三七超微粉質量標準研究論文

導語：三七超微粉質量標準研究論文一文來源于網友上傳，不代表本站觀點，若需要原創文章可咨詢客服老師，歡迎參考。

【摘要】目的建立三七超微粉的質量標準。方法采用薄層色譜法鑒別三七；使用激光粒度檢測儀對粒徑進行檢測；HPLC法測定三七超微粉中三七皂苷R1，人參皂苷Rg1，人參皂苷Rb1含量。結果薄層圖譜斑點清晰，可鑒別出與三七的對應斑點；三七超微粉的中位徑在15μm以下；三七皂苷R1在0.535～3.210μg范圍內線性關系良好(r=1.000),平均回收率103.08%,RSD=2.80%；人參皂苷Rg1在2.225～13.350μg范圍內線性關系良好(r=1.000),平均回收率100.33%,RSD=2.29%；人參皂苷Rb1在2.205～13.230μg范圍內線性關系良好(r=1.000),平均回收率101.00%,RSD=1.43%。結論所建立的方法簡便、準確、重復性好,可用于三七超微粉的質量控制

【關鍵詞】三七超微粉粒徑高效液相薄層色譜質量標準

Abstract:ObjectiveTodevelopaqualitystandardforsupermicropowderofnotoginseng.MethodsQualitativeanalysisofmicropowderofnotoginsengwascarriedoutbyTLC.Theparticlediameterwasdetectedwithlaserscatteringparticlesizedistributionanaslyzer.AnRP-HPLCmethodwasusedforthecontentdeterminationoftheNotoginsensodeR1,ginsenosideRg1,ginsenosideRb1.ResultsThechromatographicspotsofmicropowderofnotoginsengwereidentifiedwithouttheinterferenceofnegativecontrol.Micropowderofparticleaveragediameterwasbelow15μm.NotoginsensodeR1hadagoodlinearityintherangeof0.535～3.210μg(r=1.000),andtheaveragerecoverywas103.08%withRSDof2.80%.GinsenosideRg1hadagoodlinearityintherangeof2.225～13.350μg(r=1.000),andtheaveragerecoverywas100.33%withRSDof2.29%.GinsenosideRb1hadagoodlinearityintherangeof2.205～13.230μg(r=1.000),andtheaveragerecoverywas101.00%withRSDof1.43%.ConclusionThismethodissimple,accurateandrepeatable.ItcanbeusedtodetermineginsenosideRg1，ginsenosideRb1andnotoginsensodeR1inmicropowderofNotoginseng.

Keywords:MicropowderofNotoginseng;Particlediameter;HPLC;TLC;Qualitystandard

三七(RadixNotoginseng)為常見的貴重藥材，目前市場上的三七超微粉已經較為普遍，但對三七超微粉的質量標準研究的文獻報道較少，本課題采用薄層定性鑒別，使用激光粒度檢測儀對三七超微粉的粒徑進行檢測，并在參考文獻［1］的基礎上，同時測定三七超微粉產品中三七皂苷R1，人參皂苷Rg1和人參皂苷Rb1的含量。方法簡便、準確、重復性好，可用于三七超微粉的質量控制。

1儀器與試藥

HP1100高效液相色譜儀，二極管陣列檢測器，四元泵，SartoriusBP211D電子分析天平，乙腈、甲醇（HPLC級），水為重蒸餾水，人參皂苷Rg1，人參皂苷Rb1，人參皂苷Re，三七皂苷R1對照品及三七對照藥材(均由中國藥品生物制品檢定所提供)，三七超微粉樣品為本實驗室制備。

2方法與結果

2.1薄層鑒別取本品0.8g，加水5滴，攪勻，加以水飽和正丁醇5ml，密塞，振搖10min，放置2h，離心，取上清液，加3倍量以正丁醇飽和的水，搖勻，放置使分成層（必要時離心），取正丁醇層，蒸干，殘渣加1ml甲醇使溶解，作為供試品。取人參皂苷Rg1，人參皂苷Rb1，人參皂苷Re及三七皂苷R1加甲醇制成1ml各含0.5mg的混和溶液，作為對照品溶液。另取三七對照藥材0.8g，照供試品溶液制備方法，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法［《中國藥典》（2005版）Ⅰ部附錄ⅥB］實驗，吸取上述3種溶液各10μl，分別點于同一羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G板上，以三氯甲烷－甲醇－水（13∶7∶2）10℃下放置過夜的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰，檢視。供試品色譜中，在對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色斑點。如圖1。

1.三七混和對照品2.三七對照藥材3，4，5.三七超微粉樣品

圖1三七超微粉薄層鑒別圖（略）

2.2三七超微粉粒徑檢測取3批三七超微粉樣品，每批取0.07g，加1ml乙醇潤濕后，加50ml水，超聲1min后立即使用激光粒度檢測儀進行檢測。結果表明所取樣品的中位徑均在15μm以內。結果見表1和圖2。

表1三七超微粉粒徑檢測結果（略）

圖2三七超微粉粒徑檢測

2.3三七超微粉含量測定

2.3.1色譜條件分析依利特ODS柱（150mm×4.6mm,5μm）；檢測波長203nm；柱溫20℃；流速為1ml/min,流動相A(乙腈)和B（水）進行梯度洗脫。結果見表2。

表2梯度洗脫程序表（略）

2.3.2標準品溶液的制備精密稱取人參皂苷Rg1，人參皂苷Rb1和三七皂苷R1適量用甲醇溶解制備成含三七皂苷R1對照品0.107mg/ml，人參皂苷Rg1對照品0.455mg/ml和人參皂苷Rb1對照品0.441mg/ml的混和對照品溶液，用0.45μm微孔濾膜過濾后備用。

2.3.3供試品溶液的制備精密稱取三七超微粉約1g，精密加入甲醇50ml，稱定重量，放置過夜，置80℃水浴上回流煮沸2h，放冷，用甲醇補足重量，搖勻，濾過，取續濾液，用0.45μm微孔濾膜過濾即得。

2.3.4測定法分別精密吸取對照品和供試品溶液各10μl，注入高效液相色譜儀，測定峰面積積分值。按外標法以峰面積計算，即得。

2.3.5色譜分離結果在上述色譜條件下，人參皂苷Rg1，人參皂苷Rb1和三七皂苷R1與共存的其他化學成分達到良好的分離。結果見圖3。

1.三七皂苷R12.人參皂苷Rg13.人參皂苷Rb1

a三七對照品b三七超微粉樣品

圖3三七超微粉高效液相色譜圖譜（略）

2.3.6標準曲線的制備取標準品混和溶液，分別進樣5，7，10，15，20，25，30μl，以峰面積為縱坐標Y，進樣量（μg）為橫坐標X進行線性回歸。結果見表3。

2.3.7精密度實驗取同一份供試品溶液,按上述色譜條件,連續進樣6次,測定峰面積積分值,三七皂苷R1，人參皂苷Rb1和人參皂苷Rg1的RSD分別為1.45%，1.81%，2.02%。

2.3.8穩定性實驗取同一份樣品溶液,放置0,1,2,4,6,8h,按上述色譜條件,分別測定峰面積積分值,三七皂苷R1，人參皂苷Rb1和人參皂苷Rg1的RSD分別為1.68%，1.81%，2.43%。

2.3.9重復性實驗精密稱取同一批的三七超微粉樣品6份,按上述方法試驗,分別測定樣品中三七皂苷R1，人參皂苷Rb1和人參皂苷Rg1的含量，結果三七皂苷R1的平均含量為0.82%，RSD為1.84%；人參皂苷Rb1的平均含量為3.36%，RSD為2.38%；人參皂苷Rg1的平均含量為3.01%，RSD為2.54%。

2.3.10加樣回收率實驗取已知含量的同一批號樣品,研細,精密稱取6份,每份約1g(相當于含三七皂苷R1約0.0081g，人參皂苷Rg1約0.0308g和人參皂苷Rb10.0307g)，按上述方法實驗,分別測定樣品中三七皂苷R1，人參皂苷Rg1和人參皂苷Rb1的含量,結果平均回收率分別為103.08%,100.33%，101.00%，RSD分別為2.80%，2.29%，1.43%(n=6)。結果見表4。

表3三七超微粉標準曲線（略）

表4三七超微粉加樣回收率（略）

2.3.11樣品含量測定按上述色譜條件和測定方法,對自制的三七超微粉樣品進行含量測定,測定結果。結果見表5。

表5樣品含量測定結果（略）

3結論

超微粉碎技術是為適應中醫藥現代化的需要而發展起來的一種新技術，三七經超微粉碎后，其粉體性質發生了某些變化，這些變化可能會對三七超微粉的質量有影響，為此，我們對三七超微粉質量標準進行了研究。

采用薄層鑒別、粒徑檢測和含量測定相結合的方法對三七超微粉的質量標準進行研究，結果三七超微粉的薄層鑒別清晰，與對照品在同位置顯相相同，粒徑檢測可見其中位徑在10.74μm，含量測定符合藥典標準。

對三七超微粉質量標準的研究，也為控制市面上各種三七超微粉制劑建立了可控的質量標準，有利于規范市場。

4討論

在薄層鑒別時，考察了流動相三氯甲烷醋酸乙酯甲醇水（15∶40∶22∶10），發現在展開后斑點較散，不圓整，使用三氯甲烷甲醇水（13∶7∶2）后，斑點圓整，分離度好。

本研究在粒徑控制上，不僅使用了激光粒度檢測儀進行測定，還考查了使用電鏡觀察超微粉粒徑，觀察發現超微粉粒徑均較小，符合中位徑在15μm以下的要求，由于電鏡在粒徑大小的控制方法上有一定難度，故只作為參考，不納入質量標準。結果見圖4。

圖4三七超微粉電鏡檢測結果（略）

本研究以三七皂苷R1，人參皂苷Rb1和人參皂苷Rg1為定量指標，在《中國藥典》的基礎上進行了改進，出峰時間在35min能較好地分離樣品中待測成分，此方法更加簡便、可行。

考察DiamonsilTMC18色譜柱（150mm×4.6mm，5μm）和HypersilODSC18(150mm×4.6mm,5μm)不同色譜柱對樣品中皂苷分離的影響，結果證明兩種不同型號的色譜柱均有較好的分離效果。

【參考文獻】

［1］國家藥典委員會.中國藥典，Ⅰ部［S］.北京：化學工業出版社，2005：10