況，然后問清楚對方的地址和聯系方式，當懷疑是用戶的電腦故障時還要帶上手提電腦去監測，最后才派出人手去收復，這種做事方式就很有條理，不會做一些無用功，工作效率也得到提高.受他們的影響我也慢慢變得做事不那么急躁了，這真是很難得的工作經驗啊! 今次的暑期實習帶給我不僅僅是一種社會經驗，更是我人生的一筆財富.更可喜的是我在實習期間還結識了一些好朋友，他們給予我不少的幫助.俗語說:紙上得來終覺淺.沒有把理論用于實踐是學得不深刻的.當今大學教育是以理論為主，能有機會走進電信公司去實習，對我來說是受益不淺的.我就快畢業走向社會了，相信這次實習對我日后參加工作有幫助.感謝在這期間所有幫助過我的人!

寫于廣東郵電

為（通信）企業管理032學生

篇8

蘇寧增資日本Laox

日前，蘇寧電器(002024.sz)公告稱，將以35日元／股的價格認購旗下日本Laox株式會社定向發行的1.79億股股份，總投資約5.03億元人民幣。發行完成，蘇寧將通過境外全資子公司持有Laox 51％股權，成為控股股東。日本Laox株式會社創立于1930年，是日本歷史最悠久的家電連鎖企業，與蘇寧，國美不同，Laox業務除了傳統3C家電外，還涉及動漫產品，樂器，手表等日用品零售。蘇寧副董事長孫為民表示，公司將把Laox引入中國，實施雙品牌戰略，同時還將擴大Laox在日本的布局，為國際化進一步奠定基礎。蘇寧電器打算在中國設立Laox中國總部，并公布了未來五年發展規劃：到2016年，Laox中國將在北京，上海，廣州等25個城市開設150家門店，建立集休閑，購物于一體的樂購仕生活廣場(LAOX LIFE)，單店面積在1萬至2萬平方米之間。目前Laox在北京，上海，深圳等核心城市已經開始進行選址規劃，今年年底將開出2到3家門店。孫為民說，Laox可獨立采購，共享蘇寧電器后臺設施，并互相補充各自經營管理模式。

網上商品性能描述將有統一標準

受全球數字貿易產業聯盟的委托，重科院將與中國電子商務協會，廣東商學院聯合共建“數字貿易標準技術聯合實驗室”。這個實驗室的其中一項功能就是：建立一套統一的商品性能，質量描述標準，并從生產，供應環節，就將這個統一的商品描述轉化為數字資料，放入到網絡數據庫。有了這樣一個數據庫，可以避免現在網店銷售時，對同一件商品存在多種不同的性能，質量描述。消費者在網購時，也可以從這個數據庫中調取標準描述，減少因夸大或不實描述而掉進消費陷阱。

“數字貿易”是由全球數字貿易產業聯盟發起并提出的一種B2C、B2B的電子商務創新模式，其目標是向消費者提供一個從網上到網下的互動生活輔助平臺，并最終改變網絡生活方式，現實消費習慣。

沃爾瑪電子商務中國區總部落戶上海

日前，上海市商委與沃爾瑪簽署了《在滬發展電子商務合作框架備忘錄》，據雙方簽署的備忘錄，沃爾瑪將在上海設立沃爾瑪電子商務中國區總部，全面負責沃爾瑪全球電子商務在中國市場的運營。沃爾瑪表示，將把傳統零售業和電子商務領域積累的先進經營管理經驗引入上海，并引進擁有國際化背景和豐富行業經驗的電子商務高端人才。

海爾電器全面收編日日順

海爾電器公告稱，于6月24日以2.4億元的價格向控股股東海爾集團收購青島日日順電器服務公司全部股權，青島日日順電器服務公司主要業務是為在國內分銷的家電產品提供售后服務及增值客戶服務。而海爾集團還為青島日日順電器服務公司提供了盈利保證，從2011年1月30日起至2012年12月21日期間，凈利潤將不少于6000萬元。

海爾電器董事會主席楊綿綿表示，三四級市場渠道綜合服務業務已成為公司業務新的增長動力，收購青島日日順電器服務公司可以讓公司現有的渠道網絡向“非海爾”品牌產品提供售后服務。“未來公司將成為在中國家電分銷領域舉足輕重的渠道綜合服務提供商。”楊綿綿說。事實上，基于這一目標和海爾集團內部整合的需要，海爾電器全面收編日日順渠道平臺的步伐正在加快。

2010年8月底，海爾電器斥資7.63億元收購了青島海爾物流有限公司。12月底，以1880萬元收購煙臺日日順51％控股權，同時與山東合資伙伴出資2000萬設立山東日日順電器有限公司。2011年4月底起，分別收購了合肥日日順，蘇州日日順和湖南日日順各51％的控股權。一系列收購讓海爾電器基本完成銷售網，物流網和服務網在資本層面的整合。

海爾電器2010年財報顯示，綜合渠道業務收入占其總收入比重已從2009年的13.33％，迅速上升至79％；在縣級市場的零售終端店面數量已近7000家，在鄉鎮級市場也有2.8萬個銷售點。海爾電器有關人士表示，除新疆，青海等一些偏遠的縣鎮沒有布點外，全國其他省份的三，四級市場都已布局完畢。其中，山東，河南，四川，安徽等省份布點相對密集。

海爾電器在三四級市場渠道綜合服務的商業模式是，通過網頁，電話，電郵等虛擬網絡，借助公司的物流和配送體系，向三四級市場廣大分銷伙伴提供訂單規劃，存貨管理，物流，售后等增值服務，推行“零庫存下的即需即供”運營模式，并利用此渠道綜合服務模式吸引“非海爾”品牌。

卓越亞馬遜推出“我要開店”和“卓越亞馬遜物流”服務

7月6日，卓越亞馬遜對外宣布開放第三方賣家平臺，推出“我要開店”和“卓越亞馬遜物流”服務。旨在為消費者帶來更多的選品和更有競爭力的價格，并以全方位的服務幫助廣大賣家進一步開拓自身業務。“我要開店”平臺面向所有賣家實行先期“零投入”的政策，即無加入費，無年費，無平臺使用費。目前，真正制約中小型電子商務企業發展的是倉儲和物流。“卓越亞馬遜物流”正好為賣家提供倉儲物流服務，覆蓋范圍廣闊的貨到付款服務及多種付款方式，并由24小時不間斷服務的客服中心幫助賣家完成退，換貨等售后服務。

至此，卓越亞馬遜給賣家提供了一個360。全方位平臺。通過運用與亞馬遜全球同步的強大技術功能，賣家可以簡單便捷地在卓越亞馬遜上陳列商品。此外，第三方賣家除可以在該平臺上開店銷售產品，還可享受到“卓越亞馬遜物流”服務，即由卓越亞馬遜按照自身物流服務的高標準提供的倉儲，發貨，配送和售后服務。

作為全球性電子商務網站，亞馬遜在中國，美國，法國，日席等都有運營的網站，加入卓越亞馬遜的第三方賣家未來也可以有機會在亞馬遜其他國家的網站上銷售產品，這可以幫助中國賣家建立面向全球的業務。未來，借助卓越亞馬遜全球平臺，中國的賣家可以有機會走向國際，這是“我要開店”平臺與其他中國電子商務第三方平臺的最大的不同之處。“我要開店”和“亞馬遜物流”已在亞馬遜全球成功運營多年，一直是推進亞馬遜業務增長的強大動力。目前，來自全球第三方賣家的商品在亞馬遜公司所銷售商品總量中的占比已超過30％。

家電下鄉政策或將退出

按照國務院原定的實施方案，山東，河南，四川，青島三省一市首批試點地區的家電下鄉政策將在今年11月到期，其他地區也將于2012年11月到期，隨著截止日期越來越近，國家相關主管部委并無政策將延續的明確表態。而此前家電節能惠民政策也是如此這般徹底退出。家電下鄉政策自2008年初出臺以來，對國民經濟拉動的作用十分明顯，隨著政策的不斷推進，銷售金額連連攀高，但今年4、5月卻連續兩月出現大幅下滑。

統計數據顯示，今年一季度家電下鄉銷售數據沖高；尤其是3月份數據創歷史新

高，商務部4月11日數據，3月份全國家電下鄉產品共銷售1471.5萬臺，同比增長135.36％；實現銷售額344.8億元，同比增長178.06％。但4月，四部委發文加強對家電下鄉進行政策監管后，下鄉銷售數據急轉直下。商務部公布4月份全國共銷售家電下鄉產品328.8萬臺，同比下降31％；實現銷售額87.2億元，同比下降12％，銷售量和銷售額均出現大幅度下滑，數據再次跳躍性波動。5月數據顯示，2011年5月全國家電下鄉產品共銷售578萬臺，同比僅增長0.90％，家電下鄉政策的對市場的刺激作用呈現出遞減拐點跡象。

下鄉政策實施以來，三四級農村市場獲得高速增長，但隨著政策的減弱乃至退出，三四級市場增速將隨之放緩，如何去保證這些投入大，數量多的新網店的單店效率并提升其收益和價值，也將考驗企業的經營智慧。

洗碗機6A檢測　掀起廚房新革命

日前由中國家用電器研究院主辦，中國家用電器研究院產業經濟與技術經濟研究所，國家家用電器質量監督檢驗中心承辦的“廚房新勢力　悅享凈生活”，2011年洗碗機6A檢測結果會，在北京貴都大酒店召開。

繼洗衣機6A、洗干一體機6A檢測標準相繼公布后，中國家用電器研究院于今年3月底，再次了清潔器具又一“6A檢測標準”，即JDYB007-2011《家用和類似用途洗碗機性能分等分級》技術規范(以下簡稱“洗碗機6A”標準)。

標準后，國家家用電器質量監督檢驗中心便積極地展開了洗碗機6A檢測工作，格蘭仕、松下、西門子，美的等國內主流洗碗機生產企業相繼送來樣機檢測。此次活動現場，多位行業專家都站在各自領域的角度，全面剖析了洗碗機行業的發展前景。作為此次洗碗機6A檢測工作的總負責人，國家家用電器質量監督檢驗中心綜合檢驗部主任魯建國表示，長期以來，阻礙著國內洗碗機市場發展的主要因素之―便是國內消費者的觀念以及對洗碗機的誤解，而此次6A標識貼上產品后，更為消費者合理選購洗碗機提供了科學依據。隨著70后，80后逐漸成為社會主流消費群體，新興的消費理念和消費模式正在逐步成為主流模式。另外，國內外主流企業的市場策略也直接影響著洗碗機在國內的推廣步伐。國家信息中心市場信息處處長蔡瑩指出，洗碗機發展目前正呈現出越來越快的增長趨勢。去年全年，國內重點城市洗碗機銷售量約為12萬臺，同期增長了21.1％。去年，國內重點城市洗碗機銷售額約為6.05億元，與09年相比，銷售額同比增長30.2％，高于銷售量增幅，中高端產品作用相對突出。從歷史數據看，國內重點城市洗碗機銷售量年度比增長保持了逐年上升的趨勢。在洗碗機的區域分布方面，地區之間消費能力差異巨大，華東，華北占整體銷售量比例達到81.38％，呈現初級消費特征。目前，連鎖專賣渠道成為重點品牌倚賴的重要銷售渠道，三四級城市市場拓展工作尚未有效開展。北京國美總經理宋林林也從市場的角度，表達了對洗碗機未來在國內發展前景的信心目前，在北京國美銷售的洗碗機產品包括海爾，西門子，美的等多個品牌的十幾個型號的產品。這些產品的價格從3000多元至8000多元不等，可以滿足不同消費者多種層次的需求。

(記者　馮國忠)

編讀往來

河北蘇立：我們是一個小家電品牌的區域商。前段時間，因為給某個淘寶店供貨，我們公司受到了廠家10萬元的罰款，停止供貨3個月的處罰。受各方面影響，今年的市場非常低迷，不但平常的節假日商場沒人，就連五一這樣的重大節日，賣場的銷售也都非常慘淡。我們認為，這與小家電產品在網絡上銷售的火爆有一定的關系。所以，傳統渠道商面臨的是多重壓力，一方面賣場銷售業績下滑，各種費用卻在大幅度地上漲；另一方面，廠家對我們的業績卻每年都在持續增長，還要面對網店的沖擊。令我們不解的是，現在即使我們這樣的傳統渠道商想去做電子商務，廠家都不允許。所以我們很困惑，傳統渠道商如何獲得長足的發展。

編者：接到蘇立電話的當時，我還真的非常同情他，畢竟罰款10萬元，是真金白銀的要腰包。而且停止供貨3個月的損失，肯定對其年度的業績有較大的影響。但是靜下來想，其實，客觀地說，廠家這樣做是正確的。傳統渠道商一直都在糾結網店對于他們的沖擊，但是背地里卻又給沒有授權的網店違規供貨。盡管這是為了業績“不得已而為之”，但從廠家管理的角度，規范市場也需要“揮淚斬馬謖”。如果不重罰違規竄貨的商家，網絡銷售更是會亂的一塌糊涂。

蘇立說的另一個問題，即廠家不讓傳統渠道商經營網店的問題，我認為，這正是規范網絡銷售的重要手段之一。畢竟傳統渠道商與專業的網商在做網絡經營的水平上還是有很大差距的。從廠家的角度看，為了獲得快速的增長，廠家也會授權專業的網商運作線上的銷售工作。因為，線上的競爭同樣激烈，容不得半點喘息。

無論是傳統渠道商還是網絡經銷商，都是廠家渠道的組成部分，短時間內誰也不能取代誰。所以，我希望，為了品牌的長遠發展，商有責任和義務協助廠家規范線上線下的渠道管理工作。

上海質檢抽查電飯鍋產品質量穩定

2011年，上海市質量技術監督局對上海市生產和銷售的電飯鍋產品質量進行了專項監督抽查。電飯鍋是列入國家強制性認證產品(CCC)目錄的產品。截止3月底，上海市有效獲證生產企業共6家，本次抽查上海市生產企業6家，實際抽到產品的有5家，另有1家企業由于停產等原因未抽到樣品。

本次抽查了33批次產品，經檢驗，不合格的為0批次。在這33批次產品中，上海市生產的產品7批次，其他省市生產的產品26批次。

篇9

首日里來到我實習所在的渝北區人民法院，畢竟xx年完工的建筑，這樣也頗覺新鮮的。它的地理方位離空港不遠，每日不經意便可見飛機起降。既為新區,雖少了幾分城區生活之便利,然多了份綠意清新,兼有早午自費院餐之營養供應，于是每日工作狀態也自然顯得精神飽滿。這樣除卻早晚擠車上班之煩擾，余者也還算愜意了，故而每日工作心情也相應愉悅許多。我被安排在了五樓的行政庭，歐式風格的建筑里面的辦公室也是一式的現代氣息，惟新樓未及聯寬帶網稍顯美中不足。

許多事在第一次的感覺往往是最深刻而令你最難忘的。第一天及第一周上班的感受于我也大抵如此。對于自己的評價是一個字“拙”，而對于所從事的工作印象是兩個字“新鮮”。盡管實務與原來對法院工作的印象出入不大,但每當具體操作一些書記員所做的日常瑣屑工作時,還是頗覺有幾分新奇的，同時暴露了我在實際動手能力方面的嚴重欠缺。這些事務如打印、復印、蓋章、登記新案、整理案卷及填寫送達回證等，乍看來如和尚撞鐘般的輕松且不入眼，而初來新手的生疏體驗于我印象還是深刻的，如第一次接觸自動釘書機，那份新鮮快意還是如孩童般的。而生活不能只有坦途，經歷亦非皆屬快意的，其中令人尷尬的不堪回顧的亦不屬少數，如第一次打印判決書那次。先此之前打印文稿多采單面，所以以為這份判決書的打印亦屬之。于是就同樣采用了單面印刷，彼時的情形是打印1份復印15份而每份是7張紙，所幸那里的打印員中途發現及時，才不致更大的損失，但這樣浪費的紙張，業已使崇尚環保的我當慮及其紙張所耗之林木時，頗感罪孽深重的。汲取教訓，總結經驗后的我在后來的工作愈加地覺得輕車熟路起來，或許不破不立的道理就在此間吧。

不知覺卻入了這實習過半的日子，渝地的秋有幾分“余夏”的味道，天氣依舊悶悶的，讓人透不過氣來，不經意間，知了此時也卻不知趣地伴著聒耳起來，甚或有些心慌。所幸的是，原來的對于前陣子的熱可能要撐到10月的種種顧慮，連同這熱的本身，卻不期被新近的雨時斷時續地沖散開去了。無疑，彼時的天是灰灰的，間或地時時淋些雨下來。于尋常人所感則似應痛楚傷感呵。而于熱悶中掙扎的我而言，卻是如海水湛藍般的清新感受。既然天遂人意，實習工作若不加倍用心，精心著意于它，似乎就有仵這好韶光了。持著這樣的念頭，做起工作來自然也利落了許多。論及工作，新近的亦無甚新奇，除了先前業已述及的例行諸項文案工作，余下新增的項目便是填了些附上送達回證的掛號信及做了移送上訴函登記。

臨到終了時候，憶著實習兩個月間的日子，倍覺充實許多，收獲頗豐。

二、實習所得

實習中所得有可分為兩方面：一為法內的，一為法外的。

法內的所得，即法的實踐中所習得的生活中的法律適用。總體上本人在實習中所做的工作性質是書記員的輔助工作。具體而言，有登記立案、填庭前準備的送達回證(內含給原告的合議庭通知書、傳票(2份)、舉證通知書，給被告的應訴通知書(2份)、舉證通知書、權利義務告知書、傳票(2份)、法定代表身份證明、起訴狀副本，給第三人的參加訴訟通知書(2份)、舉證通知書權利義務告知書、傳票(2份)、法定代表人證明、起訴狀副本)、到二樓接待中心或到一樓送達處給當事人送達回證(含開庭前準備和宣判后兩類)、粘判決書并給之加蓋騎縫章和與原件核對無異章、給判決書或裁定書到七樓蓋院章、裝訂案卷存檔及編卷宗目錄、登記所結案件在冊、到研究室送交上訴或移送管轄案件、復印打印各類文書等事項。以上事務中內括需2份的，皆意為其中一份需要備案。

篇10

關于保證期間，目前一種定義為：保證人與債權人約定的或法律規定的，當債務人不履行債務時，保證人對債務人之債務承擔保證責任的期間。本人認為此種定義不妥1） 依該定義保證人都是在保證期間承擔保證責任的，但其無法對實踐中保證人基于法院的判決而最終承擔保證責任的時間都是在保證期間之后的這樣一個事實作出解釋，也無法將這樣一種事實包含于其定義之中。2） 此定義沒有說明保證人在保證期間內是怎樣承擔其保證責任的，是在債務人不履行債務的情況下保證人主動去向債權人履行保證責任呢還是在債權人要求下才承擔保證責任呢，依此定義不管是主動履行也好還是被債權人要求履行保證責任也好，似乎保證人都必須在此期間將其保證責任履行完畢，但實踐中保證人會以種種事由拒絕承擔保證責任，直至債權人起訴至法院判決其最終承擔保證責任為止。這樣的話，有沒有該定義下的保證期間，都不能杜絕保證人對保證責任的拒絕承擔，那么此定義下的保證期間又有何作用呢？這都是對保證期間概念及性質的誤解所帶來的困擾。因此這樣一種定義僅僅是保證期間的字面含義，不能準確說明保證期間的特定含義特征及作用。

（一） 保證期間的概念

人們在給一個概念下定義的時候總是先入為主，按照自己的理解想當然地給其下定義，然后根據定義推出其特點，進而又給其定性，殊不知在其給概念下定義的時候已經將概念限定在其主觀范圍之內，當然不能全面而準確地給概念下定義。本人的做法是先從不同角度分析所要定義的概念的特點，然后綜合這些特點進行抽象提煉最后得出該概念的定義，分析過程如下：

1）要理解保證期間的特點，離不開對保證的準確理解，《擔保法》第6條規定：“本法所稱保證，是指保證人和債權人約定，當債務人不履行債務時，保證人按照約定履行債務或者承擔責任的行為。”該條中的“按照約定”，當然也包括按約定的保證期間。

由《擔保法》第6條可以推出保證期間的兩個特點：一個特點是保證期間是保證人與債權人約定的，而不是保證人與債務人約定的，明確此點的意義在于債權人對其能向保證人提出承擔保證責任請求的時間范圍是明知的，既然是明知，那么過了該期間而不提出請求的，唯一合理的推定就是棄權。當然，在對擔保期間未約定或約定不明的情況下，也有《擔保法》規定的法定保證期間。另一個特點是只有在債務人不履行債務的前提下，保證人才有在保證期間履行債務或者承擔責任的可能。明確這點的意義在于：保證期間內，保證人承擔保證責任并不具有必然性，保證期間內其承擔保證責任的前提條件之一是債務人不履行債務，只有在這時保證人才有承擔保證責任的可能。

按《擔保法》第18條規定：連帶責任保證的主債務人在主合同規定的債務履行期屆滿沒有履行債務的，債權人可以要求債務人履行債務，也可以要求保證人在其保證范圍內承擔保證責任。由此規定可以看出，即使在債務人不履行債務的情況下，保證人在保證期間內也并不是必然承擔保證責任，是否要求保證人承擔保證責任債權人有選擇權，這里的選擇權并不是說擇一的選擇權，即并非選擇了要求債務人履行債務就不能再要求保證人承擔保證責任了，這里的選擇權是說當債務人不履行債務時，債權人可能基于某種理由先要求債務人履行債務，而不是必然或立即向保證人主張權利，只有在明確知道債務人不能履行或拒不履行時再要求保證人承擔保證責任，也就是說保證人在保證期間承擔保證責任的可能性不僅取決于債務人是否履行了債務，而且還取決于保證期間內債權人是否向其提出了承擔保證責任的請求。而在一般保證的情況下，基于保證人的先訴抗辯權的存在，保證人在保證期間承擔保證責任的可能性取決于債務人不履行債務以及債權人是否在保證期間內向債務人提起訴訟或申請仲裁。

2）從《擔保法》第25、第26條來看保證期間的特點。《擔保法》第25條規定，在一般保證的情況下，在合同約定的保證期間和法律規定的保證期間，債權人未對債務人提起訴訟或者申請仲裁的，保證人免除保證責任。第26條規定，在合同約定的保證期間和法律規定的保證期間，債權人未要求保證人承擔保證責任的，保證人免除保證責任。從這兩條我們可以看出，保證期間內，債權人不作出一定的行為，即在一般保證情況下債權人不對債務人起訴或申請仲裁，在連帶保證中債權人未要求保證人承擔保證責任的，期間屆滿后將直接導致其喪失向保證人主張保證責任的權利。因此保證期間是這樣一種期間，對債權人來說，是其必須在該期間內做出一定行為的期間，不作為的話，期間屆滿將導致其喪失請求保證人承擔保證責任的權利；而對保證人來說，是其需等待債權人作出一定行為的期間，一旦債權人做出該行為，保證人不得借保證期間來主張免除責任。

3）從保證人約定保證期間的目的來看保證期間。保證屬于人的擔保，與抵押等物的擔保不同，物的擔保產生的擔保權往往都具有物權的性質，當債務人不履行債務時，債權人都會直接對擔保物行使擔保物權，以擔保物折價或拍賣變賣所得價款優先受償，清償完畢后，擔保人一般都能很快從擔保責任中解脫出來，可以說對物的擔保約定擔保期間意義及作用不大。而保證則不同，其是以保證人的信用為保證的，債務人不履行債務，債權人對保證人不能直接就其財產拍賣變賣所得價款受償，仍得請求保證人去履行債務或承擔責任，債權人對保證人的權利仍為債權屬性。基于債權不如物權實現的便利，一般情況下，債務人不履行債務時，如果債務人資金實力雄厚或是債務人另外還提供了物的擔保，債權人一般都會首先向債務人主張權利或對擔保物行使其擔保物權。這樣一來，保證人對其是否會被要求承擔保證責任以及何時（尤其是介入了債權人對債務人訴訟的因素）會被要求承擔保證責任都是十分不明確的，這也必將導致保證人不能斷定其何時能從其保證責任中解脫出來，保證人時刻都有被債權人要求承擔保證責任的可能，這樣對保證人是不公平的，因為保證人不能確定何時能從保證責任中脫離出來就不能對其自身的經濟活動作出合理的安排，畢竟有項保證債務尚未確定。例如，債權人基于債務人實力雄厚以及長期合作關系而在債務人不履行債務時將主要精力放在與債務人的交涉上，經過長期交涉達不成債務履行協議的又開始進行訴訟，而訴訟又隨著各種法定事由中止或中斷，時間被無限期地延長，訴訟結束前，債權人發現有債務人財產狀況惡化等情況，且可能威脅其債權的實現，這時便反過頭來對保證人主張權利，而向保證人主張權利的時間可能離債務人不履行債務的時間已經相去甚遠，保證人處于相當被動的狀態，因為這段時間內保證人可能會有別的經濟活動安排或是有財產上的增減變化等情況，對長期未確定而又突然而至的債權人主張，保證人實在是有苦難言，對保證人來說是十分不公平的。

為避免自己隨時被要求承擔保證責任，也為督促債權人盡快向自己主張權利以便盡快從保證責任中解脫出來從而方便對今后經濟活動的安排，保證人通常會與債權人約定一個保證期間，在此期間內，債權人必須就是否要求保證人承擔保證人作出明確提示，逾期不提示的，保證人不再承擔保證責任。而對此保證期間，債權人也是明知的，既然是明知，為何不在此期間向保證人主張權利，唯一合理的推定就是其放棄了向保證人請求承擔保證責任的權利。這也解釋了為什么在對保證期間沒有約定或約定不明時法律所規定的保證期間僅僅為6個月，期間太長對保證人不利。

綜上所述，保證期間有如下幾個特點：1）保證期間是由保證人與債權人約定的或是在沒有約定或約定不明情況下由法律規定的；2）保證期間內保證人承擔保證責任不具有必然性；3）保證人可能在保證期間承擔保證責任基于兩個條件的成就：一是債務人不履行保證債務；二是債權人在保證期間內向保證人請求其承擔保證責任或是債權人對債務人提起訴訟或申請仲裁；4）保證期間的作用在于對債權人是否要求保證人承擔保證責任或是債權人是否對債務人提起訴訟或申請仲裁之事實狀態的確定，而并不必然導致保證人對其保證責任的最終承擔，即債權人是否有要求保證人承擔保證責任的行為或是否向債務人提起了訴訟或申請了仲裁是保證期間內所要確定的事實，而一旦確定，保證人以后就不能再以保證期間為由主張免除保證責任，而至于保證人是否會最終承擔保證責任以及承擔多大范圍內的保證責任則是保證合同訴訟時效范圍內所要解決的問題，與保證期間再也沒有關系了。

現在便可以對保證期間的概念做個比較準確的定義：保證期間就是保證人與債權人約定的或法律規定的一段期間，當債務人不履行債務時，債權人必須于該期間屆滿前向保證人提出承擔保證責任的請求（連帶保證情況下）或是向債務人提起訴訟或仲裁（一般保證情況下），該期間屆滿債權人仍未請求保證人承擔保證責任或對債務人提起訴訟或申請仲裁的，視為債權人放棄要求保證人承擔保證責任的權利，保證人之保證責任自該期間屆滿后免除；如在該期間屆滿前債權人向保證人提出了承擔保證責任的請求或是向債務人提起了訴訟或仲裁，那么保證人不能再以保證期間未由主張免除保證責任。

（二） 保證期間的性質

要弄清保證期間的性質，必須先澄清其與除斥期間、訴訟時效的關系

1）保證期間與除斥期間的聯系與區別。聯系：兩者都表現在一定的權利經過一定期間而未行使即歸消滅，二者都是不變期間。區別：1）保證期間既有約定的又有法定的，而除斥期間只有法定的。2）即使是法定保證期間，也與除斥期間有所不同：a.除斥期間一般適用于形成權，如追認權、撤消權等，其目的在于撤消已經成立的民事行為，或確認效力未定的民事行為。而保證期間適用的仍是請求權。B除斥期間屆滿而權利人未行使權利其后果是權利人實體權利的消滅，導致對已成立民事行為效力的認定而使權利人承擔民事義務，如享有合同撤消權的權利人在一年內不行使撤消權則原合同仍繼續有效并對其有約束力；或否定效力未定的民事行為，如相對人可以催告被人在一個月內對效力未定的合同予以追認，一個月內被人未追認的，被人不對人的行為承擔責任。而保證期間屆滿債權人未行使請求權或未對債務人提起訴訟或申請仲裁的，其后果是債權人喪失請求保證人承擔保證責任的權利，對保證人來說是保證責任的免除，而非對一定民事行為效力的肯定或否定。同樣都是除權，但除權的內容與法律后果卻是不同的，不能僅從實體權利的消滅的表面形式上去認定保證期間屬于除斥期間。

2）保證期間與訴訟時效的聯系與區別。聯系：兩者都表現為一定權利經過一定期間不行使即歸消滅，都適用于請求權。區別：A保證期間既有法定的也有約定的，而訴訟時效只有法定的，不能約定；B保證期間的債權人享有的請求權是針對保證人的請求權，而非針對法院的請求權；而訴訟時效中的債權人享有的請求權是針對法院的，是請求法院保護其權利的請求權。C保證期間屆滿而債權人未要求保證人承擔保證責任或未對債務人提起訴訟或申請仲裁的，債權人喪失請求保證人承擔保證責任的權利。而訴訟時效屆滿債權人未向法院請求保護其債權的，債權人喪失請求法院保護其債權的權利。D保證期間內債權人向保證人主張了權利時，保證合同的訴訟時效從主張權利之才開始起算。如果保證期間已過債權人仍未向保證人主張權利，則意味著債權人對其享有的要求保證人承擔保證責任的權利的放棄，也就不存在訴訟時效的問題。因此，保證期間對保證合同之訴訟時效具有直接的影響，二者是兩個完全不同的概念。

3）有種觀點認為，保證期間是這樣一種期間，即該期間屆滿的法律效果是導致保證責任向將來消滅，保證人不再對此后產生的任何債務承擔保證責任。也就是說保證期間屆滿解除了保證人的將來義務，保證人只需對已經確定發生的債務承擔保證責任。該觀點的核心意思有二：1）保證期間是保證人承諾只對該期間發生的債務承擔保證責任的期間；2）保證期間是從時間維度限定保證范圍。

本人認為此種觀點不妥，理由如下：1）將保證期間理解為保證人承諾只對該期間內發生的債務承擔保證責任的期間，似乎將保證期間理解為《擔保法》第14條的規定“就一定時期內連續發生的借款合同或者某項商品交易保證人可以與債權人在最高債權額限度內進行協商訂立保證合同”中的“一定時期”，然而《擔保法》第14條雖然規定了保證人可約定就一定時期內（即該觀點所認為的保證期間）債權人與債務人發生的債務承擔保證責任，但要滿足兩條限制條件，一是有最高債權額的限度，二是保證的對象必須是連續發生的借款合同或連續的某項商品交易，如果不滿足這兩個條件，保證人還是要就單個主合同分別訂立保證合同。而上述觀點把保證期間理解為保證人承諾只對該期間內發生的債務承擔保證責任的期間似乎是要超越《擔保法》第14條的規定，其后果可能會加重保證人責任，因為一沒有最高債權額的限制，保證人可能承擔天文數字的保證責任，二是沒有保證標的種類的限制，可能會導致保證人在一定時期內既承擔借款合同又承擔商品交易或是其他種類合同的保證責任。這都是混淆保證期間與保證范圍所帶來的不利后果 2）在沒有《擔保法》第14條的情況下，保證人與債權人一般只就單個合同約定保證責任并約定保證期間，按上述觀點，即使保證期間已過，保證人仍要就此合同承擔保證責任，那么訂立保證期間的意義何在，約不約定都會導致保證人對保證責任的承擔。該觀點有意把保證期間過后的債務排除在保證人保證責任之外，實在是沒有必要，因為保證期間是從屬于保證范圍的，是就保證范圍內的事項在一定時間內承擔保證責任，保證期間之后的債務勢必超出原保證范圍之外，當然不能要求保證人在保證期間內承擔保證責任，除非得到保證人的同意或另訂保證合同。3）此種觀點旨在限制保證人的保證范圍，但卻造成了保證期間與保證范圍的混亂，干涉了本不該由其干涉的保證范圍的職能。照該觀點，保證期間似乎有與保證范圍相同的功能，約定了保證期間就不必在約定保證范圍了，然而保證范圍是就保證人承擔的各種具體保證責任的明確，而保證期間是保證人就保證范圍內的各具體保證責任將在多長時間內承擔保證責任的明確，本質上還是依附于保證范圍以保證范圍為基礎的，這就是為什么一旦有新債務，非有保證人同意或另訂保證合同，保證人不對新生之債務承擔保證責任，因為新債明顯超出原保證范圍，既然超出原保證范圍，附屬于原保證范圍的保證期間又會起什么作用呢。從上可以看出，該觀點在解釋保證期間的性質時造成了與保證范圍的混亂，因此是不可取的。

4）通過對上述關系的澄清，我們已明確保證期間的性質既非除斥期間也非訴訟時效，更不是一種用于限制保證范圍的期間。其實在給保證期間下定義的過程中，我們就已經能夠看出保證期間在連帶保證情況下實為一種提示期間，即債權人必須在保證期間提示保證人去承擔保證責任（在一般保證下，對債務人提起訴訟或申請仲裁視為向保證人提示），如果逾期不提示的，則視為對保證債權的放棄，保證人免責。提示的法律效果并不會直接導致保證人對保證責任的最終承擔，而只是表明債權人未放棄其保證債權，對保證人來說其不得再以保證期間為由主張免除保證責任。這就是保證期間的性質。

在這里，有必要對上述“在一般保證下，對債務人提起訴訟或申請仲裁視為向保證人提示”進行解釋。保證期間是保證人與債權人約定的，按理說只有債權人在保證期間內向保證人主張保證責任才產生保證期間的法律效果，即明確債權人非放棄對保證人主張權利以及保證人不得再以保證期間為由主張免責。但在一般保證情況下，保證人享有先訴抗辯權，債權人未對債務人提起訴訟或申請仲裁的，債權人請求保證人承擔保證責任的，保證人可拒絕債權人的請求。為防對債務人的訴訟判決生效時間晚于保證期間而帶來保證人借超過保證期間主張免責，《擔保法》第25條第2款規定在合同約定的保證期間或法律規定的保證期間內，債權人未對債務人提起訴訟或者申請仲裁的，保證人免除保證責任，其反面意思是，如果債權人在保證期間內向債務人提起訴訟或申請仲裁的，保證人就不能再借口對債務人的訴訟判決生效時間晚于保證期間而拒絕承擔保證責任，其效果與債權人向保證人主張權利是一樣的，因此本人將向債務人提起訴訟或申請仲裁視為向保證人提示，而這僅僅是視為。關于這點在后面對《擔保法》第25條之評析中會有詳細論述。

（三）需要澄清的幾個問題

1）保證期間應該是可變期間還是不變期間。依據《擔保法》第25條規定：債權人已提起訴訟或者申請仲裁的，保證期間適用訴訟時效中斷的規定。該法條看將保證期間當作可變期間。而依據《擔保法解釋》第31條規定：保證期間不因任何事由發生中斷、中止、延長的法律后果。該解釋已明確表明保證期間無論是一般保證還是連帶保證，無論是法定保證期間還是約定保證期間，都不因任何事由而中斷、中止、延長，對《擔保法》第25條關于保證期間適用時效中斷進行了徹底的否定。本人認為《擔保法解釋》較正確地理解了保證期間的性質。理由如下：1）保證期間是債權人必須向債務人要求承擔保證責任或向債務人提起訴訟或申請仲裁的期間，大多數情況下由保證人與債權人約定，只有在少數沒有約定或約定不明確的情況下才由法律規定保證期間的長短。保證期間在約定的情況下充分體現了當事人的訂約自由，保證期間的長短完全是保證人與債權人雙方自愿協商的結果，一旦約定，非經保證人與債權人協商變更，當事人以外的任何人都無權去中斷、中止或延長約定的保證期間，法律也不應當去干涉當事人的這種訂約自由，并應充分尊重當事人的在保證合同中對保證期間的約定，不得任意規定保證期間可因法定事由而去中止、中斷或延長。2）即使是由法律所規定的保證期間也僅僅是在當事人對保證期間沒有約定或約定不明的情況下才予以適用，實為一種補充救濟方式，以避免在對保證期間無約定或約定不明的情況下保證人承擔無限期或期限不明之保證責任。我們不能因為法律所規定的保證期間沒有干涉當事人之間的定約自由就認為法律所規定的保證期間可以中斷中止或延長，因為法律規定保證期間的宗旨就是為了保護保證人的利益，既然都是為了保護保證人利益，為何在規定一個較短的保證期間之后又規定該期間可因某種事由而中止、中斷和延長進而加重保證人責任呢，這不是自相矛盾嗎，因此即使是法律規定的保證期間也不能認為是可變期間。3）將保證期間視為不變期間也符合保證期間的性質，前已論述保證期間實為一種提示期間，而提示的法律效果如前所述只是確定債權人是否放棄對保證人主張權利這一事實以及保證人不得再以保證期間為由主張免責，而并不產生保證人對保證責任最終承擔的法律效果，既然該期間只是為了確定一種事實狀態以及去除一項免責事由，而非確定保證責任的最終承擔，那么何以要去中止中斷或延長該期間呢。綜上所述，保證期間應為不變期間而非可變期間。

2）對《擔保法》第25條之澄清。《擔保法》第25條規定：“一般保證情況下債權人在合同約定的保證期間或法律規定的保證期間內對債務人提起訴訟或者申請仲裁的，保證期間適用訴訟時效中斷的規定”。對該規定如何理解？a.這首先需要探求該條立法的本意。我們都知道在一般保證情況下，債權人在債務履行期屆滿后而未對債務人提起訴訟或申請仲裁便直接要求保證人承擔責任的，保證人可以拒絕，保證人只對債務人被起訴后并被強制執行其財產后仍不能清償的債權部分承擔保證責任，即保證人享有先訴抗辯權。問題在于如果在約定或法定的保證期間內，盡管債權人已經起訴債務人但就債務人不能清償的部分仍然不能在保證期間內確定的話，即判決生效時間發生在保證期間之后，則必然導致債權人在保證期間內不能要求保證人承擔保證責任，其結果是保證期間屆滿保證人免責，這樣對債權人的來說是十分不公平的，因為其畢竟已經在積極主張其債權了，只是因為訴訟的關系導致其不能在保證期間內確定債務人不能清償的債權部分，并由此而不能要求保證人承擔保證責任。可能是基于此種顧慮，《擔保法》第25條第二款才規定在一般保證情況下，債權人已提起訴訟或申請仲裁的，保證期間適用訴訟時效中斷的規定。b .但這又會帶來新的問題。例如：一份合同的履行期限為10月1日，保證人的保證期間到10月15日，由于是一般保證，當履行期屆滿債務人不履行時，基于保證人先訴抗辯權的存在，債權人必然對債務人提起訴訟，且其是在10月15日前即保證期間內提起訴訟的，按《擔保法》第25條第二款自提起訴訟時起，保證期間中斷，重新起算，依據其規定的保證期間適用訴訟時效中斷的規定，再結合《擔保法解釋》第34條規定：一般保證的債權人在保證期間屆滿前對債務人提起訴訟或者申請仲裁的，從判決或者仲裁裁決生效之日起，開始計算保證合同的訴訟時效，由此可以得出保證期間從對債務人的判決或者仲裁裁決生效之日起重新起算，比如判決是在11月1日生效的，那么保證期間應該從11月1日重新起算并延伸到11月15日，同時保證合同訴訟時效也從11月1日開始起算，這就導致保證期間與訴訟時效在11月1日至11月15日這段時間內重合。那么如果債權人于11月15日后才請求保證人承擔保證責任的，由于保證期間已過，根據《擔保法》第25條第二款，保證人免除保證責任，但此時仍在保證合同訴訟時效期間之內，似乎債權人仍可請求法院強制保證人承擔保證責任，但基于保證期間已過，法院不會去支持債權人的此項請求，就是說即使在保證期間中斷的情況下，債權人仍需在重新起算的保證期間內要求保證人承擔保證責任或對保證人直接起訴，債權人再一次受到保證期間的約束。

其實，《擔保法》第25條根本不必去規定保證期間去適用訴訟時效的中斷。該條已經規定了在合同約定的保證期間和法律規定的保證期間，債權人未對債務人提起訴訟或者申請仲裁的，保證人免除保證責任。反過來推，債權人在保證期間內對債務人提起訴訟或申請仲裁的，保證人就不能以保證期間為由主張免除保證責任，保證人保證責任的承擔從此不再與保證期間掛鉤，既然保證期間內債權人已經以向債務人提起訴訟或仲裁的行為明確了保證人不能再借保證期間來主張免責，那么何苦要去中斷保證期間，讓保證期間在訴訟判決生效時又重新起算進而又給保證人一次借保證期間去主張免責的機會呢，這不是作繭自縛嗎？因此在一般擔保下，保證期間適用訴訟時效的中斷是不合理的。

正是因為如此，《擔保法解釋》第31條規定：保證期間不因任何事由發生中斷、中止、延長的規定。第34條又規定：一般保證的債權人在保證期間屆滿前對債務人提起訴訟或者申請仲裁的，從判決或者仲裁裁決生效之日起，開始計算保證合同的訴訟時效。到這，不僅保證期間為不變期間已成定論，而且還在保證期間與保證合同的訴訟時效之間劃清了界限。依據《擔保法解釋》第34條規定，在一般保證情況下，只要債權人在保證期間屆滿之前對債務人提起訴訟或申請仲裁的，那么保證期間的使命即已完成，即使對債務人的判決生效之日已超過保證期間，仍不影響債權人于判決生效之日起請求保證人承擔保證責任，保證人不能借保證期間已過而主張免責，保證人是否最終承擔保證責任以及承擔多大范圍內的保證責任，將在對債務人的判決或者仲裁裁決之日后通過保證人主動履行或對保證人進行訴訟的方式確定。另外，依此規定，也驗證了本人在論及保證期間性質時的“將債權人向債務人提起訴訟或申請仲裁視為向保證人提示承擔保證責任”的觀點，因為該條已規定了只要債權人在保證期間內向債務人提起了訴訟或申請了仲裁，保證人就不能再借口保證期間已過來免除保證責任，這與連帶保證下債權人在保證期間只要向保證人請求承擔保證責任的，保證人就不得以保證期間已過而主張免除其保證責任的效果是一樣的。