生物藥劑與藥物動力學范文
時間：2023-11-09 17:53:12
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篇1
生物藥劑學與藥物動力學是藥學專業的主要專業課程之一，作者在教學過程中從二個方面進行了教學改革的嘗試:改革教學內容，以實例做模板闡述課本知識;改革教學方法，以PBL法結合LBL法進行理論教學。在進行PBL教學嘗試過程中，學生的參與積極性高，學生的準備情況各異，學生的綜合能力有所提高，取得了較好的教學效果。
關鍵詞:
生物藥劑學與藥物動力學;教學改革
生物藥劑學與藥物動力學是藥學類專業本科生的主要專業課程之一。生物藥劑學是研究藥物及其劑型在體內的吸收、分布、代謝與排泄過程，闡明藥物的劑型因素、機體生物因素和藥物治療之間相互關系的科學［1］。而藥物動力學是應用動力學原理和數學處理方法，定量地描述藥物通過各種途徑進入體內的吸收、分布、代謝、排泄過程的“量時”變化或“血藥濃度經時”變化的科學。生物藥劑學與藥物動力學是一門實踐性很強的課程，通過這門課的學習，要使學生具備合理設計制劑處方、科學評價藥物制劑質量、科學制訂給藥方案等方面的基本理論知識和實驗技能，為從事制劑研究和應用工作奠定基礎。
對于生物藥劑學與藥物動力學這種內容較多的藥學主干學科課程，目前國內的教學大多采用傳統的醫學教育模式，“以教師為主體，以講課為中心”，即通常所說的“lecture－basedlearing，LBL”(以授課為基礎的學習)。這種模式多是采取全程灌輸教學，學生始終處于消極被動地位。教學方法的改革主要是改變單一的以課堂講授為主的傳統教學方法，代之以行之有效的適合該門課程特點的各種教學法，使學生真正由被動接受知識變為主動探求知識。美國許多藥學院采取了以問題為基礎的學習(problem－basedlearning，PBL)，使授課過程能以學生為中心，激發學生自學，從而達到獨立、發揮個性的目的。
PBL對藥學學生自主學習、自我管理、獨立思考、專題討論和分析解決問題的能力培養均有促進作用。盡管我國高校的教學改革已進行了多年，但從總體上看，目前大學的教學過程并沒有真正擺脫傳統教育模式的影響［2］。生物藥劑學與藥物動力學是藥學類專業本科生的主要專業課程。因此，要想很好地掌握這門課程，不僅要求老師講課生動，而且學生也要充分發揮主觀能動性，使自己參與到教學中來。因此，結合生物藥劑學中“口服藥物的吸收”這一章的教學，作者嘗試進行教學改革，并總結了部分心得。
1從以下二個方面進行了教學改革的嘗試
1.1改革教學內容，以實例做模板闡述課本知識在強調基本原理和概念的前提下，結合老師自身的科研實踐情況，將相關的內容補充到教學過程中［3］。這樣，學生既掌握了經典的理論基礎，又可以將所學理論知識轉換到實踐科學中去。比如，“基因多態性與個體化給藥”章節中，作者將研究過的“CYP2D6基因多態性對藥物藥動學影響”案例給學生做一個概述，通過數據和圖片的了解，使學生更能清楚基因多態性的理論知識。這樣注重學用結合，大大吸引了學生的學習興趣，促進了教學質量的提高。同時要求老師有豐富的實踐和科研經驗，能夠將理論和實踐結合起來，在教學過程中引入更多的實踐和臨床實例及學科的前沿發展。對老師的自身修養提出了更高的要求，需要老師不斷的查閱文獻獲取新的信息、通過實驗和實踐將理論知識拓展到新的臺階。
1.2改革教學方法，以PBL法結合LBL法進行理論教學對于教材較為明確的概念、理論，采用LBL教學法。將概念講解透徹，按書本上的順序循序漸進，重點的內容詳細講，一般的知識概述講。比如，該章中藥物的吸收機制、影響藥物的吸收因素是理論基礎，需要講解清楚。而其中的劑型與制劑因素是藥劑學中詳細講解的內容，在這里就可以粗略的概述，學生通過閱讀能很快理解。如果老師仍然花很多的時間去講解這部分內容，學生會覺得枯燥無味。對于綜合性比較強的部分，采用PBL教學法。比如，該章中第三節“生物藥劑學分類系統與口服藥物制劑設計”，這是與實踐銜接緊密的部分，在講解完基本理論后，我們進行了一次PBL教學，題目是:×××藥物的劑型改進。給予學生一星期的時間去查閱資料、總結、以WORD文檔或PPT的形式發給老師。然后以自薦的形式推出2個同學上臺講解，講完后其他同學提出問題或互相討論。該章中第四節“口服藥物吸收的研究方法與技術”，這是實踐性很強的部分，光靠老師在講臺上講解，學生未必能理解，而關于這部分內容的文獻很多。因此，我們對這部分內容也進行了一次PBL教學，要求學生通過查閱整理文獻，詳細透徹了解一種口服藥物吸收的研究方法。并自薦1～2名同學上臺講解。
2在進行PBL教學嘗試過程中，作者有很多感觸
2.1學生的參與積極性高作者和學生交流了PBL教學思想后，大部分學生肯定了這種方式，學生也希望老師不要采用“填鴨式”的教學方式。老師在上面講，學生在下面聽的教學模式不能讓學生興奮起來。以致有很多學生不上課，或者上課的時候干自己的事情:看英語、玩手機等。第一次PBL教學嘗試的時候，只有個別的同學參與進來，他們認真準備，克服自己膽怯的心理大膽自薦上臺展示。在同學和老師的鼓勵下愉快的完成了自己的挑戰，之后，同學間的提問和互相討論，氣氛很輕松。第二次PBL教學嘗試的時候，同學們積極響應，熱情很高，讓作者覺得很欣慰。有幾個同學上臺后，由于過度緊張，展示好像進行不下去了，我們給予足夠的耐心和友好，終于順利完成。學生在獲得知識的同時，抓住機會鍛煉自己，提高各方面的能力才是大學生應該具備的。
2.2學生的準備情況各異在這次教學嘗試中，作者沒有硬性規定每個學生都必須去完成，因為作者認為只有在自愿的前提下才能看出教學改革的利弊和學生的主動性。有很多同學通過查閱文獻認真的準備了PPT，特別是自薦上臺展示的同學高度認真，完成得很好。內容上很有條理，PPT的制作很精致。也有少數同學沒有準備或應付式的準備，大段文字的拷貝，這讓我們看到傳統教學下的應試態度和學生心理。
2.3學生的綜合能力有所提高作者從教學改革嘗試中體會到，教學方法的改革帶來很多的好處。比如:(1)大大地促進學生動手查閱資料的能力:現在我們是網絡時代，隨時可以通過網絡去了解每一個學科的發展和動態。當給予我們的學生一個明確的目標去查詢的時候，就能引導他們對網絡的正確運用，而不只是運用網絡沉迷于游戲。(2)提高學生PPT制作水平:從上臺展示的學生PPT制作水平來看，有的學生的PPT有很多地方需要進行提高，如PPT頁面的布局，字體的大小和顏色的搭配，層次的整理，還有很多同學就是大段文字的拷貝讓觀眾覺得很啰嗦。在問題討論時，作者會給同學提出這些方面的不足，為學生的畢業答辯奠定基礎。(3)培養了學生的語言表達能力:在展示的同學中，有的同學講得很有老師范，條理清楚，大方得體，經詢問知道這樣的學生因為多次參加各種活動累積了經驗;而有的同學是頭一次登臺，展示過程中緊張得不能繼續了，經鼓勵和支持好不容易才熬到最后。作者認為，如果課堂上能經常給同學機會去展示，那么對于那些缺少鍛煉的同學是一次很好的提高。(4)增強了學生的自學能力:有的同學說，在準備過程中，會涉及到多門學科的綜合，比如藥劑學，藥物分析，臨床藥學等。當給學生布置一個明確的任務后，學生在查詢過程中會了解到相關的知識，擴大了學生的知識面。最終使學生從根本上掌握了相關教學內容，促進了教學質量的提高。
3展望
時下各個學校都在提出改革教學方法，將以老師為主的課堂轉換成以學生為中心的課堂。作者從實踐中也深刻體會到教學改革的必要性，“授之以魚不如授之以漁”。學生在大學過程中會接觸到很多學科的學習，如果能激發學生的學習主動性，那么他們的大學生活不會僅僅是機械地接受老師課堂所講，然后應付期末考試之后將知識拋之腦后;學生將根據自己的興趣和愛好，挖掘學科真正的內在，為以后的發展奠定堅實的基礎。
參考文獻
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篇2
關鍵詞：生物藥劑學與藥物動力學；課程改革；深入思考
中圖分類號：G642.0 文獻標志碼：A 文章編號：1674-9324（2013）18-0167-02
目前我國正處在改革與發展的關鍵時期，社會由于網絡技術十分發達，作為現代大學生對知識的了解和未來的規劃都有自己的打算，加之現代社會商業氛圍很濃，經濟發展較快，也增加了當代大學生的浮躁心理，因此跟大一、大二相比，大三和大四他們已不再特別關注學習、考試分數的高低及在班級的排名，大部分學生已缺乏學習激情，他們更關注前途和就業問題，而我們的許多專業課程主要都集中在大三和大四，因此如何提高他們學習積極性成了我們專業課老師的頭等大事。我校的辦學理念是“計量立校、標準立人、質量立業”，在計量、質量、檢測、標準等方面具有鮮明的辦學特色，因此我校藥學教育應在“定量藥學”、“標準藥學”等方面有所體現，將數學模型理念與藥學、生物學相融合，共同促進我校藥學科的發展，同時也豐富、完善和延伸我校的“質量、標準”辦學理念和特色。因此，作為“定量藥學”和“計量藥學”核心課程的《生物藥劑學與藥物動力學》，教學模式必須進行不斷改革與創新，增強學生學習的積極性，培養具有我校特色的藥學人才。《生物藥劑學與藥物動力學》是藥學專業一門非常重要的專業課，國內外藥學類專業一門必修課，該門課程在我校已開設5年。本門課程主要研究藥物及其劑型在體內的吸收、分布、代謝與排泄過程，闡明藥物的劑型因素、機體因素和藥物療效之間相互關系的科學。同時利用動力學的原理與數學處理方法，定量描述藥物通過各種途徑進入體內后體內作用過程的動態變化規律的科學，為新藥設計、藥物質量評價及指導臨床合理用藥提供了基本理論和基本方法。掌握本課程內容，將為進一步學習臨床藥代動力學及從事新劑型新制劑研發和臨床藥學工作打下堅實的理論基礎。傳統藥學主要是經驗藥學，大多主要研究藥物的活性，偏向于定性研究。隨著社會的進步，藥學的發展最終要走向定量藥學，以更加精確、量化的方式來研究和創制新藥。作為藥學專業的一門骨干課程，《生物藥劑學與藥物動力學》則主要是利用現代生物學和數學模型手段來開展外源化合物在生物體內動態變化過程，對藥物在機體內的過程進行“量化”，以此來定量評價藥物的生物學活性及制定安全、有效的給藥方案。對于生物藥劑學和藥物動力學的教學改革和探索，目前國內外相關高校和專業均進行了探索。國內有高校教師對近3-5年的藥學學生進行了問卷調查，結果發現大部分學生認為此門課程比較難學，且藥物動力學部分含有較多的高等數學公式，涉及公式推導、藥物動力學參數計算等內容，而這些內容又是大一所學內容，同時對于高等數學本身又是生物、醫藥類專業的薄弱環節，因此如何提高這部分內容的講解及讓學生迅速接受并將其應用于藥物動力學課程學習是藥物動力學部分的主要問題。因此為了對此門課程教學方法進行改革，有的高校采用優化教法、適當應用PBL教學法，同時采用EXCEL等軟件編輯了不同的藥物動力學參數處理程序，讓學生進行學習，收到很好效果。在國外的教學方面，北美和日本的藥學院非常重視調整和改革生物藥劑學與藥物動力學的教學內容。根據筆者近5年來對該課程的教學和相關科研工作，在本門課程教學改革方面擬進行以下改革，以期獲得良好的教學效果。
1.理論教學體系的改革與創新。改變傳統純粹的教師在上面說，學生在下面聽的說教形式，鼓勵學生自主學習、探知能力，將其研究成果以論文的形式發表，增加學生的成就感。具體可以采用如下兩種方式：首先，應用EXEL軟件、SPSS等處理軟件，編輯體內藥物分析中標準曲線、回收率以及精密度的計算公式，同時編輯根據血藥濃度——時間數據計算藥物動力學參數的公式，并在課堂相關章節進行模擬演示。其次，在一些重要章節理論教學過程中，采用Seminar學術討論會的模式，讓學生利用所學文獻檢索知識，自己查找國內外與本課程緊密相關的重要期刊文獻，分組討論，并寫出讀書報告，以此培養學生的閱讀能力、探索能力及寫作能力，作為學生的平時成績。
2.實踐教學體系的改革與創新。首先，基于校級開放實驗項目、校課外科技活動、新苗人才計劃以及學科競賽等課外實踐活動，將其中比較成熟的實驗項目編入實驗指導書中，同時與藥物“毒物代謝動力學”緊密結合，編撰出一部特色的、多課程聯合的實驗指導教程。其次，以“產學研項目”和“科研項目”為基礎，構建緊密的實習基地，構建“互惠互利”的長期機制。最后，積極與當地省市食品藥品監督管理局、省藥師協會以及藥物不良反應監測中心等校外單位聯系，采取參觀、講座的形式，拓展學生的視野，明確學生將來就業方向。
3.教學方法和手段的改革。課堂教學方法和手段采用多媒體、新藥開發案例、分組討論、激勵法、強化訓練等教學手段和教學方法，關鍵是要解決制作高水平的多媒體課件、視頻網絡課件及真實的新藥篩選、安全性評價及相關“藥害”具體案例分析。
4.課程考核體系的改革。《生物藥劑學與藥物動力學》是一門理論與實踐性很強的課程，而且涉及到高等數學、藥理學、藥物分析學、藥物化學、藥劑學等多學科，因此除了在理論和實踐方面加強改革外，在考核部分也應建立相應的配套體系，以此來評價教學效果。改變傳統的卷面成績+實驗成績+平時成績的考核模式，增加平時成績的權重，將學生制作的小軟件、綜述、實驗設計、讀書報告等內容均作為其平時成績的一部分，激勵學生理論知識與實踐知識的有機結合。
《生物藥劑學與藥物動力學》在我校藥學專業開設已滿5年，五年來在每一屆學生的教學過程中，均對其教學內容、教學方法進行梳理和改進，并對相關課程改革進行了前期探索，收到了良好的效果，根據05-08屆藥學專業學生反饋信息的收集、整理，我校教師初步體會到了本課程在教學內容、教學方法以及考核方式上的共性問題，準備針對這些共性問題提出改進措施，為以后課程教學改革提供參考。因此，在對該門課程教學改革進行深入探索與思考基礎上，提出切實可行的改革措施和思路，并努力將改革思路付諸實施，為我校藥學專業發展提供教學思路。
參考文獻：
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項目資助：中國計量學院重點建設課程項目資助；中國計量學院研究生教改項目資助
篇3
摘要：本文以藥物制劑課程中的“生產維生素C安瓿注射液”工作任務為例，闡述行動導向教學的設計和實施過程。
關鍵詞 ：行動導向一體化教學完整工作過程藥物制劑
行動導向的教學策略是“完整行動”的工作過程，目的是讓學生通過工作和學習任務來獨立地獲取信息、制訂計劃、評估計劃。
一、課程設計理念
藥物制劑一體化課程的設計理念是以職業崗位標準為依據，以工作任務為構建學習情境，以理實一體化為教學環境，利用多媒體課件、視頻技術、現場教學等手段，采用行動導向教學法進行設計。
二、課程內容設計
藥物制劑工所面臨的典型工作任務是生產不同劑型藥物，為了使教材知識與工作實際進行無縫對接，按照能力本位的職業教育觀，將知識能力、技術能力、社會能力和方法能力作為培養目標，將藥劑學、制劑設備及GMP實施等課程進行整合，并開發出《藥物制劑一體化工作頁》。
三、教學組織與實施
以“生產500支（2ml/支）維生素C安瓿注射液”任務為例，把行動導向完整工作過程詮釋如下：資訊 （做什么？怎么做？ ）計劃 （該如何完成生產？在什么環境中生產？）決策 （計劃可行嗎？合理嗎？）實施 （注射用水的制備、安瓿的處理、配液、過濾、灌封、滅菌、檢漏、燈檢、包裝、質量監控操作及生產記錄的填寫、文件的歸檔等操作；各環節出現的問題及分析處理）檢查控制 （監控自產產品質量是否合格？ 生產記錄填寫是否正確？文件歸檔是否到位？）評價反饋 （總結、反饋、考核）。
具體教學組織如下。
1.教學準備
在教學環境的設計上，模擬藥廠的生產車間設置了不同制劑的實訓室，各實訓室配備有多媒體教學設備；給學生分好組，7～10名學生為一個學習小組，模擬成一個生產隊伍；在教學前準備GMP生產的各種文件，在每個崗位的墻上貼標準操作規程，讓學生在形象、仿真的環境中主動思考和探索。
2.情境描述、任務引入
在學習過程中，學生首先要獲得的是關于職業內容和工作環境的感性認識，進而獲得與工作崗位和工作過程相關的專業知識和技能，因此首先教師要通過真實的學習情境描述把學生帶入真實的工作環境中，激發起學生的學習興趣和熱情，然后下達生產任務，讓學生明確任務，從中樹立學習的責任。
3.獲取資訊——接到生產任務，解讀相關文件
學生獲取信息正確與否，關系到任務是否能完成。在這一環節中，教師要結合多種的教學方法進行教學，并提供技術資料（工藝規程、標準操作規程等文件）、網絡視頻、多媒體課件等資源，讓學生通過解讀相關生產文件、觀看視頻、瀏覽課件、討論、咨詢等途徑獲取生產的相關信息。
4.計劃生產——擬訂生產計劃方案
為學生設置好生產計劃方案表，從生產工序安排、崗位分工、操作流程、質量安全監控項目和監控點、原輔材料準備、生產設備和用具準備、生產環境要求等方面要求學生完成擬定。在此學習和工作過程中，學生主動從各種途徑獲取相關內容，然后派代表上臺報告本組所制訂的計劃方案，從而培養學生的自主學習能力、協助溝通和語言表達能力。
5.決策——計劃審定
在組內、組間討論決策方案的可行性、合理性，教師審核方案，最后確定重新修改方案或執行方案。
6.實施——生產
學生按照審核通過的生產方案進行生產操作，把注射用水的制備、安瓿的處理、領取稱量物料、配液、過濾、灌封、滅菌、檢漏、燈檢、包裝等崗位進行任務拆分，由個人完成各自任務后再相互交流，輪崗學習，鼓勵學生發揚“傳、幫、帶”的精神，共同完成任務。
7.檢查控制——產品質量監控檢查
對于本組生產出來的藥品進行質量監控，檢查是否存在問題。通過問題反饋，組內討論找出解決方案，教師可充當咨詢者、引導者、主持人，從而讓學生學會合作交流、溝通協助，提升他們分析和解決問題的能力。
8.評價反饋——評價產品質量、工作過程、工作態度等
完成任務后，各小組展示成果，派代表上臺講述，并提出需要改進的地方。評價階段采取過程評價與結果評價相結合，小組自評、小組互評和教師評價相結合的方式。如組間可以對pH值、裝量等項目進行質量評估，以此作為專業能力的考核；再如教師根據生產計劃方案對各組學生方法能力、社會能力做過程考核。
四、教學效果
篇4
[關鍵詞]生物藥劑學；藥物動力學；教學改革；對乙酰氨基酚；HPLC
生物藥劑學作為藥劑學的分支學科，有著很強的實踐性和綜合性，主要以藥動力學為研究工具和手段，研究藥物及制劑在體內的運動轉化過程，并著重厘清藥物因素、機體生物學因素與藥效間相互作用的科學。為準確評估藥物制劑質量、劑型開發、工藝改進、以及臨床合理用藥的指導提供科學依據，從而確保用藥的安全有效[1]。其研究思路、方法與結果影響著藥學工作者的科研思維和工作方法，對提高藥物研究與臨床用藥水平起到積極推動作用。近年來，隨著生物藥劑學學科的飛速發展以及與臨床藥學、新藥研究的高度融合，以及在國家大力扶持中醫藥事業的大背景下，對中藥學專業畢業生的能力要求上也有了新的變化，為滿足社會、科學發展需要，許多高校的中藥學等相關專業相繼開設《生物藥劑學與藥物動力學》課程，并日漸提升為中藥學專業的主干課程。近幾年，為適應大學生的發展和社會需求，我校修訂了中藥學專業培養方案，其中一項重要內容就是將生物藥劑學作為中藥學本科、碩士研究生的專業選修特色課程。雖然該課程從無到有，實現了零的突破，但是由于課時相對較少，尤其是在實驗課時安排上更顯窘迫，為了保證在有限的時間內更好地完成教學及實現實驗與理論相結合[2]，對實驗內容進行積極有效的改進，受到學校和學生的廣泛好評。現將實驗改進內容和結果歸納匯總如下：
1原實驗內容
原實驗內容參考林寧老師主編、由中國中醫藥出版社出版《生物藥劑學與藥物動力學》(2016年出版)中的“血藥濃度法測定口服給藥的藥動學參數與生物利用度”實驗項目[3]，其主要實驗內容如下：1.1標準曲線的制備分別取APAP標準品制備20、40、80、120、160、200g·L-1濃度的溶液10mL，精密取1mL、0.5mL空白家兔血漿后加0.12mol·L-1的氫氧化鋇溶液3.5mL于試管中，搖勻，放置2min，再加入2%硫酸鋅溶液3.5mL，加入純化水10mL，搖勻，離心機2500rpm離心10min，取上清液3.5~4mL，即為供試品；以純化水1mL加0.5mL空白家兔血漿混勻同上操作作為參比液，采用紫外分光光度儀于245nm處測定吸收度(Absorbance，A)，以APAP濃度對A為繪制標準曲線并求出回歸方程備用。1.2給藥與取樣家兔稱重。給藥前耳緣靜脈取空白血約2mL，而后家兔口服APAP片(0.5g)一片，約20mL水送服(或同服同劑量的溶液)，給藥后于0.25h、0.5h、1.0h、2h、3h、4h、5h、7h耳緣靜脈取血約2mL，置試管中。1.3血清中APAP的測定將所取血樣置37℃水浴保溫1h，取出，以3000rpm離心10min，取血清0.5mL，置10mL具塞刻度試管中，以下按“制備標準曲線”項下方法操作，并以按同步操作的空白血清樣品做參比，紫外分光光度儀λ=245nm處測定APAP含量，根據1.1獲得的標準曲線，計算血清中APAP的含量。1.4.數據處理應用殘數法求算APAP的藥動學參數。
2實驗改進
原實驗內容是評定藥物制劑生物利用度的經典方法，通過測定血藥濃度可獲得藥物在體內的瞬時數據，相較于尿藥檢測更為理想。且采用紫外分光光度法測定APAP含量，操作簡單、結果準確、專屬性也較強，廣泛應用于學生的實驗中。但是，由于學生的操作熟練程度不夠，血液樣品處理時常常有血樣中的蛋白處理不夠徹底，而干擾APAP含量測定的準確性；并且，采用氫氧化鋇和硫酸鋅去除蛋白的方法干擾因素較多，重現性較差，即使同一血液樣品，不同學生進行處理操作，所測得的吸收度也不同；再者，我校由于《生物藥劑學與藥物動力學》課程的實驗課時安排較少，為合理安排實驗項目，我們對APAP的測定方法包括紫外分光光度法[4]和HPLC[5-6]法進行文獻檢索、多因素比較衡量，通過預實驗，最終確定較為合理的給藥方法、血樣處理以及血樣中APAP的檢測方法，現匯總如下。2.1HPLC條件及方法學考察由生物藥劑學興趣小組完成。2.1.1色譜條件[7]色譜柱：ODSC18柱，460*250mm，5μm；流動相：甲醇-乙酸銨溶液(0.05mol·L-1)=10∶90；檢測波長：245nm；流速：1.0mL·min-1；進樣量：20μL。2.1.2溶液制備2.1.2.1APAP標準品溶液以流動相作溶劑配制APAP標準品儲備液1.0mg→10mL，取其0.50mL，流動相稀釋至10mL，混勻，過濾，得標準品溶液(APAP濃度：4.95μg·mL-1)。2.1.2.2樣品溶液家兔稱重，以劑量為100mg/kg灌胃給藥APAP，30min后自耳緣靜脈取血至肝素化試管中，3000rpm離心10min，取血漿0.20mL，加1.80mL流動相稀釋，混勻，0.22μm微孔濾膜過濾(下同)，作供試品溶液。2.1.2.3陰性對照溶液精密取純化水0.50mL，加空白血漿1.00mL，流動相稀釋至10mL，混勻，過濾，作為陰性對照溶液。2.1.3系統適用性考察分別取APAP標準品溶液、供試品溶液、陰性對照液，按照2.1.1色譜條件檢測，結果如圖1所示，儀器基線平穩，APAP的保留時間RT=18.389min，峰形尖銳，理論塔板數高于8000，樣品的分離度高，由家兔空白血漿制備的陰性對照溶液在該位置上無干擾峰，表明該方法可用于家兔給藥后APAP血藥濃度的測定。2.1.4標準曲線量取APAP標準品儲備液1.00mL稀釋20倍，過濾，分別進樣10、20、30、40、50μL，測定各進樣量的APAP峰面積，以峰面積(y)對濃度(x)進行線性回歸，制作標準曲線。得標準曲線方程y=66551.96x+236.5(r=0.9999)，線性范圍：2.475~12.375μg·mL-1。2.1.5精密度考察取2.1.2.1中的APAP標準品溶液，進行精密度考察。結果：APAP含量的標準誤RSD%為0.22%(n=5)，顯示該臺HPLC儀器良好的精密度。2.1.6重復性考察按照2.1.2.2供試品溶液制備方法平行操作，獲得5個供試品溶液，分別測定APAP含量，并計算其標準誤RSD%為0.46%(n=5)，顯示該檢測方法的重現性良好。2.1.7回收率考察按照2.1.2.2方法制備APAP供試品溶液15mL，分別精密量取該供試品2.5mL，以稀釋10倍的標準品儲備液補充APAP含量，使之分別相當于供試品標示量濃度的80%、100%、120%，定容至終體積為5mL；測定溶液中APAP含量，并計算各加樣回收率。結果如表1示，其回收率的均值為103.80%，RSD%=2.70%(n=9)，表明在此檢測條件下測定APAP含量的合理性、有效性。2.2家兔給藥方法、血漿取樣及樣品處理方法家兔(雌兔應未孕)稱重，灌胃給藥給對乙酰氨基酚片劑100mg/kg。分別于給藥前、給藥后10min、20min、30min、60min、90min、2h、3h、4h、5h、7h耳緣靜脈取血約0.8mL至肝素化EP管中。取樣期間，家兔自由進水進食。各血樣經3000rpm離心10min，取上層血漿按照上述供試品溶液處理和測定方法測定APAP的含量。2.3計算藥物動力學參數以及生物利用度取該實驗學生獲得的實驗數據，求算APAP血藥濃度，以血藥濃度的對數(lgC)與時間(t)作圖，得藥時曲線。應用殘數法求算APAP的藥動學參數，包括消除速度常數(k)、吸收速度常數(ka)、半衰期(t1/2)、表觀分布容積(V)以及峰濃度(Cmax)、達峰時間(Tmax)、藥時曲線下面積AUC和生物利用度F，結果如圖3。
3討論
生物藥劑學的實驗教學是理論教學的重要補充內容，注重培養學生的科學態度和動腦、動手能力，也是培養學生綜合素質的重要手段[8]。采用家兔血藥濃度法測定APAP血管外給藥的藥動學參數及生物利用度是中藥學專業《生物藥劑學與藥物動力學》以及碩士研究生《生物藥劑學與藥物臨床試驗》課程的主要實驗內容之一，對于學生理解掌握藥物在體內過程、藥動學參數意義以及在藥物臨床研究中的應用等方面有著非常重要的指導意義。在該實驗項目中，家兔的采血成功與否、血樣中干擾因素去除的徹底性以及血藥濃度檢測的準確性是實驗成功的關鍵因素。本文在參考相關教材、文獻的基礎上，綜合學校課程設置、實驗條件以及學生的操作水平，對家兔取血量、樣品的前處理、以及APAP的分析檢測方法進行改進：(1)在實驗前期，由該課程的興趣小組對APAP的HPLC檢測方法學進行摸索、確定。制作APAP的標準曲線，求算回歸方程及相關系數并對方法學進行考察；(2)體內血藥濃度測定實驗由全體同學參與，分組實施，實驗內容按照“2.家兔給藥方法、血漿取樣及樣品處理方法”進行取樣及處理；(3)求算藥物動力學參數以及生物利用度。通過實驗數據以及以往文獻資料顯示，APAP屬于單室模型藥物，各實驗組以血漿中APAP濃度的對數(lgC)與時間(t)作圖，得藥時曲線。實驗結果發現，給藥后2h、3h、4h、5h、7h的對數濃度與時間的線性關系顯著，表明灌胃給藥對乙酰氨基酚2h后即即進入消除相，并由該5個點獲得APAP的消除速度方程lgC=-0.174t+2.608(r=-0.990)，進而求得10min、20min、30min、1h的殘數濃度(Cr=C外推-C實際)，利用該4個點的對數殘數濃度對時間作圖，獲得回歸方程lgCr=-0.961t+2.655(r=-0.999)。利用以上數據及方程，求算APAP的藥動學參數，如圖3。改進后的實驗方法和以往實驗方法相比，其優點在于：(1)采血量減少。由于采血方式為耳緣靜脈采血，血流較慢，瞬時可取血量較小，而且，在本實驗中取血時間點設計比較密集，加之學生的操作水平不高，很難在規定時間點取出足量的血液供紫外分光光度法進行APAP的含量檢測，并且，由于多次采血，多個實驗組在2h以后幾乎無法繼續采血，導致實驗失敗。而改進后的實驗取血在0.8±0.2mL即可達到檢測要求，大大降低了取血難度，保證各時間點的順利采血，從而保證圓滿實驗。(2)血樣處理簡單化。家兔取血后離心取血漿，加流動相稀釋10倍，混勻，0.22μm微孔濾膜過濾，即可。大大簡化了血樣的去除蛋白等雜質的操作過程。(3)提高檢測結果的準確度。采用HPLC方法進行APAP的含量檢測，相對比于紫外分光光度法，測得的結果更加精確、穩定，專屬性更強(結果見圖1、表1)。(4)縮短實驗學時。由于給藥和血樣處理的簡單化，并直接采用HPLC的樣品檢測批處理操作，可明顯縮短實驗時間，更加貼合我校生物藥劑學的課程設置。在以后的實驗過程，擬對以下環節進行改進優化：(1)取樣時間的優化。在保證APAP消除速度方程準確求得的前提下，縮短消除相的采血時間；增加吸收相的采血點，使得吸收相的時間點更加密集，并在峰濃度時設置采血點，讓整個實驗更加貼近藥物在體內的實際過程。(2)加強學生的操作訓練。包括耳緣靜脈取血的技術技巧性、移液器使用的規范性、HPLC操作的正確性等方面進行指導、培訓，以滿足該實驗的操作準確性要求。(3)實現實驗屬性的轉型。如采用不同的給藥途徑(如肌注與口服)，對二者的藥動學參數、生物利用度對比；或者不同劑型間的藥動學參數、生物利用度進行對比，將此驗證性實驗逐步向研究型實驗過渡[9]，并準備在研究生課程中推進中藥有效成分的藥動學參數估算的探究性實驗。
4結論
篇5
【關鍵詞】 周期性血管外給藥; 藥物動力學參數; 圖像; 估算
利用數學模型確定藥物動力學參數，需要做繁雜的數值計算，這對于基層醫藥科研人員來說是一個不小的障礙。本文在分析模型參數幾何意義的基礎上，借助MATLAB的作圖功能，探求周期性血管外途徑給藥二室模型藥物動力學參數的估算。
1 周期性血管外給藥二室模型與藥物動力學參數的幾何關系
1.1 周期性血管外給藥二室模型及其參數
周期性血管外n 次給藥后，體內血藥濃度C(n)1與時間t的二室模型為：C(n)1(t)=A11-e-n·α·τ1-e-α·τe-α·τ+A21-e-n·β·τ1-e-β·τe-β·τ-(A1+A2)
1-e-n·Kα·τ1-e-Kα·τe-Kα·τ(1)模型(1)中的t 是從第n 次給藥后開始計算的時間(0≤t≤τ)，其它各系數的含義見文獻[1]。若讓模型(1)中的n 趨向無窮，得到周期性血管外給藥二室模型的坪濃度：Css(t)=A111-e-α·τe-α·τ+A211-e-β·τe-β·τ-(A1+A2)11-e-Kα·τe-Kα·τ(2)由模型(1)、(2)在一個周期τ內的平均值的比值得到達坪分數：fss(n)=1τ〖JF(D〗τ0C(n)1(t)dt〖JF)〗1τ〖JF(D〗τ0Css(t)dt〖JF)〗=A1α(1-e-n·α·τ)+A2β(1-e-n·β·τ)-+A2Ka(1-e-n·Ka·τ)A1α+A2β-A1+A2Ka(3)最低坪濃度Cmin 與第一次給藥末端濃度C1(τ) 的比是積累系數：R=A11-e-α·τ+A21-e-β·τ-A1+A21-e-Kα·τ
A1e-α·γ+A2e-β·τ-(A1+A2)e-Kα·τ(4)通常在已知周期性血管外給藥二室模型的情況下，根據上述各式和牛頓迭代法可以計算出坪濃度、維持劑量、達坪狀態時周期性給藥的次數等藥物動力學參數。
1.1 模型的曲線與藥物動力學參數間的幾何關聯
由于模型的函數為初等函數，故模型對應的曲線是連續、漸進變化的，不會出現間斷或劇烈波動的情況，從而為從圖形中估算參數的數值提供了條件。下面的幾個參數與模型的曲線有如下關聯：① 坪濃度Css 是(1)的曲線穩定變化時一個周期內血藥濃度與時間的對應關系。當給藥次數n較大時，(1)的曲線在一個周期內所對應部分近似為坪濃度(2)的曲線。② 最低坪水平Cmin 是(1)的曲線在達坪狀態一個周期內的最低點的縱坐標，即達坪狀態下一個周期內的最小值。③ 最高坪水平Cmax 是(1)的曲線在達坪狀態一個周期內的最高點的縱坐標，即達坪狀態下一個周期內的最大值。④ 峰時Tm0 是(1)的曲線在達坪狀態下一個周期內最高點與最低點的橫坐標的差(0 ⑤ 當周期性給藥劑量D0 一定時，改變給藥周期τ，通過(1)的曲線得到周期變化后的最高或最低坪濃度。反之，若給定安全濃度、有效坪濃度，由(2)的曲線可以估算出符合條件的給藥周期 。⑥ 由(3)的曲線上點的縱橫坐標可以獲得達坪分數fss(n) 與周期性血管外給藥次數n的對應關系，從而估算出期望血藥濃度與周期性給藥次數的數量對應。⑦ 積累系數R可由(1)的曲線在第一個周期末端的縱坐標與(1)的曲線在達坪狀態一個周期內的最低點的縱坐標(即最低坪水平Cmin )的比值計算出來。
2 周期性血管外給藥藥物動力學參數的圖形估算實例
口服四環素溶液500mg者進行血藥濃度測定，10人平均血藥濃度如下[1]：取樣時間t(hour)1234681224濃度C(mg/ml).05504.78464.90764.46293.72492.50351.0096若給藥周期為每日4次，由殘數法得到 n次給藥后藥時模型為：C(n)1(t)=1.93051·1-e-0.21849·n·τ1-e-0.21849·τe-0.21849·τ+6.20837·1-e-0.07568·n·τ1-e-0.07568·τe-0.07568·τ-8.13888·1-e-0.668·n·τ1-e-0.668·τe-0.668·τ(4)在MATLAB下畫出(4)和對應達坪分數fss(n) 的圖像，如圖1所示。圖1 藥時曲線，達坪分數周期性給藥次數曲線由圖1可見：① 第8次周期性給藥后血藥濃度近似處于達坪狀態，之后每個給藥周期內的圖像即為坪濃度Css與給藥時間的對應關系。② 最高坪水平Cmax=YA=1414(mg/ml) ，最低坪水平Cmin=YB=1135(mg/ml) ，峰時T0=xA-xB=1.97(h) 。③ 當給藥次數為4或10時，達坪分數分別為給藥fss(4)=YD=82.99% ，fss(10)=YE=98.89% 。④ 累積系數R=CminYC=11.354.315≈2.63036 。⑤ 當每日給藥次數改變為3次或2次，即給藥周期為8h或12h時，從圖2中的F，G，H，L點的縱坐標能夠得周期變化后的最高或最低坪濃度。圖3是在峰時T0=1.97(h) ，周期性給藥劑量D0不變的狀況下，安全濃度Cmax 和有效濃度Cmin 與變量τ的曲線，其函數表達式為：Cmax=1.93051·1-e-0.21849·T01-e-0.21849·τ+6.20837·1-e-0.07568·T01-e-0.07568·τ
-8.13888·1-e-0.668·T01-e-0.668·τ(5)Cmin=1.93051·11-e-0.21849·τ+6.20837·11-e-0.07568·τ-8.13888·11-e-0.668·τ(6)從圖3可以看出，若要求安全濃度Cmax=13.11(mg/ml) ，則給藥周期τ≥xM=6.559(h) ;若要求有效濃度Cmin=6(mg/ml) ，則給藥周期τ≥xN=9.678(h) 。圖2 8小時和12小時周期性給藥的‘藥時曲線’圖3 安全濃度Cmax和有效濃度Cmin與變動周期τ的曲線
3 結語
本研究探討了借助圖像估算周期性血管外給藥狀態下的藥物動力學參數，該方法有以下特點：① 由于MATLAB作圖快捷、方便，使得藥物動力學參數的估算簡潔，高效，回避了繁難的數學計算。便于基層臨床科研人員和醫藥院校師生借鑒與使用。② 鑒于MATLAB圖形界面中，按鈕Data Cursor僅能顯示到點的坐標的百分位，故此，估算參數會有不超過百分之一的誤差。不過通過圖形界面的圖形放大功能，能得到萬分之一精度的估算值。③ 本問題的處理方式可拓廣到其它給藥方式藥物動力學參數的估算上。
【參考文獻】
1 劉昌孝，劉定運.藥物動力學概論.北京：中國學術出版社，1984，157～169.
篇6
【關鍵詞】 梔子柏皮湯；配伍；藥代動力學
梔子柏皮湯源于《傷寒論》， 由梔子、黃柏和炙甘草三種中藥組成， 在身黃發熱癥、傷寒治療方面具有良好功效[1]。藥代動力學可用于研究不同配伍對藥物在體內的吸收、分布、代謝和排泄的影響， 從而明確發揮藥效的物質基礎[2]。本文就梔子柏皮湯不同配伍對梔子苷體內藥代動力學的影響進行研究。現報告如下。
1 材料與方法
1. 1 藥品與試劑 梔子苷對照品購自中國藥品生物制品檢定所， 批號：110749-200714；中藥梔子、黃柏和炙甘草購自桂平市人民醫院藥劑科；色譜純乙腈和甲醇購自美國Tedia公司；分析純冰乙酸購自國藥化學試劑有限公司。
1. 2 儀器 高效液相色譜儀Agilent 1200型（美國Ailent公司）；高速冷凍離心機Z32HK型（上海賀默儀器科技有限公司）；真空干燥箱DZF-6020MBE型（上海博訊實業有限公司）。
1. 3 動物 SD大鼠， 雌雄各15只， 230～250 g， 南方醫科大學動物實驗中心提供， 合格證號：0092481。
1. 4 方法
1. 4. 1 標準溶液配制 精確稱量1 mg梔子苷對照品， 甲醇溶解配制成0.1 g/L儲液， 倍比稀釋成0.5、1、2、4、8、16、20 mg/L的系列工作液。
1. 4. 2 湯劑制備及含量測定 按10∶6∶3比例稱取梔子、黃柏及炙甘草， 100℃蒸餾水煎煮3次， 20 min/次， 煎液合并過濾取上清， 濃縮后取100 μl上清液甲醇稀釋至1000倍， 混勻后離心取上清液， 0.22 μm濾膜過濾后HPLC分析測定梔子苷含量。梔子、梔子-黃柏及梔子-炙甘草的湯劑制備及梔子苷含量測定方法同上。
1. 4. 3 色譜條件 Agilent TC-C18色譜柱（4.6 mm×250 mm， 5 μm）；柱溫25℃；進樣量為10 μl；流動相為0.1%冰乙酸水溶液-甲醇；檢測波長為238 nm。
1. 4. 4 藥代動力學實驗 將30只SD大鼠隨機分為5組， 每組6只。雌雄各3只， 實驗前12 h禁食， 以40 mg/kg梔子苷的標準給予梔子苷單體、梔子、梔子-炙甘草、梔子-黃柏和梔子-黃柏-炙甘草灌胃， 于給藥后6、15、30、45 min及1、2、4、6、8、10 h進行眼眶取血， 肝素離心管離心取上清后凍存待測。
1. 4. 5 血漿樣品預處理 取200 μl血漿， 加600 μl乙腈混勻后離心取700 μl上清， 真空干燥后用100 μl的30%甲醇溶液進行復溶， 然后測定。
1. 5 統計學方法 采用3P97藥代動力學軟件進行血藥濃度-時間數據分析， 采用SPSS17.0統計學軟件進行統計分析， 計量資料以均數±標準差（ x-±s）表示， 采用t檢驗；計數資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗。P
2 結果
2. 1 線性范圍 取200 μl SD大鼠空白血漿， 加入梔子苷系列工作液， 分別配制成0.05、0.10、0.20、0.40、0.80、1.20、1.60及2.00 mg/L樣品進行測定， 以梔子苷峰面積為縱坐標， 以梔子苷濃度為橫坐標， 得到線性方程為Y=0.6926X+0.0248 （r=0.9997）， 線性范圍為0.06～2.00 mg/L。
2. 2 藥代動力學研究 5組SD大鼠分別灌胃含等量梔子苷的梔子苷單體溶液及梔子、梔子-炙甘草、梔子-黃柏、梔子-黃柏-炙甘草湯劑， 經血藥濃度-時間數據分析結果表明， 湯劑組AUT及T1/2顯著高于梔子苷單體組， 梔子-炙甘草、梔子-黃柏及梔子黃柏-炙甘草組T1/2、AUT0-t及AUT0-∞均顯著高于梔子組， 梔子-黃柏-炙甘草組AUT0-t、AUT0-∞、T1/2、Tmax及Cmax均高于其他組， 組間比較差異有統計學意義（P
3 討論
中藥配伍是中醫藥基本理論之一， 是中醫藥現代化研究的重要組成部分之一[3]。目前， 中藥方劑配伍的研究已經從組織器官、動物模型發展到了藥細胞， 甚至分子水平[4]。中藥藥代動力學在考察中藥體內分布、吸收、代謝和排泄方面具有重要作用[5]。本研究初步建立了利用HPLC研究梔子柏皮湯不同配伍對梔子苷體內藥代動力學影響的測定方法， 并利用此方法研究發現， 湯劑給藥比梔子苷單體給藥生物利用度高， 全組方給藥比其他配伍給藥生物利用度高， 從而說明， 梔子柏皮湯藥材間相互作用有助于促進梔子苷吸收， 從而提高藥物生物利用度。
參考文獻
[1] 張英豐， 董宇， 朱曉新. 中藥復方藥代動力學研究的方法與思考. 中國天然藥物， 2008， 6（5）：321-324.
[2] 韓靜文， 黃成， 宋玨， 等. 梔子柏皮湯不同配伍在大鼠體內的藥代動力學研究. 中國實驗方劑學雜志， 2014， 20（8）：110-113.
[3] 黃立華， 夏侯林， 王建安. 息香在大鼠體內的藥代動力學研究. 時珍國醫國藥， 2013， 24（4）：813-814.
[4] 張鵬， 楊秀偉. 紫花前胡苷在大鼠體內的藥代動力學研究. 中國藥理學通報， 2008， 24（9）：1240-1244.
篇7
目的：了解藥品說明書中兒童用藥內容的標注情況。方法：對我院門診西藥房常用的346種藥品的說明書中有關兒童用藥的標示情況進行調查分析。結果：準確標注兒童用藥占67.9%，標注兒童用藥“尚未明確”占15.3%，標注遵醫囑或用量酌減占14.5%，標注“兒童慎用”占2.3%。在準確給出兒童劑量的說明書中，劑量以年齡計算占23.1%，以體重計算占32.9%，以年齡和體重計算占21.6%，直接給出劑量占22.4%。結論：藥品說明書中還存在兒童用藥內容缺失的問題，需引起各方面重視，加強管理，不斷完善。
【關鍵詞】 藥品說明書 兒童 規范
［Abstract］ Objective:To learn the contents about child medication in drug instructions. Methods: Three hundred and fortysix drug instructions sampled from the pharmacy in our hospital were investigated and analyzed on the part for child medication. Results: The rate of the dosage for child medication accurately marked was 67.9%， and that of child dosage with the mark of “not yet clear” was 15.3%， and with the mark of “amount prescribed or reduced” was 14.5%， and the mark of “children caution” was 2.3%. Among the instructions with accurate dosage for children， 23.1% was calculated by age， 32.9% by body weight， 21.6% by both age and weight， and the other 22.4% was given directly. Conclusions: The contents of child medication are far from perfect， which should draw attention to better management.
［Key words］ Package inserts of drug; Children; Standard
藥品作為一種特殊商品，直接關系到民眾的身體健康和生命安全。藥品說明書中應當包含藥品安全性、有效性的重要科學數據、結論和信息，用以指導安全合理使用藥品。藥品說明書是醫務人員和患者了解藥品的重要途徑。據一項調查顯示，90%以上的患者在第一次使用某種藥品前都要閱讀說明書，尤其是給兒童用藥更是如此［1］。兒童是一個具有特殊生理特點的群體，其機體各系統、各器官的功能完善是一個逐漸成熟的過程，對藥品的耐受性和敏感性也各不相同，不同的生理特點決定了其用藥的特殊性。本文試圖通過調查分析兒科門診常用西藥的藥品說明書，參考《藥品說明書和標簽管理規定》、《化學藥品非處方藥說明書規范細則》和《化學藥品和生物制品說明書規范細則》（下簡稱《規定》和《細則》），對其中不足之處提出改進建議，為進一步規范藥品說明書提供參考。
1 資料與方法
收集我院門診西藥房常用藥品的藥品說明書346份（以商品名計），其中處方藥289份，非處方藥57份。參考《規定》和《細則》，對說明書的內容進行統計分析，重點對影響兒童用藥安全與效果的“用法用量”、“兒童用藥”、“藥代動力學”、“藥物過量”等項目進行探討分析。
2 結果
2.1 說明書項目標注情況
在346份藥品說明書中，藥品名稱、成份、性狀、適應癥、規格、用法用量、不良反應、注意事項、禁忌、貯藏、包裝、有效期、執行標準、批準文號、生產企業等項目形式與內容標注都完整，故本調查僅針對表1中存在缺漏的項目進行比較。
2.2 兒童用法用量具體標示情況
在346份藥品說明書中，兒童用藥的用法用量主要集中標注在“用法用量”和“兒童用藥”兩個項目中，個別標注在“注意事項”、“禁忌“等項目中，各項標注綜合后的情況見表2。
表1 346份藥品說明書有關項目標注情況（略）
表2 346份藥品說明書兒童用藥標注情況（略）
2.3 兒童用藥劑量換算情況
在準確給出兒童劑量的235份藥品說明書中，劑量的確定方式分別按年齡、體重、年齡和體重以及直接給出劑量如“成人一包，兒童半包”等4類，統計結果見表3。
表3 兒童用藥劑量換算情況（略）
3 討論
3.1 項目標示完整率
從表1可以看出，項目標示形式完整率較高，絕大多數藥品生產企業對《規定》和《細則》形式上落實較好。同時藥物過量、藥代動力學、藥物相互作用項目內容標示率不高，臨床試驗是非強迫性內容，僅有6份（2.1%）說明書有詳細的臨床試驗結果。
3.2 兒童用法用量
用法用量是藥品說明書的核心部分，直接關系到臨床用藥的安全與效果。調查中發現僅有67.9%的藥品標注了兒童用法用量，其中還有部分雖有標示卻不明確，如“兒童用量酌減”、“遵醫囑”或“慎用”等含糊語句，使醫務人員及患者無法準確判斷。同時在兒童用藥劑量的確定方法上存在較大不同，4種劑量確定方式都各占相當比例。以按體重計算為例，以7歲兒童平均體重為25.69 kg計算［2］，有部分藥品按說書明劑量已超過成人用量，肥胖兒童可能在更小年齡就達到成人劑量。美國醫藥協會藥劑委員會推薦按體表面積計算兒童用藥量［3］。不同的兒童劑量計算方法各有優缺點，藥品監督管理部門有必要根據實際情況，確定不同藥品說明書中更為準確合理的兒童劑量方法，以指導兒童的安全、合理用藥。
3.3 兒童藥代動力學
藥代動力學是研究藥物在人體內量的變化規律，其對兒童合理用藥特別是個體化給藥有直接的指導意義。從表1調查發現，明確標注兒童藥代動力學的僅占17.3%，對醫師的指導作用不夠。因兒童對藥物的吸收、轉運和代謝與成人有較大差異，若稍有不慎，極易導致兒童用藥出現藥物過量或藥效下降，帶來用藥隱患。說明書中兒童藥物動力學的缺項，并不是藥品說明書本身的問題，主要原因在于我國兒童藥物動力學研究比較薄弱，新藥上市缺乏兒童藥動學資料，因此，兒童藥動學研究亟待加強。
3.4 兒童藥物過量
兒童用藥中該項內容的標注率最低，尤其是許多說明書中對于藥物過量的處理僅用“對癥治療”等較含糊的語句，指導性很不明確。建議增加發生藥物過量后的具體解救措施。
4 思考與建議
4.1 加強藥品說明書的監督管理
藥品監督管理部門負責審查藥物的安全性、有效性和說明書是否符合要求。對于藥品說明書中存在的問題，建議藥品監督管理部門針對兒童用藥的具體特點，加強藥品說明書的規范和管理。首先要提高說明書內容的準確性。部分藥品說明書存在項目遺漏，個別說明書在敘述中避重就輕、含糊其辭，未能反映藥品的真實情況，從而使患者的知情權受到侵犯，且易引起醫療糾紛。因此，應進一步加強藥品說明書內容的審核，必要時定期對藥品說明書的內容進行修訂，保證項目的完整和內容的準確性。建議新藥的藥品說明書定期進行審核和修改，以保證其科學性、合理性和有效性，盡早解決說明書中的某些不合理或不具操作性的問題，從而將藥品說明書中的問題減少至最低。
4.2 強化藥品生產企業的責任
《規定》和《細則》中明確要求藥品生產企業應對說明書內容的真實性、準確性和完整性負責，并密切關注藥品使用的安全性問題，及時完善安全性信息。藥品生產企業是藥品質量的直接負責人，藥品說明書可以直接影響藥品的使用，這就要求企業重視藥品說明書的內容規范，提高法制觀念。在制定藥品說明書時，應完整標注項目，增加對特殊人群用藥安全的關注，明確用法用量，開展相關研究，及時更新說明書。
4.3 鼓勵開發兒童適用規格劑型的藥品
由于兒童適用規格、劑型的藥品較少，兒童用藥面臨比成人用藥更多的問題。雖然近幾年兒童專用藥有了一定的發展，但在臨床使用中仍以成人藥為主，這不僅增加了兒童藥品不良反應發生率，也對患兒及醫護人員在用藥時帶來不便。監督管理部門應著力在政策上激勵企業研發兒童專用藥品，鼓勵醫院及科研單位收集兒童用藥的應用信息，加強和推進兒童臨床試驗研究，促進兒童用藥的安全化及合理化。
【參考文獻】
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篇8
[關鍵詞] 燈盞細辛注射液；綠原酸；咖啡酸；大鼠；藥代動力學；LC-MS/MS
[稿件編號] 2013-03-13
[基金項目] 國家“重大新藥創制”科技重大專項（2012ZX09303009-002）；江蘇省中醫藥領軍人才項目（LJ200906）；江蘇高校優勢學科建設工程項目（2010）
[通信作者] *居文政，Tel：（025）86617141-60310，E-mail：wzhju333@163、com 燈盞細辛注射液為燈盞細辛的干燥全草經提取制成的中藥注射液，收載于2010年版《中國藥典》一部[1]，具有活血化瘀，通絡止痛的功效，是目前臨床上使用較為廣泛的治療心腦血管疾病的傳統中藥之一。以往研究表明燈盞細辛的有效成分主要為黃酮類成分――燈盞乙素。通過深入研究，發現酚酸類成分也具有擴張血管和抑制血栓形成的藥理活性[2]。中藥酚酸類成分包括咖啡酸、綠原酸等，因其顯著的抗炎、抗氧化、抗凝血等多種生物活性而被國內外廣泛研究[3-5]。
在燈盞細辛注射液中，已證實黃酮類與酚酸類協同發揮藥效作用[6-7]，而燈盞乙素在體內代謝過程已有較多文獻報道[8-10]，對酚酸類成分的體內代謝過程研究卻比較少。因此深入研究酚酸類成分對明確燈盞細辛注射液的藥動藥效至關重要。本文旨在建立高效、靈敏的LC-MS/MS用于測定大鼠尾靜脈注射燈盞細辛注射液后綠原酸和咖啡酸的血藥濃度，并用于燈盞細辛注射液在大鼠體內的藥代動力學研究。
1 材料
1、1 試藥 燈盞細辛注射液（云南生物谷燈盞花藥業有限公司，批號20120551，規格10 mL/支）；對照品咖啡酸（批號110885-200102）、綠原酸（批號110753-200413）和替硝唑（批號100336-200402）均購于中國食品藥品檢定研究院。水為超純水，甲酸、甲醇、乙腈為色譜純，其他試劑均為分析純。
1、2 儀器 Agilent 1200高效液相色譜儀；API 4000 LC-MS/MS三重四級桿質譜儀，配有電噴霧化離子源（ESI），色譜工作站：Analyst 1、4、2；AE240電子天平（上海梅特勒-托利多有限公司）；MICRO-17R冷凍離心機（美國Thermo公司）；WH-2微型旋渦混合儀（上海滬西分析儀器廠）；Drict-Q5超純水機（法國Millipore公司）。
1、3 動物 SD大鼠，雌雄各半，6只，體重250～270 g，由南京中醫藥大學實驗動物中心提供，合格證號SCXK（浙）2008-0033。
2 方法
2、1 色譜及質譜檢測條件 Agilent ZOBAX SB C18色譜柱（4、6 mm×150 mm， 5 μm）；流動相為甲醇-2 mmol?L-1醋酸銨水溶液（60∶40）；流速為500 μL?min-1；柱溫30 ℃。離子源ESI；離子化模式負離子；定量模式為多反應檢測模式（MRM）；離子源電壓4 000 V；離子源溫度400 ℃；綠原酸的DP，EP，CE，CXP-56 ，-11，-30，-4 V；咖啡酸的DP，EP，CE及CXP分別為-50，-10，-25，-5 V；替硝唑的DP，EP，CE，CXP分別為-25，-10，-15，-8 V；檢測對象綠原酸m/z 353、1/191、0；咖啡酸m/z 178、9/134、9；替硝唑m/z 246、0/125、8。
2、2 對照品溶液的配制 精密稱取適量綠原酸對照品，用甲醇配制成3、84 mg?L-1的儲備液；精密吸取適量，用甲醇分別稀釋成3 840，1 920，960，480，240，120，30 μg?L-1的系列標準溶液。精密稱取適量咖啡酸對照品，用甲醇配制成1、28 mg?L-1的儲備液；精密吸取適量，用甲醇分別稀釋成1 280，640，320，160，80，40，20 μg?L-1的系列標準溶液。以上溶液于4 ℃保存，備用。
2、3 內標物溶液的配制 精密稱取適量替硝唑對照品，用甲醇溶解并稀釋成1、2 mg?L-1，于4 ℃保存，備用。
2、4 血漿樣品處理 取血漿樣品100 μL，加入1、2 mg?L-1替硝唑溶液（內標）20 μL，1 mol?L-1鹽酸溶液50 μL，渦旋30 s，再加入乙酸乙酯800 μL，渦旋振搖3 min，12 000 r?min-1離心5 min。取上清液750 μL，40 ℃氮氣流吹干，加100 μL 50%甲醇復溶，12 000 r?min-1離心5 min，取上清液5 μL進樣分析。
2、5 給藥劑量的確定 燈盞細辛注射液靜脈注射臨床給藥劑量為20～40 mL?d-1，每日1～2次，人的平均體重按60 kg計算，則其臨床給藥劑量為0、33～1、33 mL?kg-1。按大鼠每千克體重的臨床等效量是人的6倍計算，則燈盞細辛注射液大鼠尾靜脈注射給藥劑量為1、98～7、98 mL?kg-1，經預實驗，確定大鼠給藥劑量為4 mL?kg-1。經測定，該注射液中綠原酸質量濃度為170、3 mg?L-1，咖啡酸質量濃度為135、1 mg?L-1
2、6 藥代動力學研究 SD大鼠6只，給藥前12 h禁食不禁水，分別尾靜脈注射燈盞細辛注射液4 mL?kg-1。于給藥前及給藥后5，10，20，30，45 min，1，1、5，2，3，4，6，8，10，12 h經眼眶后靜脈叢取血約0、3 mL，置于肝素化試管中，以4 000 r?min-1離心10 min，取上層血漿于-40 ℃保存待測。
2、7 數據處理 大鼠靜脈給藥后測得的血藥濃度（C）-時間（t）數據應用DAS 1、0軟件進行處理。選擇適宜的數學模型擬合，計算藥代動力學參數。
3 結果
3、1 專屬性實驗 在本實驗所采用的LC-MS/MS條件下，咖啡酸、綠原酸和替硝唑的保留時間分別為2、6，2、5，3、4 min。咖啡酸、綠原酸和內標互不干擾，峰形良好，無雜峰干擾，基線平穩，見圖1。
3、2 標準曲線制備 取空白血漿100 μL，分別加入綠原酸、咖啡酸對照品系列標準溶液各10 μL，配制成相當于綠原酸及咖啡酸血漿質量濃度分別為3，12，24，48，96，192，384 μg?L-1和2，4，8，16，32，64，128 μg?L-1的血漿樣品。按2、4項下操作，取5 μL進樣分析。以各成分峰面積與內標峰面積的比值Y對血漿質量濃度X進行線性回歸運算，求得的回歸方程即為標準曲線。綠原酸回歸方程：Y=0、435 7X-0、010 7（r = 0、998 7），定量下限為3 μg?L-1。咖啡酸回歸方程Y=1、109 8X-0、058 7（r = 0、998 1），定量下限為2 μg?L-1。
3、3 準確度和精密度 取空白血漿100 μL，按上述2、4項下制備綠原酸和咖啡酸低、中、高3個質量濃度（綠原酸血漿質量濃度為3，48，192 μg?L-1；咖啡酸血漿質量濃度為2，16，64 μg?L-1）的質量控制（QC）樣品，每個濃度平行做5份，連續測定3 d。根據隨行標準曲線求得實測濃度。實測濃度的RSD即為精密度，實測濃度和加入濃度的比值即為準確度。結果表明，綠原酸日內、日間準確度分別為97、7%～101、3%（RSD≤8、5%，n=5）和96、1%～103、8%（RSD≤9、4%，n=15）；咖啡酸日內、日間準確度分別為92、3%～106、7%（RSD≤8、8%，n=5）和98、2%～108、1%（RSD≤9、8%，n=15），實驗結果符合生物樣品分析方法的要求。
3、4 提取回收率 取空白血漿100 μL，配制3、3項下低、中、高3個不同濃度含藥血漿質控樣品，按上述2、4項下操作后進樣分析，以血漿中綠原酸、咖啡酸的峰面積與相應質量濃度對照品溶液中綠原酸、咖啡酸峰面積的比值計算出上述3種質量濃度的提取回收率，每個濃度平行做5份。經LC-MS/MS測定后，低、中、稿3種濃度下的提取回收率分別為綠原酸（84、3±5、5）%，（89、1±3、3）%，（92、4±6、3）%；咖啡酸（82、1±1、9）%，（85、2±6、0）%，（88、2±4、6）%。采用同樣的方法考察了內標的提取回收率為（90、1±2、4）%。
A、 空白血漿樣品；B、 混合對照品；C、 血漿樣品；1、 咖啡酸；2、綠原酸；3、替硝唑。
圖1 樣品的液-質聯用離子流圖
Fig、1 Combined LC-MS/MS ion chromatograms of samples
3、5 穩定性考察 取空白血漿100 μL，配制3、3項下低、中、高3個不同濃度含藥血漿質控樣品，按上述2、4項下操作方法處理樣品。考察含藥血漿樣品處理好后溶液中分析物在室溫放置24 h、含藥血漿樣品-20 ℃反復凍融3次、含藥血漿樣品-40 ℃長期冷凍28 d的穩定性，每個濃度平行3份。結果表明，經處理后的血漿樣品室溫放置24 h后綠原酸及咖啡酸血藥濃度的RSD均小于9、82%，-40 ℃保存28 d血藥濃度的RSD 均小于8、65%，經過3個凍融周期后2個分析物的血藥濃度RSD均小于9、57%。
3、6 介質效應考察 取離心管數只，分別精密加入低、中、高的3個濃度綠原酸對照品溶液（30，480，1 920 μg?L-1）及咖啡酸對照品溶液（20，160，640 μg?L-1）各10 μL，再分別加入內標替硝唑溶液20 μL，水60 μL，旋渦1 min，于12 000 r?min-1離心5 min，進行LC-MS/MS分析，進樣量5 μL，記錄峰面積A1。除不加內標外，另按“血漿樣品處理”項下操作提取空白血漿數管，揮干后同上操作，記錄峰面積A2。A1和A2的比值（A2/A1×100%）即為介質效應ME（%）。綠原酸及咖啡酸血漿樣品低、中、高3種濃度LC-MS/MS介質效應（n=3）分別為83、14%，86、32%，83、90%和86、79%，92、15%，88、24%，內標替硝唑介質效應（n=9）為82、53%。
3、7 大鼠體內藥代動力學 大鼠單劑量（4 mL?kg-1）尾靜脈注射燈盞細辛注射液后綠原酸和咖啡酸的血藥濃度-時間曲線見圖 2。所測數據使用DAS 1、0軟件進行處理，主要藥動學參數見表 1。由分析結果可知，綠原酸和咖啡酸在大鼠體內的藥動學符合二室開放模型。
圖2 大鼠體內綠原酸和咖啡酸的平均血藥濃度-時間曲線（n=6）
Fig、2 Mean plasma concentration-time curves for chlorogenic acid and caffeic acid in rat plasma（n=6）
4 討論
目前文獻報道的中藥復方制劑中綠原酸和咖啡酸的血藥濃度測定方法大多為HPLC[11-13]，且目前燈盞細辛注射液在大鼠體內的藥代動力學研究主要測定燈盞乙素和總咖啡酸酯[14-15]，對于注射液中單
個酚酸化合物的藥代動力學研究較少。
本實驗采用LC-MS/MS測定血漿中綠原酸和咖啡酸的濃度，提高了靈敏度。另外，本文對血樣中酚酸類成分的提取方法進行了考察：甲醇沉淀、乙腈沉淀、乙酸乙酯提取、乙酸乙酯/乙醚（3∶1）提取，每個提取或沉淀條件考察了不同的酸化條件（加10，20，30，50，100 μL不同量的1 mol?L-1鹽酸），結果發現50 μL 1mol?L-1鹽酸酸化后乙酸乙酯的提取回收率高，無內源性物質干擾，重現性好。
蘇美英等[16]靜脈給予大鼠咖啡酸單體50 mg?kg-1后，咖啡酸單體在大鼠體內的半衰期（t1/2）為（0、45±0、05） h，體內駐留時間（MRT）為（0、24±0、06） h。本實驗中大鼠給予燈盞細辛注射液的劑量為4 mL?kg-1，若以咖啡酸含量計，咖啡酸的靜脈給藥劑量為540、4 μg?kg-1，而此時咖啡酸在大鼠體內的t1/2為（130、91±38、77） min，MRT為（198、74±18、45） min。本實驗中咖啡酸的給藥劑量遠低于50 mg?kg-1，但是注射液中咖啡酸在大鼠體內的t1/2和MRT卻明顯高于單獨給予咖啡酸單體。由此推測，燈盞細辛注射液中的某些成分與咖啡酸發生相互作用，延長了咖啡酸在大鼠體內的時間，但發生該現象的原因還不清楚，有待進一步研究。
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Study on determination of caffeic acid， chlorogenic acid in rat plasma and
their pharmacokinetics with LC-MS/MS
DAI Guo-liang1， MA Shi-tang1 ， LIU Shi-jia2 ， CHENG Xiao-gui1 ， ZANG Yu-xin1 ， JU Wen-zheng2* ， TAN Heng-shan3
（1、 College of Pharmacy of Nanjing University of Traditional Chinese Medicine， Nanjing 210029， China；
2、 Department of Clinical Pharmacology， Affiliated Hospital of Nanjing University of
Traditional Chinese Medicine， Nanjing 210029， China；
3、 Department of Clinical Pharmacology， General Hospital of Nanjing Military Area Command， Nanjing 210002， China）
[Abstract] To establish a LC-MS/MS method to determine caffeic acid， chlorogenic acid in rat plasma and study their pharmacokinetics in rats、 Six Sprague-Dawley rats were intravenously injected with 4 mL?kg-1 of Dengzhanxixin injection， respectively、 Their drug plasma concentration was determined by LC-MS/MS， with tinidazole as an internal standard、 The pharmacokinetic parameters were calculated by DAS 1、0、 The linear concentration ranges of caffeic acid， and chlorogenic acid were 2-128 μg?L-1 （r=0、998 1） and 3-384 μg?L-1 （r=0、998 7）， respectively、 The methodological test showed conformance to the requirements、 The intraday and inter-day variable coefficients were both less than 10、0%， indicating that both of legitimate precise and accuracy were in conformity with the requirements of biological sample analysis、For caffeic acid， the pharmacokinetic parameter t1/2β， AUC0-t， and CL were （130、91±38、77） min， （4、89±0、96） mg?min?L-1 and （0、12±0、02） L?min-1?kg-1， respectively、 For chlorogenic acid， the pharmacokinetic parameter t1/2β， AUC0-t and CL were （49、38±8、85） min， （9、54±0、95） mg?min?L-1 and （0、09±0、003） L?min-1?kg-1， respectively、 The LC-MS/MS analysis method established in this study was proved to be so accurate and sensitive that it can be applied to the pharmacokinetic study of caffeic acid and chlorogenic acid、
篇9
【摘要】 對近年來國內外關于中藥生物堿類化合物藥動學研究的文獻進行檢索、整理分析和歸納總結，介紹其在體內的測定方法、及生物堿單體、有效部位及復方的藥動學研究情況，同時指出了今后生物堿類化合物藥動學研究中需要關注的問題。
【關鍵詞】 生物堿; 分析方法; 藥動學
Abstract：To retrieve， analyze and summarize the literatures on the pharmacokinetic study of alkaloid compounds at home and abroad in recent years and to introduce the analytical method in vivo， the processes of the pharmacokinetics of active alkaloids， extract and prescription. At the same time the problem which needs to pay attention to for the future pharmacokinetic studies or alkaloid compounds was pointed out.
Key words： Alkaloid; Analytical method; Pharmacokinetic
生物堿廣泛存在于植物界中，如麻黃、貝母、黃連、烏頭等都主要含有生物堿成分，在臨床上已有很多應用。生物堿結構多樣，實驗證明其具有廣泛的生理和藥理活性，包括抗菌消炎、止咳平喘，抗瘧、抗心律失常、抗癌等，因此對該類化合物的研究已成為國內外醫藥界研究的熱門課題。近年來，隨著靈敏度高、特異性強檢測技術的發展，生物堿類化合物的藥動學過程得到進一步的揭示，為生物堿類藥物的篩選和臨床應用提供了數據。現將近年來生物堿類化合物藥動學研究進展綜述如下。
1 生物樣品分析方法
在生物堿類化合物的藥動學研究中，要對生物樣品中生物堿及其代謝產物進行定量分析。首先應該重視生物分析方法的確證，符合生物分析方法確證的指導原則[1]。目前最普遍的方法是高效液相色譜法，由于生物樣品(包括血漿、尿、唾液等)含有大量的內源性物質，必須對樣品進行適當預處理。
1.1 生物樣品前處理方法生物樣品測定前須進行樣品預處理， 預處理是進行分析測定過程的重要環節。通過預處理可以達到以下目的：①多數生物樣品必須經過均勻化處理后才能測定;②排除內源性雜質和代謝物的干擾;③濃縮被測組份以滿足儀器檢測靈敏度的要求;④對呈結合狀態的藥物進行水解處理。
目前最常用的有液-液萃取和液-固萃取，后者又稱為固相萃取(solid phase extraction， SPE)。比較簡單的處理方法是將生物樣品堿化后用甲醇、乙醇、乙腈等常見的蛋白沉淀試劑沉淀蛋白，高速離心后取上清液，吹干復溶后進樣。丁志平等[2]在測定鹽酸小檗堿大鼠體內血藥濃度時，將1 ml乙腈加入到0.5 ml血清中，超聲振蕩1 min，4 000 r·min-1離心15 min，取0.8 ml上清液于50℃減壓揮干，殘渣用0.4 ml流動相溶解，高速離心(14 000 r·min-1)10 min，取上清液50 μl進樣。回收率分別為(101.86±2.89)%，(99.38±2.29)%和(98.92±2.34)%。沉淀蛋白直接進樣雖方法簡單，但需要沉淀試劑對樣品和內標有較高的溶解度。張蕾等[3]測定大鼠灌胃給予三物黃芩湯后血漿中苦參堿、氧化苦參堿和氧化槐果堿含量時，比較了氯仿、二氯甲烷-異丙醇(95∶5)和二氯甲烷-正己烷-異丙醇(100∶50∶5)對苦參堿、氧化苦參堿和氧化槐果堿的回收率，其中氯仿對待測物和內標的提取回收率較其他兩種混合溶劑高而且穩定。SPE是近十幾年迅速發展起來的一種生物樣品預處理技術，其具有快速分離，回收率、精密度均較好，無乳化現象等諸多優點，近幾年來在國內外得到廣泛應用。Yu等[4]測定黃連中多種生物堿類成分在大鼠血漿濃度時，將SPE小柱，用甲醇2 ml活化，1 ml去離子水洗去甲醇。精密吸取血漿樣品0.1 ml，加至SPE小柱，先用1 ml去離子水沖洗，再分別用1 ml甲醇溶液洗脫2次，收集甲醇液，45℃氮氣吹干，用100 μl流動相溶解殘渣，高速離心后取10 μl進樣。
1.2 檢測方法目前藥動學給藥方式一般采用口服和靜脈給藥兩種。靜脈給藥可以避免在胃腸道內的代謝和分解以及肝臟的首過效應，口服給藥則不可避免受到以上因素的影響，而且在胃腸道內的吸收還受到劑型和自身理化性質的影響，進入體內血液循環的藥量更低，導致樣品的濃度低。如果要準確測定體液中的藥物濃度，應選擇較高靈敏度的檢測器，其中紫外檢測器為HPLC最常用的檢測器。徐曉月等[5]采用紫外檢測器同時檢測了大鼠血漿中士的寧、馬錢子堿、士的寧氮氧化物和馬錢子堿氮氧化物，檢測限分別為0.262，0.250，0.290和0.257 ng·ml-1。Zhao等[6]在測定大鼠血漿中毒扁豆堿及其代謝產物氧化毒扁豆堿含量時采用光電二極管陣列檢測器，檢測限分別為10 ng·ml-1和25 ng·ml-1。除紫外檢測器外，應用比較多的還有電化學和熒光檢測器。梁新麗等[7]測定大鼠血漿中延胡索乙素含量時采用熒光檢測器，最低定量限為2.096 ng·ml-1。近年由于質譜技術的發展，特別是串聯質譜技術廣泛應用，其高靈敏度，專屬性強和分析速度快等優點在藥動學研究發揮的作用越來越大。Yu等[4]采用液相色譜-質譜(LC-MS)測定了大鼠灌服黃連提取物后小檗堿、黃藤素、黃連堿、表小檗堿及藥根堿體內血藥濃度，其最低定量濃度均達到0.31 ng·ml-1。Wu等[8]采用LC-MS-MS測定志愿者靜注后血漿中氧化苦參堿及其代謝物苦參堿的濃度，其中苦參堿定量限為0.2 ng·ml-1，氧化苦參堿定量限為0.5 ng·ml-1。
2 藥動學研究
2.1 生物堿單體藥動學研究生物活性成分是中藥發揮療效的物質基礎，其藥動學研究方法與化學合成藥物相似。從中藥中發現具有藥理活性的單體，研究其藥動學規律，是新藥創制的重要途徑。
小檗堿為黃連、黃柏、三棵針或其他小檗植物中提取的生物堿，具有廣譜抗菌、降低血壓及擴張冠狀動脈、抗膽堿酯酶作用。人口服0.4 g，30 min后，血中濃度為1 μg·ml-1左右，不易吸收。采用同位素標記法[9]對小檗堿進行藥動學研究，結果表明大鼠靜脈注射后，主要經尿排泄，糞排泄很少;膽汁中有較多放射性排泄，存在著肝腸循環;血藥濃度-時間曲線符合二室模型。苦參堿型生物堿均具有以苦參堿為代表的基本結構，屬于喹諾里西啶類生物堿，具有抗腫瘤、抗肝炎、抗心律失常、抑制中樞神經系統等廣泛的藥理作用和生物活性[10]。目前對苦參堿型生物堿中苦參堿、氧化苦參堿、槐定堿、槐果堿、槐胺堿、拉馬寧堿等單一生物堿的藥物動力學進行了廣泛深入的研究。Wu等[8]研究氧化苦參堿在人體內藥動學規律，結果顯示氧化苦參堿及其體內代謝產物苦參堿分別符合二室及一室模型，靜注給藥后只有小部分氧化苦參堿轉化為苦參堿。吳永江等[11]建立了一種液-質聯用測定家兔血漿中槐定堿、槐果堿和苦參堿濃度的方法，結果表明槐定堿和槐果堿符合二室模型，而苦參堿則符合三室模型。
關附甲素為毛莨科植物黃花烏頭的塊根-關白附子中提取分離得到的活性單體化合物。藥理研究表明，關附甲素能減慢心律，顯著降低CaC12誘發的大鼠室顫發生率和死亡率，有穩定心肌細胞膜及阻斷鈉通道等電生理活性。犬靜脈注射鹽酸關附甲素的藥-時曲線符合開放三室模型[12]，與文獻報道的人體內結果較為一致，但T1/2α和T1/2β值較人體內為長，說明鹽酸關附甲素在兩者的代謝有種屬間差異。烏頭堿是存在于烏頭屬多種植物中的一種雙酯型劇毒生物堿，具有鎮痛、抗炎、抗癲癇、抗腫瘤、提高免疫功能等多種生理活性，但因其具有強烈的心臟毒性和神經毒性，安全系數小，治療劑量與中毒劑量接近，限制了對該化合物作為藥用的進一步研究。Tazawat T等[13]采用酶聯免疫法分析烏頭堿在大鼠體內的血藥濃度，結果表明按0.02 mg·kg-1劑量給大鼠靜脈注射烏頭堿，血藥濃度-時間曲線符合二室模型。
2.2 生物堿提取物(有效部位)及其制劑藥動學生物堿提取物藥動學研究報道有烏蘇里藜蘆堿、馬錢子總堿、貝母總生物堿等，有關制劑的藥動學研究有片劑、膠囊、固體自微乳、速釋微球、滴丸、注射液、乳劑及脂質體等方面。
烏蘇里藜蘆堿為烏蘇里藜蘆根提取得到的總生物堿，近年研究發現其具有很強的抗栓作用，在大鼠頸動脈點刺激模型中能明顯延長血管栓塞時間(OT)，顯示很好的量效關系和時效關系;但其有效劑量僅μg級水平，有效血藥濃度極低，通常化學測定法難以檢測，故采用藥理效應法以OT為指標，經效應-劑量-時間三維轉換，得量-時曲線為二室模型[14]。馬錢子為劇毒中藥，有效劑量和中毒劑量比較接近，臨床常用其治療一些慢性頑癥且較長期地給患者服用。徐曉月等[5]用HPLC法研究馬錢子砂燙炮制品中生物堿在大鼠體內的藥動學，結果顯示大鼠靜脈注射馬錢子總堿后，其主要成分士的寧、馬錢子堿、士的寧氮氧化物和馬錢子堿氮氧化物的代謝均符合二室開放模型。貝母生物堿是貝母中止咳平喘主要活性成分，現已被開發成多種制劑，曾令杰等[15]對大鼠靜注伊犁貝母總生物堿后體內各生物堿代謝動力學進行了探討，研究結果顯示西貝素苷消除快，符合一室模型，而其苷元西貝素的消除慢，符合兩室模型，伊貝堿苷A的消除同樣比西貝素快，符合一室模型。
朱錦秀等[16]比較磷酸川芎嗪滴丸劑與片劑在健康人體內的生物等效性，采用HPLC法測定血清中的藥物濃度，并用DAS2.0藥動學程序計算其藥動學參數和相對生物利用度，兩者的體內過程均符合一室房室模型，受試制劑的相對生物利用度為(115.1±35.4)%，磷酸川芎嗪滴丸劑和片劑具有生物等效性。此外，羥基喜樹堿固體自微乳和速釋微球的結腸定位膠囊，漢防己甲素微球、苦參總堿注射液、氧化苦參堿生物黏附緩釋片及三尖杉酯堿高、低包裹率脂質體在動物體內的藥動學行為及體內分布亦有相繼報道。
2.3 中藥復方中生物堿藥動學研究 由于中藥方劑中有效物質基礎及作用方式極其復雜，因此中藥復方藥動學研究是中藥藥動學研究的難點。近年來，中藥復方生物堿藥動學研究逐漸增多。 麻黃湯中君藥麻黃所含生物堿類成分基本可看成是麻黃藥理作用的代表性成分，賀豐等[17]借助于GC-MS手段，用血藥濃度法進行了中藥復方麻黃湯中麻黃堿和偽麻黃堿的人體動力學研究，結果顯示所有藥時曲線均符合一房室模型，從藥動學角度研究中藥復方配伍組方原則提供參考依據。補陽還五湯由黃芪、當歸、赤芍、桃仁、川芎、紅花、地龍7味中藥組成，具有補氣、活血通絡之功效，方中主要代表成分為黃芪甲苷、川芎嗪、紅花苷、蛋白質和多糖等。賀福元等(《中藥復方藥物動力學數學模型的建立及對補陽還五湯的研究》.成都中醫藥大學博士學位論文，2006)對大鼠靜注補陽還五湯總方及總生物堿后藥動學規律進行了探討，結果顯示兩組方中川芎嗪藥動學均為二室模型且藥動學參數相近，但與單味川芎、純品川芎嗪的藥動學參數相差很大，提示中藥復方配伍能改變有效成分或部位制劑的藥動學參數。四逆湯由附子、干姜、炙甘草組成，是中醫回陽救逆的經典名方，具有強心、抗休克作用。李銳等[18]應用中醫方藥血藥PK-PD模型，以烏頭生物堿為指標成分，探討四逆湯精制物藥動學與藥效動力學的相關性，揭示四逆湯的配伍規律。結果烏頭堿在犬體內呈一級速度消除，具有開放一房室模型的特征，藥動學參數K血與K效、T1/2血與T1/2效接近，具有藥效產生快、作用維持時間較長的特點，反映出四逆湯“走而不守，守而不走”的特性。Zhang等[19]對18名健康志愿者靜脈注射參附粉針劑后體內6種成分進行測定，結果表明烏頭堿，新烏頭堿，次烏頭堿體內濃度過低，無法檢測，而苯甲酰烏頭原堿，苯甲酰新烏頭堿，苯甲酰海帕烏頭原堿體內血藥濃度-時間曲線符合一室模型。
此外，黃連解毒湯、黃連與生地黃不同比例配伍中鹽酸小檗堿在大鼠體內的藥動學規律;采用GC-FID測定健康志愿者含服速效救心丸后吸收入血漿成分川芎嗪，機體生理和病理狀態分別給予復方川芎水提液在動脈血藥時曲線上川芎嗪的雙峰現象，對中藥復方體內命運的特殊處置規律，為臨床治療藥物監測及證治藥動學假說的研究提供實驗依據。
3 分析與展望
3.1 生物堿藥代動力學研究方法較單一生物堿類的藥代動力學研究數量相對較少，研究方法較為單一，大部分以HPLC測定血藥濃度為主;由于生物堿進入體內含量低，血藥濃度很難檢測，這就需要更好的檢測技術的出現。生物測定法方面，由于中藥作用往往是多方面的，不同藥理效應指標測出的藥代動力學參數往往不同，某一藥理作用并不能代表全部藥理作用的體內動態過程。因此，要采用多種方法、多指標的研究相結合以得出更為準確的結果。開展更深層次的生物堿藥動學-藥效學(PK-PD)模型，深入研究生物堿的體內動力學和代謝情況，對指導生物堿類物質的藥物篩選和結構改造，從而尋找療效更好的藥物。
3.2 復方中生物堿藥代動力學研究較薄弱生物堿藥代動力學集中在單體研究，中藥復方中生物堿的藥代動力學研究顯得較為薄弱。隨著藥代動力學研究的深入，各相關交叉學科的發展，中藥復方藥代動力學研究對揭示復方藥效的物質基礎、方劑組方原理及配伍規律、指導臨床合理用藥、促進中藥的劑型改革和新藥研制，對中藥的現代化及國際化具有重要意義，必須進一步加強中藥復方中生物堿藥代動力學研究。
3.3 生物堿毒性限制了其藥代動力學的研究生物堿結構多樣，具有多種生理活性和明顯的藥理作用，部分生物堿既是生理活性物質，也是毒性物質。由于生物堿毒性給藥劑量、化學檢測方法靈敏度等問題，限制了其藥代動力學的研究。隨著色譜-質譜聯用技術(LC-MS)、質譜-質譜聯用技術(MS-MS)、微透析-質譜聯用技術等具有在線鑒別能力的定量技術，在體內藥物分析中迅速推廣，為開展具有微量性、多樣性特點的中藥動力學的研究提供了技術保障，能夠豐富毒性生物堿藥物的藥代動力學研究。
綜上所述，生物堿是一類重要的天然化合物，目前國內外對生物堿類化合物藥動學研究有一定的基礎，但對于含生物堿類成分的中藥復方制劑中動力學及代謝方面研究相對還很薄弱。因此， 有必要探索適宜中藥方劑的藥代動力學研究方法和模式，加強對生物堿代謝方面的研究，對代謝物的結構、代謝途徑及藥理作用進行更為深入的研究以闡明中藥生物堿發揮療效的真正物質基礎，更好地指導臨床用藥和中藥新藥的研發。
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篇10
關鍵詞：SU系列藥物；人血清白蛋白；藥效
【中圖分類號】R129【文獻標識碼】B【文章編號】1674-7526（2012）08-0321-01
人血清白蛋白是血漿中最主要的蛋白質，能夠與大多數內源性和外源性化合物如藥物等進行可逆的結合從而起到在體內的轉運作用[1]。藥物與白蛋白的親合力大小直接影響到藥物在體內的分布、清除以及到達靶點的藥物量而影響藥效。如果一個藥物在血漿中的蛋白鍵合率很高，會大大影響藥物的釋放，為了發揮其藥效就必須增加服用量，這樣除了費用昂貴外，提高藥物劑量水平也必然會導致某些副作用產生[2]。過強的轉運蛋白鍵合能力，甚至可能阻礙藥物到達靶點位置。而與血清白蛋白親合力較小的藥物可能會具較低的劑量水平，且能提高其在體內的耐受性，但過小的親合力又使轉運攜帶的藥物量太小。掌握了關于白蛋白-配基鍵合的詳細結構信息后，就可以在一定范圍內，通過改變配基結構使白蛋白和配基小分子的接觸減小，或只改變小分子的化學性質而不干擾蛋白鍵合能力，即以適當減少與HSA親合力為出發點設計化合物。
本章我們采用docking和分子動力學的方法對SU-118及其系列化合物與HSA的相互作用進行研究和比較，對此系列降糖化合物結構與HSA親合力的相關性進行探討。
1實驗部分
用SU-118及其類似物進行1N5U的ⅡA位置上的docking，進行分子動力學模擬實驗，都采用cvff力場，選擇的系綜為正則系綜（NVT系綜），選定溫度為298K，自動調溫裝置的類型選的是Nose，每一步計算的時間為1fs，一共運行600ps，最后得到平均勢能值分別為SU-114是-26808.865kcal/mol，而SU-118是-26991.364kcal/mol。只運行單獨的小分子SU-114的勢能值為6.143kcal/mol，SU-118的勢能值為45.328kcal/mol，單模擬1N5U的勢能值為-27675.314kcal/mol。
其他同類藥物在ⅡA位置進行了模擬：
2結果與討論
分子動力學結果得到的能量值，SU-114的為-26808865 kcal/mol，要比SU-118的-26991.364kcal/mol要大很多，去除有小分子引起的能量差異，SU-114 docking后的勢能比SU-118的高221.684kcal/mole，說明SU-114與HSA結合得不如SU-118與HSA結合的穩定，另外從DockingScore也可以看出SU-118比SU-114結合得更加好。
SU-114是用疏水基團-CH2CH（CH3）2取代-CH2C6H5，而疏水作用是穩定復合物的重要因素，增加疏水基團有利于藥物與白蛋白的鍵合。例如SU-117就是用疏水性較小的-CH2CH=CH2代替SU-118中的-CH2C6H5，SU-114與HSA結合得就比SU-117更加穩定，從DockingScore就可以看出，SU-114得分比SU-117低。但是這里SU-118的模擬結果與這不符。
這里在討論藥物與HSA的鍵合時，沒有考慮靜電作用在藥物與HSA的相互作用中所起的重要作用。HSA含有許多堿性氨基酸，如組氨酸、精氨酸和N端氨基酸，在定義的ActiveSite pocket里就有幾個這類氨基酸，這些堿性基團上的-NH3+ 顯正電性，所以HSA易于與陰離子化合物發生靜電作用[4]，增加鍵合能力。為了設計更為有效的藥物，我們建議應兼顧疏水與靜電作用。另外藥物中的作用基團，與HSA接觸時距離不同，對鍵合的影響程度也不同，緊靠HSA的位置顯得尤其重要，對它們的取代基改變會極大影響到與HSA的親合力。
所以可以知道疏水作用不是結合穩定與否的唯一因素，雖然SU-114有疏水基團，但它與HSA結合得沒有SU-118穩定。而藥效SU-114比SU-118要弱，可見藥效是否明顯除與結合穩定與否有關，還和其它因素有關，并非結合得越穩定藥效越差，但也不能否定結合能力引起的影響。
通過一系列藥物分子在ⅡA位置docking與在ⅢA位置docking的結果對比，可以清楚地看出該系列藥物對ⅡA位置的親和力遠比對ⅢA位置要強。
SU這一系列化合物主要以疏水作用與血清白蛋白鍵合，合適的疏水基團，保證藥物在HSA上有適中的親合力，脲基上的取代基的親脂性也不能太大，否則親合力太大，會減少到達靶點的藥物量而影響藥效。所以增加一些極性取代基，適當降低藥物與HSA親合力，以此為出發點進行藥物設計，是以基于增加對靶分子親合力的化合物結構設計方法的有效補充，為體外藥物篩選提供一個簡便的輔助手段。
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