抗腫瘤作用范文10篇

【摘要】通過對近期文獻的查閱，對冬凌草治療食管癌、賁門癌、乳腺癌、直腸癌、白血病的作用研究進行綜述及討論分析，指出冬凌草是一種很好的抗腫瘤植物資源。

【關(guān)鍵詞】冬凌草冬凌草素抗癌

冬凌草Rabdosiarubescensvar.taihangensis，又名冰凌草。冰凌花、雪花草，因其植株冬季凝結(jié)薄如蟬翼、形態(tài)各異的蝶狀冰凌片而得名。

冬凌草系唇形科香茶萊屬植物碎米椏的變種，曾被收入1977年版《中國藥典》，并編人《全國中草藥匯編》。其對冬凌草的一般描述為：味苦、甘，性微寒。功能清熱解毒，活血止痛。主治咽喉腫痛、扁桃體炎、感冒、頭痛、氣管炎、慢性肝炎、關(guān)節(jié)風(fēng)濕痛、蛇蟲咬傷。而近年來經(jīng)過多家研究單位多學(xué)科的綜合研究發(fā)現(xiàn)，冬凌草全株對食管癌、賁門癌、乳腺癌、直腸癌、白血病等有緩解癥狀并延長生存時間的作用，冬凌草重新受到重視，被稱為“中華神草”。檢索文獻發(fā)現(xiàn)，關(guān)于冬凌草的文章有半數(shù)是關(guān)于其抗腫瘤作用的研究報道，有體外實驗也有臨床觀察的實例。現(xiàn)報道如下。

1冬凌草抗腫瘤體外實驗研究

張俊峰等［1，2］通過實驗證明冬凌草甲素能抑制人肝癌細(xì)胞BEL-7402和白血病原代細(xì)胞的生長及誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生凋亡，而且呈現(xiàn)出明顯的量-效與時-效關(guān)系；劉加軍等［3～7］以不同濃度的冬凌草甲素作用于體外培養(yǎng)的NB4細(xì)胞、白血病HL-60細(xì)胞株、白血病K562細(xì)胞、U937細(xì)胞，MTT法檢測細(xì)胞生長抑制率，結(jié)果表明冬凌草甲素能抑制細(xì)胞的生長并誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生凋亡；王洪琦等［8］通過小鼠灌胃給藥實驗表明冬凌草提取物可以使腹水肝癌H22細(xì)胞大量壞死和凋亡；劉艷秋等［9］研究冬凌草甲素促進人淋巴瘤細(xì)胞U937分化的巨噬細(xì)胞吞噬凋亡小體的機制。肖大江等［10］通過觀察發(fā)現(xiàn)冬凌草甲素對人鼻咽癌細(xì)胞系CNE細(xì)胞生長有明顯的抑制作用，且抑制率均隨著濃度的增加而增加。薛宏偉等［11］探討發(fā)現(xiàn)冬凌草甲素(RuA)對人膽囊癌細(xì)胞株(GBC-SD)有誘導(dǎo)凋亡的統(tǒng)計學(xué)顯著作用；劉明月等［12］觀察了冬凌草甲素體外誘導(dǎo)人結(jié)腸癌HCT8細(xì)胞凋亡的作用，且凋亡率隨著濃度的增加而增加；張春玲等［13］研究了冬凌草甲素誘導(dǎo)人黑色素瘤A375-S2細(xì)胞凋亡的作用，發(fā)現(xiàn)其作用呈明顯的量效關(guān)系和時間依賴性；張守偉等［14］研究復(fù)方冬凌草甲素對肺癌SPCA-l細(xì)胞株的體外抗腫瘤作用，以不同濃度的復(fù)方冬凌草甲素作用于體外培養(yǎng)的SPCA-l細(xì)胞，檢測不同藥物濃度對細(xì)胞端粒酶活性的影響，在普通及倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，結(jié)果不同濃度的藥物作用一定時間后均可誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生凋亡，流式細(xì)胞儀的檢測表明細(xì)胞凋亡率在一定范圍內(nèi)隨作用時間的延長而增加。楊勝利等［15］探討發(fā)現(xiàn)，冬凌草甲素具有明顯的抗DNA突變作用。

惡性腫瘤是嚴(yán)重威脅人類健康的一類常見疾病，尋找有效的抗癌藥物和方法，是世界醫(yī)學(xué)面臨的重要課題。中藥是祖國醫(yī)學(xué)用來防治疾病的有力武器，人們發(fā)現(xiàn)中藥治療惡性腫瘤，無論是在減輕臨床癥狀，提高生存質(zhì)量，防止復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移，延長生存期，還是在與放化療配合，增效減毒等方面都有很好的效果。這引起了國內(nèi)外學(xué)者研究中藥的濃厚興趣，許多研究工作從不同方面揭示了各種中藥的抗腫瘤作用，見表1。

1免疫增強作用

腫瘤的發(fā)生和發(fā)展與整個機體的免疫功能減退密切相關(guān)。臨床觀察表明，免疫功能活躍的腫瘤病人比免疫功能低下的病人預(yù)后好；保持免疫記憶反應(yīng)能力的病人比失去免疫記憶反應(yīng)能力的病人預(yù)后好。實驗研究表明，某些中藥能保護或提高機體的免疫功能，如地黃多糖可提高S180荷瘤小鼠脾臟T淋巴細(xì)胞的增殖能力，并可較長時間維持在較高水平，也能部分阻礙瘤株對脾臟NK細(xì)胞活力的抑制作用，相對改善荷瘤小鼠由于腫瘤而引起的IL-2分泌能力下降，顯著提高CTL細(xì)胞活力，從而發(fā)揮抗腫瘤免疫效應(yīng)（1）。楊傳標(biāo)（2）等報道中藥健脾康復(fù)湯（黨參、白術(shù)、茯苓、薏苡仁、卷柏、仙鶴草等）治療大腸癌脾虛證，能增強患者免疫功能，治療后自然殺傷（NK）細(xì)胞活性及T細(xì)胞亞群活性明顯增強，同時臨床癥狀改善，生存質(zhì)量得到提高。此外，中藥人參、黃芪、白術(shù)等都具有很好的增強機體免疫功能的作用。

2誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化

細(xì)胞惡變是增殖和分化兩者平衡的失調(diào)，從細(xì)胞增殖角度說惡性腫瘤的增殖是失去控制的，從分化方面講惡性腫瘤細(xì)胞是喪失分化或分化異常的細(xì)胞。誘導(dǎo)惡性腫瘤分化，抑制其增殖是腫瘤現(xiàn)代研究的重要領(lǐng)域，西藥中維甲酸等誘導(dǎo)分化劑，因有嚴(yán)重副作用，限制了臨床應(yīng)用，而許多中藥具有良好的抑制腫瘤細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)分化作用，且無副作用。如丹參酮ⅡA可誘導(dǎo)人急性早幼粒細(xì)胞白血病細(xì)胞向終末細(xì)胞分化，并使細(xì)胞生長明顯抑制，丹參酮還對人宮頸癌細(xì)胞株K562具有良好的誘導(dǎo)分化作用，其效果與維甲酸相仿（3）。曾小莉等（4）用人參總皂甙處理人肝癌細(xì)胞HepG2后其生長明顯受到抑制，細(xì)胞質(zhì)增多，線粒體數(shù)量增加，糖原增多，高爾基復(fù)合體體積增大，發(fā)育較完善，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和游離核蛋白體增多，提示HepG2細(xì)胞趨于成熟分化。同時人參總皂甙能夠有效動員HepG2細(xì)胞由G1/G0期進入S期，阻止S期細(xì)胞向G2/M期移行，造成大量S期細(xì)胞堆積。大量該期細(xì)胞DNA解旋，DNA單鏈暴露出更多的活性部位，為抗腫瘤藥物提供更多的作用位點。并且臨床上可進一步與細(xì)胞周期特異性抗腫瘤藥物聯(lián)合應(yīng)用，更有效地殺傷S期腫瘤細(xì)胞。中藥淫羊藿甙作用于人高轉(zhuǎn)肺癌細(xì)胞PG，采用多種手段檢測表明，淫羊藿甙能影響PG細(xì)胞周期的時相分布，并能升高細(xì)胞內(nèi)cAMP/cGMP比值；同時降低PG細(xì)胞對外基質(zhì)的粘附性及侵襲、運動能力，從而逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞的惡性表型（5）。

3促進腫瘤細(xì)胞凋亡

【關(guān)鍵詞】抗腫瘤藥;,腫瘤細(xì)胞,培養(yǎng)的;,腫瘤移植;,異十三基二胺

摘要:目的觀察異十三基二胺(D79)的體內(nèi)外抗腫瘤作用。方法應(yīng)用錐蟲藍排染法、MTT法檢測D79對多種體外培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒作用;Bliss法觀察D79急性毒性實驗;在可耐受劑量下觀察D79對小鼠移植性實體瘤U14、腹水瘤EAC、HAC的抑制率。結(jié)果D79顯著殺傷多種體外腫瘤細(xì)胞,藥物作用48h,IC501.24~3.36μg/mL;D79的LD50為36.49mg/kg(靜脈注射)。D79抑制小鼠移植性實體瘤U14體內(nèi)生長、提高移植性腹水瘤EAC、HAC小鼠生存時間的作用呈劑量依賴性。結(jié)論D79有較強的體內(nèi)外抗腫瘤作用。

關(guān)鍵詞:抗腫瘤藥;腫瘤細(xì)胞,培養(yǎng)的;腫瘤移植;異十三基二胺

ABSTRACT:ObjectiveToobservetheantitumoreffectofallotritridecyldiamidogen(D79)invivoandinvitro.MethodsThecytotoxiceffectsofD79onvarioustumorcellslinesculturedinvitroweredeterminedbytrypanbluedyeexclusiontest,MTTmethod.AcutetoxicityofD79wasevaluatedbyBlissmethod:atatolerabledoselevel,D79wasadministratedtotreattransplantedsolidtumorU14andascetictumorsEACandHAC.Tumorweightinhibitionandlifeextensionwereobserved.ResultsD79inducedsignificantgrowtharrestinvariousmalignanttumorcelllinesculturedinvitro.IC50ofthesetumorcellsexposedtothedrugfor48hoursrangedfrom1.24~3.36μg/mL.LD50ofD79was36.49mg/kg(mice,iv).D79inhibitinvivogrowthofimplantedsolidtumorU14andprolongedlivetimeimplantedascetictumorsEACandHACofmiceinadosedependmentmanner.ConclusionD79hadobviousantitumoractivityinvivoandinvitro.

KEYWORDS:antineoplasticagents;tumorcells,cultured;neoplasmstransplantation;allotritridecyldiamidogen

2000年,Yang等證實末端支鏈飽和脂肪酸13甲基肉豆蔻酸(13MTD)體內(nèi)外抗腫瘤作用并發(fā)現(xiàn)其主要通過誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡發(fā)揮作用[1]。異十三基二胺(D79)是在13MTD基礎(chǔ)上合成的一種新型胺類化合物,其化學(xué)結(jié)構(gòu)明顯區(qū)別于當(dāng)前常規(guī)抗腫瘤藥物。筆者研究其體內(nèi)外抗腫瘤作用,初步結(jié)果報告如下。

1材料與方法

1.1MTT檢測法

1.1.1腫瘤細(xì)胞的傳代培養(yǎng)子宮內(nèi)膜腺癌（JEC，遵義醫(yī)學(xué)院微生物學(xué)教研室吳中明教授提供）、人肝癌SMMC7721（中科院上海生命研究院）用含10%小牛血清的RPMI－1640(Lot#1165062,GIBCO)培養(yǎng)液稀釋成1×105·ml－1的細(xì)胞懸液，每個培養(yǎng)瓶2ml，置37℃、5％的CO2環(huán)境中進行體外培養(yǎng)，待瘤細(xì)胞在培養(yǎng)瓶底長至約80％細(xì)胞融合時，分瓶傳代培養(yǎng)。

1.1.2分組實驗分為空白對照組（NS）、陽性對照組（5-fliorouracil，5Fu，10-4mol·L-1。上海旭東海普藥業(yè)有限公司，批號：031001），5個10倍梯度的試藥組（10-4～10-8mol·L-1的染料木素，﹥95%，陜西賽德高科生物股份有限公司）和與10-4mol·L-1的染料木素相對應(yīng)的溶媒對照組（含0.5%乙醇的NS）。

1.1.3操作用RPMI-1640完全培養(yǎng)液分別將腫瘤細(xì)胞稀釋配制成5×104·ml－1的細(xì)胞懸液，接種于96孔培養(yǎng)板，每孔100μl，置37℃,5%的CO2環(huán)境中，進行體外培養(yǎng)，24h后加藥，每孔10μl，設(shè)5個平行孔，空白對照組加入等量生理鹽水；結(jié)束培養(yǎng)（24，48，72，96h）前4h，每孔加入5mg·ml－1的MTT溶液10μl，結(jié)束培養(yǎng)后小心吸棄上清液，每孔加入DMSO150μl，待甲臢完全溶解后于酶標(biāo)儀（Sunrise,Australia）570nm處讀出各孔的OD值。實驗重復(fù)3次。

1.1.4評價指標(biāo)評價指標(biāo)為平均細(xì)胞抑制率(IR)。細(xì)胞抑制率（%）=(1一實驗孔OD值/對照孔OD值)×100％。IR>50％為敏感，在30％～50％為低度敏感，小于30％為不敏感。

【摘要】目的研究葫蘆鉆提取物的抗腫瘤作用。方法體外抗腫瘤活性研究采用MTT比色法，靶細(xì)胞采用人肝癌細(xì)胞BLE7404；通過復(fù)制小鼠S180，H22腹水瘤和肉瘤動物模型，觀察葫蘆鉆提取物對小鼠平均生命延長率和腫瘤抑制率的影響來評價體內(nèi)抗腫瘤作用。結(jié)果葫蘆鉆水、醇提取物濃度為20mg/ml時，對體外培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞的抑制率均＞50%；葫蘆鉆水、醇提取物的最大耐受劑量均是150g/kg；經(jīng)3次實驗，葫蘆鉆水、醇提取物高、低劑量組對S180腹水瘤小鼠平均生命延長率均＞50%，葫蘆鉆醇提物高劑量組對H22腹水瘤小鼠平均生命延長率＞50%。葫蘆鉆水、醇提取物高、低劑量組對S180肉瘤小鼠平均瘤重抑制率均＞30%，對H22肉瘤小鼠平均瘤重抑制率均＞50%。結(jié)論葫蘆鉆水、醇提取物具有一定的抗腫瘤作用。

【關(guān)鍵詞】葫蘆鉆；抗腫瘤

Abstract:ObjectiveToinvestigatetheantitumoractivityofYaoHerb--Huluzuan.MethodsTheantitumoractivityinvitroagainsthumancancercelllines--hepatocarcinomaBEL-7404wasdeterminedbyMTTmethod.Theantitumoractivityinvivowasevaluatedbytheprolongationratiosoflife-spanandtheinhibitionratiosofthetumorweightoftransplantedmouseS180、H22solidandascitescarcinomamodelfedonextractedsubstancesfromHuluzuan.ResultsWhenthedoseofwater,alcoholextractedsubstancesfromHuluzuanwas20mg/ml,theinhibitionratiosofthetumorcellinvitrowasinexcessof50%.Bothmaximumtolerateddoseofwater,alcoholextractedsubstancesfromHuluzuanwere150g/kg.Inthreetimesoftheexperiment,prolongationratiosoflifespanathighandlowdoseofwater,alcoholextractedsubstancesexceed50%onmiceS180ascitescarcinomamodelinaverage,andathighdoseofalcoholextractedsubstancesexceeded50%onmiceH22ascitescarcinomamodelinaverage,inhibitionratiosathighandlowdoseofwater、alcoholextractedsubstancesexceed30%onmiceS180solidcarcinomamodelandexceed50%onmiceH22solidcarcinomamodelinaverage.ConclusionWater,alcoholextractedsubstancesfromHuluzuanhasantitumoractivitytosomeextent.

Keywords:Huluzuan；Antitumor

葫蘆鉆為天南星科植物石柑子Pothoschinensis(Raf.)Merr.的全草，為廣西瑤醫(yī)老班藥“五虎、九牛、十八鉆、七十二風(fēng)”之一，瑤族傳統(tǒng)治癌“打藥”［1］，具有理氣止痛，清熱解毒的功效。根據(jù)民間用藥經(jīng)驗，開展抗腫瘤作用實驗研究，作者通過體內(nèi)藥效實驗和體外藥效實驗評價葫蘆鉆提取物的抗腫瘤效果。

1材料

【摘要】從非特異性免疫及特異性免疫兩個方面對中西醫(yī)結(jié)合抗腫瘤機制進行了綜述。

【關(guān)鍵詞】中西醫(yī)結(jié)合抗腫瘤免疫學(xué)

在眾多的對腫瘤治療方法的探索中，各種治療方式的結(jié)果大多不如預(yù)期有效［1］，而傳統(tǒng)的化療藥具有明顯的毒副作用及耐藥性，從天然產(chǎn)物中提取可以用于臨床的有效成分激發(fā)機體免疫系統(tǒng)的活性一直是多年來學(xué)術(shù)界感興趣的重要研究課題。我國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)不但具有獨特的優(yōu)勢，而且與西醫(yī)相比，中醫(yī)更重視整體認(rèn)識疾病發(fā)生的條件，強調(diào)“治未病”。中醫(yī)認(rèn)識到正虛是疾病的重要內(nèi)因，即所謂“邪之所湊，其氣必虛”。正虛學(xué)說已被現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)識和承認(rèn)。西醫(yī)比較能融合現(xiàn)代科學(xué)成就，認(rèn)識病癥具體、深入。越來越多的意向認(rèn)為中西醫(yī)應(yīng)當(dāng)互相補充，但如何互相補充又是擺在人們面前的一個迫切需要解決的難題。我們認(rèn)為，這種結(jié)合或補充，不但在于臨床實踐中的摸索，而且還應(yīng)同時解決理論上的問題，只有這樣才能被國際醫(yī)學(xué)界認(rèn)可。現(xiàn)將中西醫(yī)結(jié)合抗腫瘤的免疫學(xué)機制研究綜述如下。

1對非特異性免疫抗腫瘤的影響

機體免疫機能狀態(tài)的異常及腫瘤免疫逃逸是腫瘤發(fā)生的重要原因，同時腫瘤細(xì)胞及其產(chǎn)生的腫瘤性免疫抑制因子往往導(dǎo)致荷瘤機體免疫機能低下，由于腫瘤細(xì)胞抗原性較弱或抗原調(diào)變等因素導(dǎo)致腫瘤特異性免疫往往難以奏效，因此非特異性免疫在機體抗腫瘤免疫方面發(fā)揮著重要作用。機體的非特異性免疫包括單核巨噬細(xì)胞及NK細(xì)胞所構(gòu)成的機體腫瘤免疫監(jiān)視中的第一道防線。

1.1中西醫(yī)聯(lián)合對巨噬細(xì)胞抗腫瘤的影響欖香烯是從姜科植物溫郁金中提取的抗癌有效成分。將其用專利方法制備出Hca-F欖香烯復(fù)合瘤苗HSP70（HSP70HTCV），分析其對小鼠腹腔或脾臟巨噬細(xì)胞功能的影響及抗免疫作用的機制，發(fā)現(xiàn)HSP70HTCV免疫小鼠脾臟巨噬細(xì)胞分泌TNF的能力高于HSP70BCG免疫小鼠的脾臟巨噬細(xì)胞，且巨噬細(xì)胞吞噬中性紅的能力亦明顯增強，由此得出結(jié)論［2］，HSP70HTCV免疫誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞對腫瘤細(xì)胞有更強的殺傷活性。

網(wǎng)絡(luò)上隨機發(fā)放問卷，本次調(diào)研采取網(wǎng)絡(luò)調(diào)研的方法。然后收集整理，進行資料的分析整理。問卷的設(shè)計根據(jù)正常的人們對藥品的認(rèn)知過程來排列問題。本次調(diào)研主要研究了抗腫瘤藥的流通渠道、藥品性質(zhì)和消費者的主要購買依據(jù)三方面，這三方面可以從消費者角度反映出目前抗腫瘤藥品市場的主要消費情況，如抗腫瘤藥品通過哪些渠道流向消費者手中，消費者對腫瘤疾病的認(rèn)識和用藥態(tài)度，消費者認(rèn)可的劑型是哪幾種，而其中消費者的主要購藥依據(jù)將是醫(yī)藥企業(yè)最為關(guān)注的下面從具體的調(diào)研數(shù)據(jù)方面逐一分析。

惡性腫瘤的預(yù)防、診斷和治療等方面取得了不少成功的經(jīng)驗，惡性腫瘤是當(dāng)今嚴(yán)重危害人類健康和生命的疾病之一。盡管人類經(jīng)過了近百年的努力。但全世界每年仍有900萬新發(fā)癌癥患者，每年有500萬人死于癌癥。國是一個癌癥多發(fā)性國家，現(xiàn)有260萬癌癥患者、每年新發(fā)病患者180萬、死亡人數(shù)140萬。癌癥仍然是給人類帶來災(zāi)難的頭號殺手。開發(fā)研究生產(chǎn)療效好、廣譜性強、副作用小的抗癌藥物仍然是醫(yī)學(xué)界的重要課題。

上世紀(jì)60年代初期已有部分品種開始生產(chǎn)銷售。40多年來，國抗腫瘤藥物的研究開發(fā)始于上世紀(jì)50年代末期。國抗腫瘤藥物生產(chǎn)已由個別品種發(fā)展到系列化產(chǎn)品，研發(fā)和銷售也有了長足的進步。特別是近十年來，研發(fā)(包括仿制)及市場營銷上的成就令人矚目。

國抗腫瘤藥物生產(chǎn)企業(yè)已有近百家(包括中藥制劑生產(chǎn)廠家)其中，目前。原料藥廠20多家，制劑廠和中藥廠有60多家。迄今為止，國抗腫瘤藥物已發(fā)展到七大類160多個品種。世界衛(wèi)生組織XX年4月公布的22個基本抗腫瘤藥物，國全部都可以生產(chǎn)。國年產(chǎn)抗腫瘤藥物30多噸，生產(chǎn)企業(yè)主要分布在江蘇、浙江、廣東、山東、上海等地。但產(chǎn)品仍不能滿足日益增長的臨床需求。總體說來，抗腫瘤藥物市場需求大于供應(yīng)。

解患腫瘤病人家庭的抗腫瘤藥品的消費情況和大眾對抗腫瘤藥品的態(tài)度，所以。一方面，有助于企業(yè)從消費者角度研究細(xì)分的抗腫瘤用藥情況;另一方面，有助于醫(yī)藥生產(chǎn)企業(yè)和流通企業(yè)更好地了解目標(biāo)消費者的需求，并進一步了解抗腫瘤藥品的市場競爭情況，從而使企業(yè)能“對癥下藥”把更多、更好的藥品快速銷售到消費者手中。

來了解抗腫瘤藥品市場的競爭狀況和消費者對抗腫瘤藥的需求喜好及對醫(yī)藥企業(yè)的期望。由此使恒瑞醫(yī)藥能很好的把握消費者的心態(tài)，本次調(diào)研主要是為了通過對消費者對抗腫瘤藥的認(rèn)識、解和用藥態(tài)度調(diào)查。掌握抗腫瘤用藥市場的發(fā)展趨勢，從而采取有力的合理的措施來推廣其主打產(chǎn)品—艾恒。

1中草藥研究動態(tài)

1.1去甲斑蝥素范躍祖等觀察了去甲斑蝥素(NCTD)對膽囊癌腫瘤血管生成的抑制作用及其機制NCTD可有效抑制、破壞膽囊癌腫瘤血管生成,進而抑制膽囊癌的增殖與生長。其機制可能與NCTD誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡、直接破壞血管內(nèi)皮細(xì)胞、改變血管內(nèi)皮細(xì)胞PCNA/凋亡比、下調(diào)血管生成因子VEGF、Ang2和上調(diào)血管抑制因子TSP、TIMP2表達有關(guān)［1］。

1.2小檗堿小檗堿(berberine)為黃連(毛茛科植物)、黃柏等(蕓香科植物)植物的一種生物堿,作為抗菌藥已有悠久的歷史。初步研究表明它在體內(nèi)、體外對多種腫瘤細(xì)胞具有較強的抑制和殺傷作用［2］。婁金麗等研究小檗堿對bFGF活化人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)增殖、細(xì)胞周期及細(xì)胞凋亡的影響,探討其對腫瘤新生血管形成作用的機制。方法:MTT法檢測小檗堿對bFGF活化HUVEC的增殖作用;流式細(xì)胞儀檢測用藥后細(xì)胞周期的變化;激光共聚焦掃描顯微鏡下觀察藥物對細(xì)胞形態(tài)、細(xì)胞內(nèi)鈣的影響;流式細(xì)胞儀檢測小檗堿對細(xì)胞凋亡的作用。結(jié)果:小檗堿能明顯抑制bFGF活化的HUVEC增殖,且存在劑量依賴關(guān)系;使細(xì)胞在G0G1期的比例明顯增多;使細(xì)胞核濃縮、甚至裂解成碎塊,同時使細(xì)胞內(nèi)鈣增多;并誘導(dǎo)活化HUVEC發(fā)生細(xì)胞凋亡。結(jié)論:小檗堿可能通過將bFGF活化的HUVEC細(xì)胞周期阻滯在G0G1期,抑制活化HUVEC的增殖;誘導(dǎo)活化HUVEC細(xì)胞發(fā)生凋亡等機制,阻止新生血管形成,發(fā)揮其抗腫瘤作用［3］。

1.3白藜蘆醇白藜蘆醇是廣泛存在于葡萄、花生和多種藥用植物中的一種多酚類化合物，目前至少已經(jīng)在21個科，31個屬的72種植物中發(fā)現(xiàn)了白藜蘆醇。早期研究發(fā)現(xiàn)，白藜蘆醇具有保護心血管，調(diào)節(jié)血脂、抗病原微生物、護肝等多種生物學(xué)作用。自從Jang等于1997年系統(tǒng)報道了白藜蘆醇的抗腫瘤作用后，迄今已發(fā)現(xiàn)白藜蘆醇能通過多種途徑抑制腫瘤細(xì)胞的起始，促進，發(fā)展三個階段，而且可以抑制腫瘤血管形成。1.對內(nèi)皮細(xì)胞的作用，能夠直接抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞的增生，遷移及誘導(dǎo)其凋亡，從而抑制血管的生成。2.對血管生長因子及受體的調(diào)控，可以通過下調(diào)各種血管生成促進因子及受體的水平，近而抑制血管的形成。3.對基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）的影響，白藜蘆醇能夠直接抑制MMP2的表達及活性，同時體外實驗發(fā)現(xiàn)白藜蘆直接抑制HUVEC細(xì)胞分泌MMP2溶解明膠的活性，從而抑制細(xì)胞的生長，管形的形成.4.抗凝作用，研究表明，白藜蘆醇可以通過抗凝作用阻止血管的生成。5.對黏附分子的影響，白藜蘆醇抑制腫瘤壞死因子（TNF）激活的人HUVEC和人單核細(xì)胞產(chǎn)生ICAM1及VCAM1，降低細(xì)胞之間的黏附能力。6.對環(huán)氧化酶的影響，白藜蘆醇使腫瘤組織環(huán)氧化酶2（COX2）MRNA的表達減少，從而抑制腫瘤的血管的形成。7.對INOS的影響，研究表明白藜蘆醇通過抑制巨噬細(xì)胞中脂多糖誘導(dǎo)的NFKB而減少胞質(zhì)蛋白穩(wěn)定的MRNA水平［4］。

1.4姜黃姜黃主要活性成分是姜黃色素和揮發(fā)油,具有抗炎、抗氧化、降血脂和抗腫瘤等多種作用。近年來,姜黃活性成分的抗腫瘤作用引起了廣泛關(guān)注。姜黃素、脫甲氧基姜黃素和雙脫甲氧基姜黃素是姜黃中的三種主要色素,混稱姜黃色素。李劍明等研究證明，3種姜黃色素單體能夠抑制內(nèi)皮細(xì)胞生長,表明抑制血管生成是其抗腫瘤的主要機制之一［5］。

1.5逆癌酮以往研究發(fā)現(xiàn)丹參酮具有抗腫瘤作用。逆癌酮是以丹參酮為主要成分的中藥制劑。作者以逆癌酮對A549細(xì)胞系和PLA801D細(xì)胞系惡性表型的逆轉(zhuǎn)作用研究結(jié)果表明,在體外狀態(tài)下,逆癌酮可下調(diào)腫瘤細(xì)胞VEGF、CD44V6的表達水平,上調(diào)PLA801D細(xì)胞的nm23H1的表達水平。提示逆癌酮有抗腫瘤血管生成效應(yīng)［6］。

1腫瘤特異性免疫機制及腫瘤的免疫逃逸機制腫瘤在機體內(nèi)能引發(fā)體液免疫應(yīng)答和細(xì)胞免疫應(yīng)答，而以后者為主.腫瘤抗原在細(xì)胞內(nèi)加工成肽段后與細(xì)胞表面的主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ(majorhistocompatibilitycomplex,MHCⅠ)類分子結(jié)合并呈遞給CD8+細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞，或先從腫瘤細(xì)胞上脫落，再由抗原提呈細(xì)胞攝取、加工成肽段后與表面MHCⅡ類分子結(jié)合并呈遞給CD4+輔助性T淋巴細(xì)胞，進而誘發(fā)機體的抗腫瘤細(xì)胞免疫應(yīng)答.值得注意的是CD4+T淋巴細(xì)胞和CD8+T淋巴細(xì)胞的激活都需要MHC抗原肽復(fù)合物和免疫共刺激分子的協(xié)同刺激作用［1］，而共刺激分子的缺失正是腫瘤引發(fā)的機體外周免疫耐受的可能機制之一.腫瘤由于其極大的異質(zhì)性和遺傳不穩(wěn)定性，在機體環(huán)境長時間的免疫選擇壓力下，會啟動一系列的免疫逃避機制，對抗機體的抗腫瘤免疫反應(yīng).這些機制分別針對T細(xì)胞對腫瘤的識別階段和效應(yīng)階段，包括腫瘤抗原的丟失、MHCⅠ類分子表達下調(diào)、抗原加工缺陷、表達干擾細(xì)胞毒作用的蛋白酶及表達FasL等［2］.

2腫瘤疫苗的設(shè)計策略

2.1總體思路針對腫瘤抗原在機體內(nèi)免疫原性下降，造成特異性細(xì)胞免疫激活不足，外周免疫耐受的狀況，腫瘤疫苗設(shè)計策略的總體思路是應(yīng)用各種技術(shù)，增強免疫系統(tǒng)對腫瘤抗原的識別能力，改善免疫微環(huán)境，引發(fā)有力的特異性抗腫瘤細(xì)胞免疫，阻止腫瘤進展，最終消除腫瘤.

2.2腫瘤細(xì)胞疫苗腫瘤細(xì)胞疫苗是將整個腫瘤細(xì)胞作為抗原導(dǎo)入患者體內(nèi)，誘導(dǎo)特異性的抗腫瘤免疫應(yīng)答.由于腫瘤細(xì)胞帶有腫瘤的全部抗原，無需考慮分離腫瘤特異性抗原（tumorspecificantigen,TSA），而且由于自體腫瘤細(xì)胞具有和正常組織相同的人類白細(xì)胞抗原，不會引發(fā)機體的免疫排斥反應(yīng)，因此被認(rèn)為是理想的腫瘤疫苗方案.但是自體腫瘤組織來源十分有限，并且考慮到TSA的表達具有一定的組織特異性，因此這種方法的應(yīng)用受到了限制［3］.后來，人們開始使用人工培養(yǎng)的同種異體腫瘤細(xì)胞系進行腫瘤疫苗的研究.不同腫瘤細(xì)胞的混合能夠提供一系列的TSA，有利于增加腫瘤疫苗的免疫原性，減小其發(fā)生抗原丟失的幾率［2］.但是，單獨使用自體或異體的腫瘤細(xì)胞難以產(chǎn)生足夠強度的免疫應(yīng)答，免疫佐劑的使用極大地改善了這種情況.隨著基因工程的進展，人們開始對腫瘤細(xì)胞進行基因修飾，將編碼免疫共刺激分子如CD80，CD86的基因，導(dǎo)入腫瘤細(xì)胞中，為T細(xì)胞活化提供第二信號，有效地打破了腫瘤的外周免疫耐受.近年來，也有人將編碼一些細(xì)胞因子如IL2，IL12，粒巨噬細(xì)胞集落刺激因子（granulocytcmacrohagecolonystimulatihyfactor,GMCSF）等的基因?qū)肽[瘤細(xì)胞，期望通過細(xì)胞因子蛋白的表達，改善腫瘤組織局部免疫微環(huán)境，增強T細(xì)胞的抗腫瘤免疫效應(yīng)［4］.然而，近些年來臨床實驗表明，即使在實驗中能夠誘發(fā)滿意免疫反應(yīng)的腫瘤細(xì)胞疫苗，在轉(zhuǎn)化成臨床有效的治療性腫瘤疫苗時都遇到了困難.Fifis等［5］的研究發(fā)現(xiàn)，大鼠結(jié)腸癌細(xì)胞系經(jīng)體外培養(yǎng)后免疫同源小鼠，引發(fā)了免疫反應(yīng)和腫瘤保護效應(yīng).然而，當(dāng)他們對荷瘤小鼠進行同樣處理時，卻大大促進了腫瘤的生長，提示腫瘤細(xì)胞能夠通過一系列機制抑制機體的抗腫瘤免疫反應(yīng)，包括分泌免疫抑制因子IL10，腫瘤生長因子β阻止有效的免疫反應(yīng)；分泌血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子，GMCSF等因子活化具有免疫抑制作用的骨髓源性細(xì)胞；激活特異的調(diào)節(jié)性CD4+CD25+T細(xì)胞以下調(diào)細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞的效應(yīng)等.

2.3腫瘤抗原疫苗腫瘤能夠引起機體特異性免疫反應(yīng)的現(xiàn)象引發(fā)了對腫瘤抗原的研究.腫瘤抗原包括多個層次：完整的蛋白質(zhì)分子、抗原肽及純化的DNA.關(guān)于腫瘤DNA疫苗，下文將另行討論.目前將腫瘤抗原分為TSA和腫瘤相關(guān)抗原（tumorassociated,TAA）.TSA是指只存在于腫瘤細(xì)胞，而TAA并非腫瘤細(xì)胞特有的抗原，只是在發(fā)生腫瘤時此類抗原的表達明顯上調(diào).Tabi等［2］認(rèn)為，腫瘤抗原必須在全部或大多數(shù)患有相同腫瘤患者的大部分腫瘤細(xì)胞中呈普遍的高表達狀態(tài).他將腫瘤抗原分為5類：①突變抗原；②腫瘤細(xì)胞過度表達抗原；③癌睪抗原;④組織特異性分化抗原；⑤病毒抗原.

單獨應(yīng)用腫瘤抗原蛋白存在免疫原性差的問題，這是由于腫瘤細(xì)胞可通過抗原、HLA缺失等機制發(fā)生逃逸.劉宏利等［6］結(jié)合了肽疫苗和DNA疫苗各自的特點，以P815腫瘤細(xì)胞的CTL表位（P815A3543）為模型，合成該表位加多聚賴氨酸的顆粒性多肽，并制備含有編碼此表位和GMCSF基因的表達質(zhì)粒，制成了新型的顆粒性肽DNA復(fù)合疫苗，這種疫苗利于APC的攝取加工，可誘導(dǎo)有效的CTL應(yīng)答，從而預(yù)防小鼠致命性P815腫瘤細(xì)胞攻擊，并可部分根除腫瘤.

【摘要】抗腫瘤血管生成為腫瘤的治療提供了新的契機，中藥均為有效的血管生成抑制劑，具有廉價無毒等優(yōu)點，隨著其抗腫瘤，血管生成等機制方面研究的不斷深入，中草藥極有希望成為理想而全面的癌癥預(yù)防和治療藥物。

【關(guān)鍵詞】腫瘤血管抑制因子綜述

近年來中藥或有效成分抑制腫瘤血管生成研究非常活躍,也具有明顯的廣度和深度。

1中草藥研究動態(tài)

1.1去甲斑蝥素范躍祖等觀察了去甲斑蝥素(NCTD)對膽囊癌腫瘤血管生成的抑制作用及其機制NCTD可有效抑制、破壞膽囊癌腫瘤血管生成,進而抑制膽囊癌的增殖與生長。其機制可能與NCTD誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡、直接破壞血管內(nèi)皮細(xì)胞、改變血管內(nèi)皮細(xì)胞PCNA/凋亡比、下調(diào)血管生成因子VEGF、Ang2和上調(diào)血管抑制因子TSP、TIMP2表達有關(guān)［1］。

1.2小檗堿小檗堿(berberine)為黃連(毛茛科植物)、黃柏等(蕓香科植物)植物的一種生物堿,作為抗菌藥已有悠久的歷史。初步研究表明它在體內(nèi)、體外對多種腫瘤細(xì)胞具有較強的抑制和殺傷作用［2］。婁金麗等研究小檗堿對bFGF活化人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)增殖、細(xì)胞周期及細(xì)胞凋亡的影響,探討其對腫瘤新生血管形成作用的機制。方法:MTT法檢測小檗堿對bFGF活化HUVEC的增殖作用;流式細(xì)胞儀檢測用藥后細(xì)胞周期的變化;激光共聚焦掃描顯微鏡下觀察藥物對細(xì)胞形態(tài)、細(xì)胞內(nèi)鈣的影響;流式細(xì)胞儀檢測小檗堿對細(xì)胞凋亡的作用。結(jié)果:小檗堿能明顯抑制bFGF活化的HUVEC增殖,且存在劑量依賴關(guān)系;使細(xì)胞在G0G1期的比例明顯增多;使細(xì)胞核濃縮、甚至裂解成碎塊,同時使細(xì)胞內(nèi)鈣增多;并誘導(dǎo)活化HUVEC發(fā)生細(xì)胞凋亡。結(jié)論:小檗堿可能通過將bFGF活化的HUVEC細(xì)胞周期阻滯在G0G1期,抑制活化HUVEC的增殖;誘導(dǎo)活化HUVEC細(xì)胞發(fā)生凋亡等機制,阻止新生血管形成,發(fā)揮其抗腫瘤作用［3］。