多基因范文10篇

鎳是人類生產(chǎn)、生活中的重要金屬和人體必需微量元素，同時(shí)也是一種多系統(tǒng)、多器官、多細(xì)胞毒物。鎳化合物已被確認(rèn)為人類確證致癌物。許多報(bào)道認(rèn)為：鎳進(jìn)入細(xì)胞后主要通過(guò)自由基作用、DNA-蛋白質(zhì)交聯(lián)及堿基甲基化等遺傳、非遺傳方式致癌［1-5］。我們就鎳致癌過(guò)程中的多基因變異研究進(jìn)行回顧，為鎳的分子致癌機(jī)制研究提供參考。

一、鎳與原癌基因的激活

就其本質(zhì)而言，原癌基因是一類編碼關(guān)鍵性調(diào)控蛋白的正常細(xì)胞基因，對(duì)細(xì)胞的正常生長(zhǎng)有極其重要的作用。當(dāng)其發(fā)生突變或異常表達(dá)時(shí)，就成為導(dǎo)致細(xì)胞惡變的癌基因［6］。在鎳的致癌機(jī)制中，研究最多的是c-myc、c-ras、c-jun、c-fos癌基因和NFκB蛋白基因。

1.myc基因：myc基因表達(dá)DNA結(jié)合蛋白，分布于核內(nèi)，參與RNA的加工、細(xì)胞周期調(diào)節(jié)及細(xì)胞分化。正常細(xì)胞中通常myc只在細(xì)胞分裂早期增加，而在許多癌細(xì)胞中均見(jiàn)到其異常表達(dá)。Sunderman等［7］在雄性Fisher-344大鼠單側(cè)腎臟注射20mgαNi3S2后，觀察到腎癌及多種肉瘤，腫瘤細(xì)胞中染色體畸變多見(jiàn)，DNA斑點(diǎn)雜交和圖像分析表明：N-myc基因表達(dá)明顯增強(qiáng)，超出正常細(xì)胞6倍。說(shuō)明Ni3S2明顯誘導(dǎo)myc原癌基因的擴(kuò)增。

2.ras癌基因：ras癌基因由4個(gè)外顯子組成，編碼p21蛋白，它定位于細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)，其功能與G蛋白類似，是細(xì)胞內(nèi)重要的信息傳導(dǎo)分子。多數(shù)癌細(xì)胞ras通道被不正常激活。Haugen［8］及Kawanishi等［9］先后發(fā)現(xiàn)鎳致癌與ras癌基因有關(guān)。Kathleen等［10］用硫化鎳和硫化亞鎳誘發(fā)大鼠腎肉瘤后，用PCR方法在腎肉瘤細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)k-ras基因的第12密碼子存在GGT→GTT的顛換，而其他密碼子未發(fā)現(xiàn)突變現(xiàn)象。說(shuō)明ras基因的第12密碼子是鎳的選擇性攻擊位點(diǎn)，ras原癌基因由于點(diǎn)突變而激活。此外，還發(fā)現(xiàn)ras基因被不正常激活后，腫瘤發(fā)生的潛伏期縮短，這與ras表達(dá)蛋白的功能有關(guān)。因?yàn)閜21蛋白是調(diào)控細(xì)胞生長(zhǎng)的重要分子，ras過(guò)度表達(dá)，細(xì)胞生長(zhǎng)加速，故潛伏期變短。

3.AP-1(fos/jun)癌基因：c-fos和c-jun癌基因表達(dá)產(chǎn)物為核轉(zhuǎn)錄因子，是信息通路的核內(nèi)部分。DNA的轉(zhuǎn)錄和蛋白質(zhì)的表達(dá)均與之有關(guān)。AP-1癌基因是c-fos和c-jun癌基因的雜合二聚體復(fù)合物，也具有上述性質(zhì)［11］，許多腫瘤與之激活有關(guān)。Konstantin等［12］發(fā)現(xiàn)鎳誘導(dǎo)c-fos和c-jun基因的表達(dá)。他們用氯化鎳持續(xù)染毒BALB/c3T3細(xì)胞，結(jié)果該細(xì)胞株獲得了對(duì)濃度高達(dá)200μmol/L鎳的抵抗力(故稱B200細(xì)胞)。作者研究了鎳對(duì)B200細(xì)胞和野生型3T3細(xì)胞AP-1的DNA結(jié)合活力，結(jié)果發(fā)現(xiàn)野生型3T3細(xì)胞AP-1的DNA結(jié)合力比B200細(xì)胞強(qiáng)。由于AP-1基因是c-fos和c-jun的二聚體，故作者隨后用Northernblot法分析了c-fos和c-jun的表達(dá)，取得了與上述一致的結(jié)果。c-jun和c-fos在野生型3T3細(xì)胞中表達(dá)要強(qiáng)，而B(niǎo)200細(xì)胞表達(dá)很低。說(shuō)明鎳能誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子AP-1(jun/fos)的表達(dá)。

摘要:探究表明，胃粘膜癌變過(guò)程中存在多基因的變化，隨著病變進(jìn)展基因的異常和積累也進(jìn)一步發(fā)展。本文綜述了胃粘膜癌變過(guò)程中表型和基因變化的關(guān)系，以有助于加深對(duì)胃癌發(fā)病機(jī)制分子生物學(xué)變化的熟悉。

正常胃粘膜細(xì)胞癌變時(shí)存在表型的逐步變化，同時(shí)伴隨基因的改變，且不同病因引起的胃粘膜細(xì)胞的胃粘膜細(xì)胞癌變時(shí)機(jī)制亦不同。本文就近年來(lái)胃粘膜細(xì)胞癌過(guò)程中基因的變化作一綜述。

1原癌基因

c-met原癌基因位于染色體7q31，編碼分子量190kD的跨膜糖蛋白，屬酪氨酸激酶生長(zhǎng)因子受體家族成員。c-met蛋白作為肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子的受體，和細(xì)胞的增殖能力有關(guān)。Tsuji等[1用鹽酸造成鼠胃粘膜炎癥、潰瘍等損傷后，發(fā)現(xiàn)伴隨胃粘膜的修復(fù)過(guò)程有c-met蛋白表達(dá)升高，結(jié)合體外培養(yǎng)時(shí)肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子可促進(jìn)胃粘膜上皮細(xì)胞形成腺管和分支結(jié)構(gòu)，提示c-met表達(dá)的增高和胃粘膜上皮細(xì)胞的增生、移行、聚集及腺管形成有關(guān)，參和胃粘膜受損后的修復(fù)過(guò)程，反映了細(xì)胞旺盛的增殖養(yǎng)大狀態(tài)。Soman等[2利用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)胃癌癌前病變各期胃粘膜細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)淺表性胃炎（2/4）、萎縮性胃炎（5/7）、腸化生（2/5）、胃癌（1/2）各期均有tpr-metmRNA的高表達(dá)。tpr-met重排基因是c-met原癌基因活化的一種形式。c-met常在慢性胃炎胃粘膜的腺頸部有強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)，腺頸部干細(xì)胞的分裂，所以認(rèn)為，c-met的激活及表達(dá)增高出現(xiàn)于胃粘膜病變的早期——在胃粘膜損傷后的炎癥反應(yīng)時(shí)即有過(guò)表達(dá)。在此情況下，胃粘膜處于旺盛的增殖狀態(tài)，DNA的合成和分裂活躍，易受各種致癌因子的損傷，發(fā)生染色體基因結(jié)構(gòu)和功能的改變，使細(xì)胞具備了向惡性轉(zhuǎn)化的條件。

人類的ras原癌基因家庭包括同源的Hras、ki-ras和N-ras，它們分別定位于不同的染色體片斷上，但均為編碼分子量為21kD的十分相似的P21蛋白，和細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)傳遞、增殖、分化有關(guān)。ras原癌基因可因突變、擴(kuò)增等而激活，過(guò)多的向細(xì)胞內(nèi)傳增殖信號(hào)，促進(jìn)細(xì)胞分裂、增殖。Czerniak等[3發(fā)現(xiàn)，在胃粘膜腸化生、不典型增生中均有P21蛋白的明顯增多，腸型胃癌P21蛋白的表達(dá)量高于彌慢型胃癌。同時(shí)，Teh等[14發(fā)現(xiàn)，正常十二指腸粘膜中存在P21蛋白的過(guò)表達(dá)，而腸化生、異型增生、腸型胃癌等胃粘膜組織學(xué)上或多或少具有腸型上皮的特征。由此認(rèn)為P21蛋白的過(guò)表達(dá)反映了具有腸型上皮分化特征的細(xì)胞和組織的存在，是胃粘膜柱狀上皮向腸上皮分化的結(jié)果，可以作為監(jiān)測(cè)胃粘膜病變發(fā)生的一個(gè)早期標(biāo)志。

原癌基因c-myc位于3號(hào)染色體，編碼產(chǎn)生分子量為60kD的核內(nèi)磷蛋白，c-myc基因可因突變、擴(kuò)增、重排而激活，表達(dá)增加。c-myc蛋白對(duì)腫瘤的生長(zhǎng)具有雙重調(diào)節(jié)功能，當(dāng)有生長(zhǎng)因子參和時(shí)，c-myc蛋白可促進(jìn)癌細(xì)胞增殖，生長(zhǎng)因子缺乏時(shí)，c-myc蛋白可誘發(fā)細(xì)胞凋亡。Ciclitira等[5發(fā)現(xiàn)，腸化生、異型增生胃粘膜組織中也有c-myc的過(guò)表達(dá)，在伴有炎癥的胃粘膜組織中也有c-myc的異常表達(dá)、認(rèn)為c-myc的過(guò)表達(dá)參和胃粘膜細(xì)胞的增殖，提示c-myc表達(dá)增高發(fā)生于胃癌癌前病變的早期，但其在胃癌發(fā)生發(fā)展中的功能如何有待進(jìn)一步探究。

豬偽狂犬病免疫防制技術(shù)探討

豬偽狂犬病是最古老的豬病之一，世界范圍內(nèi)的獸醫(yī)工作者對(duì)此病進(jìn)行長(zhǎng)期、深入而全面的研究，人們對(duì)該病的認(rèn)識(shí)已經(jīng)相當(dāng)清楚，防制技術(shù)也很成熟。該病在我國(guó)的流行是最近十年的事情，在防制工作中，還有一些問(wèn)題存在爭(zhēng)議。現(xiàn)就其中爭(zhēng)議比較多、比較集中的問(wèn)題提出來(lái)，與同仁共同探討。

1．滅活疫苗和弱毒草疫苗的應(yīng)用。四、五年前，這是一個(gè)爭(zhēng)論最多的問(wèn)題,主要涉及以下兩方面：

1．1安全性。業(yè)界人士認(rèn)為滅活疫苗很安全，而弱毒疫苗可能存在散毒和毒力返強(qiáng)等安全隱患。事實(shí)上，早在此前弱毒疫苗在歐美國(guó)家已經(jīng)使用了數(shù)十年，證明其很安全。現(xiàn)在，大多數(shù)豬場(chǎng)已經(jīng)接受了使用弱毒疫苗，幾年的實(shí)踐也證明了弱毒疫苗的安全性。

1．2免疫效力。一般來(lái)說(shuō)，滅活疫苗能激發(fā)比弱毒疫苗更高的抗體。因此一些業(yè)內(nèi)人士據(jù)此認(rèn)為前者比后者的免疫效果好。顯然，僅僅根據(jù)抗體水平的高低來(lái)判斷疫苗的效力不夠全面，因?yàn)闄C(jī)體依賴多種免疫機(jī)制抵抗病毒的感染，主要有干擾素、體液免疫、細(xì)胞免疫、局部免疫和超感染占位競(jìng)爭(zhēng)等。滅活疫苗和弱毒疫苗在上述機(jī)制中所發(fā)揮的效力有較大差別，見(jiàn)表：

免疫機(jī)制

細(xì)胞癌變及惡性腫瘤的形成是多因素、多階段、多基因變異所致的結(jié)果。在食管癌的發(fā)生和發(fā)展過(guò)程中也有許多癌基因和抑癌基因發(fā)生結(jié)構(gòu)和功能的變化，出現(xiàn)失活和異常表達(dá)n0]。目前在腫瘤發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中已廣泛開(kāi)展應(yīng)用分子生物學(xué)技術(shù)研究癌基因的突變狀況。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)一單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析(PCR—SSCP)法檢測(cè)食管鱗狀細(xì)胞癌組織中P53抑癌基因的突變，旨在研究1：''''53基因突變與腫瘤的分化程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況的關(guān)系。

1資料與方法

1．1一般資料

選取我院2009—2010年食管鱗狀細(xì)胞癌患者36例，男25例，女11例；年齡39-75歲，中位年齡59歲；其中有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移21例。

1．2方法

1．2．1提取DNA：取手術(shù)切除標(biāo)本，取組織蠟塊切片10片，厚度為1O一20m，放入試管中，用酚氯仿法提取DNA。試劑由達(dá)柯公司提供。

【摘要】為開(kāi)展醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)的課程思政教學(xué)，在課程思政育人目標(biāo)、教學(xué)內(nèi)容和教學(xué)方法上進(jìn)行有效的設(shè)計(jì)，達(dá)到在課程教學(xué)同時(shí)樹(shù)德育人的培養(yǎng)目的。

關(guān)鍵詞：醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)；課程思政；教學(xué)設(shè)計(jì)

“醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)”是用人類遺傳學(xué)的理論和方法來(lái)研究遺傳病應(yīng)用于醫(yī)學(xué)實(shí)踐，從親代傳至子代的特點(diǎn)和規(guī)律、起源和發(fā)生、病理機(jī)制、病變過(guò)程及其與臨床關(guān)系的學(xué)科。“醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)”是一門(mén)由遺傳病這一紐帶把遺傳學(xué)和醫(yī)學(xué)結(jié)合起來(lái)的學(xué)科，從遺傳學(xué)角度系統(tǒng)地描述了疾病的病因、發(fā)病機(jī)制、病變過(guò)程。“醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)”課程是基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、法醫(yī)學(xué)等醫(yī)學(xué)相關(guān)專業(yè)本科生的專業(yè)必修課。教育部明確提出要全面推進(jìn)高校“課程思政”建設(shè)。對(duì)于充滿人文精神的醫(yī)學(xué)科學(xué)來(lái)說(shuō)，理想信念的教育和價(jià)值觀的引領(lǐng)決定了我們培養(yǎng)什么樣的醫(yī)學(xué)人才。培養(yǎng)健康中國(guó)需要的創(chuàng)新型、應(yīng)用型、復(fù)合型卓越本科醫(yī)學(xué)人才是醫(yī)學(xué)教育的目標(biāo)，這一目標(biāo)要求醫(yī)學(xué)課程的建設(shè)和教學(xué)不僅僅是在專業(yè)上的突破和教學(xué)方法上的創(chuàng)新，而是在專業(yè)教學(xué)的同時(shí)塑造醫(yī)學(xué)生的人生觀、價(jià)值觀和榮辱觀，夯實(shí)醫(yī)學(xué)生成才成長(zhǎng)的德育基礎(chǔ)，促進(jìn)醫(yī)學(xué)生人文素質(zhì)的提高和發(fā)展。作為醫(yī)學(xué)教育的重要專業(yè)課程，“醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)”如何結(jié)合專業(yè)知識(shí)設(shè)計(jì)和開(kāi)展課程的思政教學(xué)成為課程建設(shè)和醫(yī)學(xué)人才培養(yǎng)的重要一環(huán)[1-2]。

1“醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)”課程思政育人目標(biāo)和整體設(shè)計(jì)思路

醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)在課程教學(xué)的頂層設(shè)計(jì)上，把思政培養(yǎng)作為課程教學(xué)的目標(biāo)放在第一位，結(jié)合知識(shí)傳授、能力培養(yǎng)，著力對(duì)大學(xué)生的社會(huì)主義核心價(jià)值觀進(jìn)行培養(yǎng)。在教學(xué)實(shí)施中有目標(biāo)有意識(shí)地對(duì)大學(xué)生開(kāi)展思政教育，將其作為一種學(xué)科思維，提煉出專業(yè)課程中所蘊(yùn)含的“思政基因”，將知識(shí)與之融為一體，轉(zhuǎn)化為具體化、生動(dòng)化的“教學(xué)載體”，達(dá)到課程教書(shū)育人的功能[2-3]。課程設(shè)計(jì)的育人目標(biāo)：（1）愛(ài)國(guó)情懷，民族自豪感：分析中國(guó)對(duì)罕見(jiàn)病、出生缺陷等的防治政策和實(shí)效，了解我國(guó)在這些方面的策略和措施、取得的實(shí)效，領(lǐng)會(huì)我國(guó)醫(yī)療衛(wèi)生政策的優(yōu)越性，造福廣大人民群眾的成果，增強(qiáng)學(xué)生對(duì)我國(guó)相關(guān)情況、政策、成就的了解，培養(yǎng)愛(ài)國(guó)主義和自豪感。講述中國(guó)科學(xué)家的故事，培養(yǎng)民族自豪感，也培養(yǎng)醫(yī)學(xué)生學(xué)習(xí)為人類解除病痛的職業(yè)素養(yǎng)和醫(yī)學(xué)精神。（2）科學(xué)的態(tài)度、探索的精神：梳理醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)發(fā)展歷程中里程碑式知識(shí)點(diǎn)，如豌豆雜交實(shí)驗(yàn)、先天性代謝病的發(fā)現(xiàn)、DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)解析、人體染色體數(shù)目與疾病的發(fā)生、產(chǎn)前診斷、基因編輯技術(shù)等。這些知識(shí)點(diǎn)都是經(jīng)反復(fù)研究、在不斷質(zhì)疑聲中建立起來(lái)的，從而培養(yǎng)醫(yī)學(xué)生嚴(yán)謹(jǐn)求實(shí)的科學(xué)態(tài)度，不斷創(chuàng)新探索的科學(xué)精神。（3）醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)中的倫理問(wèn)題：在傳授專業(yè)知識(shí)的過(guò)程中，明確將專業(yè)性職業(yè)倫理操守和職業(yè)道德教育融為一體，給予其正確的價(jià)值取向引導(dǎo)，以此提升其思想道德素質(zhì)及情商能力。（4）科學(xué)技術(shù)的發(fā)展對(duì)社會(huì)的推動(dòng)作用：從孟德?tīng)柕倪z傳學(xué)說(shuō)到DNA雙螺旋的發(fā)現(xiàn)；從染色體技術(shù)到基因診斷、基因編輯技術(shù)；大數(shù)據(jù)時(shí)代遺傳醫(yī)學(xué)的進(jìn)展，科學(xué)技術(shù)對(duì)社會(huì)具有不可估量的推動(dòng)作用，通過(guò)這一要素的教學(xué)，培養(yǎng)學(xué)生的科學(xué)哲學(xué)觀。（5）人文關(guān)懷，責(zé)任心培養(yǎng)：出生缺陷人群、罕見(jiàn)病人群的醫(yī)療需求以及關(guān)愛(ài)培養(yǎng)學(xué)生作為醫(yī)者的社會(huì)責(zé)任心和人文情懷。

2課程思政教學(xué)與對(duì)應(yīng)知識(shí)點(diǎn)設(shè)計(jì)

【關(guān)鍵詞】抑制性消減雜交技術(shù)；哮喘；嗜酸細(xì)胞；細(xì)胞支架蛋白質(zhì)類

Differentiallyexpressionofgenesassociatedwithcytoskeletalremodelingofperipheralbloodeosinophilsduringasthmaticattack

【Abstract】AIM:Todeterminethedifferentiallyexpressedgenesassociatedwithcytoskeletalremodelingofperipheralbloodeosinophils(EOS)inpatientsduringasthmaticattack.METHODS:DoublestrandedcDNAwasamplifiedfromtotalRNAofEOSatthetimeofasthmaticattackandafterimprovementrespectivelybySuperSMARTcDNASynthesistechology,Suppressionsubtractivehybridization(SSH)andPCRselectdifferentialscreeningtechnologywereusedtodetectdifferentiallyexpressedgenesandthendifferentiallyexpressedgenesweresequenced.HomologyanalysiswasconductedbycomparingthesegenesequencesbasedonGenBankdatabase.RESULTS:HighefficientlyupregulatedanddownregulatedsubtractivecDNAlibrarieswereconstructedsuccessfully;differentialscreeningandhomologyanalysisidentified6differentiallyexpressedgenesassociatedwithcytoskeletalremodeling,includingslingshot2L(SSH2L),PP1catalyticsubunit,betaisoform(PP1Cβ),dedicatorofcytokinesis8(DOCK8),Homosapiensproteintyrosinephosphatasenonreceptortype6and12(PTPN6,PTPN12),myosinregulatorylightchaininteractingprotein(MIR).CONCLUSION:Thedifferentiallyexpressedgenesassociatedwithcytoskeletalremodelingmayparticipateinexacerbationofasthma.Furtherstudyonthegenesfunctionmayprovidenewgenetargetforasthmatreatment.

【Keywords】suppressionsubtractivehybridization;asthma;eosinophils;cytoskeletalproteins

【摘要】目的：研究外周血嗜酸性粒細(xì)胞(EOS)在哮喘發(fā)作時(shí)與細(xì)胞骨架相關(guān)基因的差異表達(dá).方法：應(yīng)用SuperSMARTcDNAsynthesis技術(shù)從總RNA合成足量的雙鏈cDNA.經(jīng)液相雜交消減兩組共同序列，以抑制性PCR方式擴(kuò)增差異表達(dá)序列.構(gòu)建上調(diào)與下調(diào)cDNA文庫(kù)，菌落PCR擴(kuò)增差異片段，應(yīng)用差異篩選技術(shù)進(jìn)一步鑒定差異表達(dá)基因并測(cè)序，結(jié)果通過(guò)核酸數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行同源性比較.結(jié)果：構(gòu)建了高效的上調(diào)與下調(diào)消減cDNA文庫(kù)，經(jīng)鑒定及同源性分析有6個(gè)與細(xì)胞骨架重建有關(guān)，包括上調(diào)基因slingshot磷酸酶(SSH2L)，蛋白磷酸酶1β亞型(PP1Cβ)，無(wú)功能糖基轉(zhuǎn)移酶樣蛋白(DOCK8)，蛋白酪氨酸磷酸酶非受體型6(PTPN6)與非受體型12(PTPN12)；下調(diào)基因，肌凝蛋白調(diào)節(jié)輕鏈結(jié)合蛋白(MIR).結(jié)論：這些骨架重建相關(guān)基因的差異表達(dá)可能參與了哮喘發(fā)作，進(jìn)一步進(jìn)行功能研究可能為哮喘治療提供新的作用靶點(diǎn).

【關(guān)鍵詞】抑制性消減雜交技術(shù)；哮喘；嗜酸細(xì)胞；細(xì)胞支架蛋白質(zhì)類

口腔遺傳病常為單基因疾病、多基因病，根據(jù)其臨床表現(xiàn)可分為：牙齒、牙齦及牙周組織、牙齒和皮膚或骨組織、黏膜及其他組織的遺傳病。

1牙齒的遺傳性疾病

1.1釉質(zhì)結(jié)構(gòu)異常（Enamelstructuralabnormality）常染色體顯性牙釉質(zhì)發(fā)育不全是常見(jiàn)型，與定位于4q21的相關(guān)enamelin基因突變有關(guān)［1］；常染色體隱性釉質(zhì)發(fā)育不全，其與位點(diǎn)于19q13.4的Kallikrein4基因突變有關(guān)［2］；此基因產(chǎn)物可在牙發(fā)育成熟期降解釉蛋白酶，導(dǎo)致釉質(zhì)礦化異常；x-連鎖性釉質(zhì)發(fā)育不全，其相關(guān)基因位于Xp22.3的amelogenin基因突變［3］。臨床表現(xiàn)：釉質(zhì)發(fā)育不全表現(xiàn)為釉質(zhì)發(fā)育早期釉質(zhì)厚度減少，牙冠黃色或褐色光滑，錐形牙冠；釉質(zhì)成熟不全表現(xiàn)為釉質(zhì)呈毛玻璃樣白堊狀，硬度低于正常釉質(zhì)，主要發(fā)生于第三磨牙或第一磨牙，X線影像可見(jiàn)牙呈長(zhǎng)方體和短根，髓室在根-頜方向長(zhǎng)，頸部收縮，因此種牙根像有蹄動(dòng)物，故稱牛牙樣牙（taurodontism）［4］。遺傳性釉質(zhì)鈣化不全，表現(xiàn)為釉質(zhì)軟，易碎，探針探之可劃成溝，牙呈暗褐色。釉質(zhì)發(fā)育不全晚期，此期具有鈣化不全，表現(xiàn)為釉基質(zhì)形成的量正常，但質(zhì)軟透明，釉質(zhì)較快成片脫落，易著色，上頜切牙發(fā)展成臺(tái)階狀形狀。有時(shí)釉質(zhì)發(fā)育不全和成熟、鈣化不全同時(shí)存在。

1.2遺傳性牙本質(zhì)發(fā)育不全（dentinogenesisimperfectatypeⅡ，DGIⅡ）又稱乳光牙本質(zhì)Ⅱ型，是一種常染色體顯性遺傳病，其基因定位于人類染色體4q21，目前認(rèn)為與牙本質(zhì)唾液酸焦磷酸蛋白基因（Dentinsialophosphoprotein，DSPP）突變有關(guān)，但存在遺傳異質(zhì)性［5］。臨床表現(xiàn)：在一家族中連續(xù)幾代出現(xiàn)，可累及乳牙、恒牙，牙呈乳光色或蘭灰色，釉質(zhì)正常，但由于釉牙本質(zhì)連合處結(jié)合薄弱，故易磨損和分離而破裂，暴露黃色牙本質(zhì)，冠呈球形；因之較正常牙短小。X線影像可見(jiàn)根短而呈圓錐形，早期髓室寬大而成殼狀牙（Shellteeth）,到晚期則髓室變窄或完全阻塞，常伴有釉質(zhì)發(fā)育和鈣化不全，牙冠可見(jiàn)透明區(qū)，牙呈影樣牙（ghostteeth）［4］。

1.3先天性缺牙（Congenitalabsence）

1.3.1非綜合征型先天牙缺失多數(shù)牙缺失是常染色體顯性遺傳病，是與定位在14q12-13上Pax9(pairedbox9)基因突變有關(guān)；少數(shù)牙缺失［6］是常染色體顯性遺傳，定位于4p16.4上的homeobox基因(Msx1)的突變［7］；中國(guó)學(xué)者命名了一種“何-趙缺陷癥”是先天恒牙缺失病，其基因定位于10q11.2，是一種家族遺傳性遺傳病［8］。臨床表現(xiàn)：缺牙是以上頜第二雙尖牙缺占多數(shù)，再次是上頜側(cè)切牙。

人類的疾病易感性、藥物療效及毒副反應(yīng)，普遍存在個(gè)體及種群間的差異。越來(lái)越多的證據(jù)表明，遺傳變異是決定這些差異的主要因素。隨著人類基因組計(jì)劃的完成，人類變異基因組計(jì)劃（HVP）、全基因組關(guān)聯(lián)性研究（Wholegenomeassociationstudy,WGAS）的開(kāi)展，發(fā)現(xiàn)人類基因組變異遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出早期估計(jì)的水平［1］。其中單核苷酸多態(tài)性（singlenucleotidepolymorphism,SNP）是指在基因組水平上由單個(gè)核苷酸的變異所引起的DNA序列多態(tài)性，即指基因組內(nèi)特定核苷酸位置上存在兩種以上不同的堿基，其中最少一種在群體中的頻率不<1%。它是人類可遺傳的變異中最常見(jiàn)的一種，占所有已知多態(tài)性的90%以上。在人類基因組中發(fā)生頻率約為1/100～1/1000推測(cè)SNP的數(shù)量達(dá)到300萬(wàn)～3000萬(wàn)［3］。具有數(shù)量多，分布廣泛；適于快速、規(guī)模化篩查；突變率低，穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn)。被稱為繼限制性酶切片段長(zhǎng)度多態(tài)性和微衛(wèi)星重復(fù)序列之后的“第三代遺傳分子標(biāo)志”。SNP是疾病易感性、藥物反應(yīng)等個(gè)體間差異的主要決定因素［2］，被廣泛應(yīng)用于疾病風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)、個(gè)體化用藥指導(dǎo)等領(lǐng)域，也是腫瘤基因組學(xué)、藥物基因組學(xué)及營(yíng)養(yǎng)基因組學(xué)等研究的重要工具。依照其在基因組中的位置分為:基因編碼區(qū)SNPs（coding-regionSNPs，cSNPs）、基因周邊SNPs（perigenicSNPs，pSNPs）和基因間SNPs(intergenicSNPs,iSNPs)。cSNPs比較少，變異率僅為周圍序列的1/5［3,4］，但由于它與蛋白結(jié)構(gòu)和功能直接相關(guān)，長(zhǎng)期以來(lái)受到更多關(guān)注。cSNP又可分為同義cSNPs(synonymouscSNP)和非同義cSNPs(non-synonymouscSNPs)。非同義cSNPs(non-synonymouscSNPs)密碼子變異可導(dǎo)致所編碼氨基酸的改變。同義SNPs改變密碼子但不改變所翻譯蛋白質(zhì)的氨基酸序列，一般認(rèn)為它不影響蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能，因而被稱為“靜寂SNP(silenceSNP)”，在疾病機(jī)理研究和遺傳分子標(biāo)志篩選中往往被忽略。

然而，同義SNP真的是“沉默無(wú)聲”的嗎？是否僅僅是進(jìn)化過(guò)程中，對(duì)環(huán)境壓力的適應(yīng)和自然選擇而形成的“密碼子使用偏好”在基因組中的遺跡？情況并非如此，研究發(fā)現(xiàn)某些同義SNP與疾病風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)，有些則影響藥物作用的特異性。例如角化粒（corneodesmosin）基因的同義SNP與牛皮癬發(fā)病相關(guān)［5］，ApoE基因和低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6（Low-densitylipoproteinreceptor-relatedprotein6）基因同義SNP增加攜帶者阿滋海默綜合征發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)［6～8］。

以往研究顯現(xiàn)，同義SNP或同義突變雖不改變編碼蛋白的氨基酸序列，但可能影響蛋白的表達(dá)水平，主要通過(guò)三種機(jī)理。

1影響翻譯效率

密碼子與其對(duì)應(yīng)的tRNA決定翻譯速度，如果密碼子對(duì)應(yīng)的tRNA的頻度高，則翻譯速率高。在自然選擇的過(guò)程中，生物體中高表達(dá)蛋白一般選擇使用頻度最高的tRNA及其對(duì)應(yīng)密碼子，如變異產(chǎn)生罕見(jiàn)密碼子則翻譯效率降低［9］。同義密碼子的選擇和tRNA的頻度偏向性存在同步進(jìn)化機(jī)制，即存在同義SNP與tRNA頻度的正反饋，使得二者相協(xié)調(diào)［10,11］。此種機(jī)制目前尚存在爭(zhēng)議，也有一些研究報(bào)道密碼子與翻譯效率沒(méi)有明顯關(guān)聯(lián)［12,13］。

2影響mRNA穩(wěn)定性

摘要：近年來(lái)，隨著基因工程技術(shù)的發(fā)展，轉(zhuǎn)基因食品也得到了快速發(fā)展。然而，轉(zhuǎn)基因食品為企業(yè)帶來(lái)了巨大經(jīng)濟(jì)利益的同時(shí)也存在不小的安全隱患。因此，轉(zhuǎn)基因食品的檢測(cè)技術(shù)就顯得尤為重要。本文重點(diǎn)闡述了分子生物技術(shù)在轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)中的應(yīng)用。

關(guān)鍵詞：轉(zhuǎn)基因食品；檢測(cè)基因；分子生物學(xué)；檢測(cè)技術(shù)

轉(zhuǎn)基因食品逐步商業(yè)化滿足了人們不斷增長(zhǎng)的物質(zhì)需求。轉(zhuǎn)基因食品卻在食用安全性和對(duì)生態(tài)環(huán)境的影響方面存在問(wèn)題。轉(zhuǎn)基因食品是使用基因工程技術(shù)來(lái)改變?cè)嘉锓N基因信息的新型技術(shù)。轉(zhuǎn)基因過(guò)程中的每個(gè)階段都可能存在安全隱患。因此，建立有效、快速、準(zhǔn)確的轉(zhuǎn)基因食品檢驗(yàn)方法，可以有效滿足消費(fèi)者的知情權(quán)和選擇權(quán)，改善轉(zhuǎn)基因食品安全管理不足。本文重點(diǎn)闡述分子生物技術(shù)在轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)中的應(yīng)用。

1基因水平定性的PCR檢測(cè)法

為了更好地使外源基因成功轉(zhuǎn)移到宿主體內(nèi)并合理表達(dá)，轉(zhuǎn)基因通常必須構(gòu)建啟動(dòng)子、終止子、選擇標(biāo)記基因和報(bào)道基因。其中啟動(dòng)子和終止子是目標(biāo)基因，具有表達(dá)順序的作用。根據(jù)科學(xué)研究，大多數(shù)轉(zhuǎn)基因作物具有啟動(dòng)子（CaMV35s），終止子（NOS）和抗性基因（NPTII3）三個(gè)基因成分。為了設(shè)計(jì)啟動(dòng)子、終止子、選擇標(biāo)記基因等的引物，基于此編碼序列的PCR擴(kuò)增，可以評(píng)估該食品是否含有轉(zhuǎn)基因成分。目前，我國(guó)利用花椰菜花葉病毒35S啟動(dòng)子和農(nóng)桿菌腐爛NOS終止子設(shè)計(jì)方案，非特異性引物設(shè)計(jì)對(duì)35S和NOS已成功地通過(guò)PCR擴(kuò)增技術(shù)測(cè)試了轉(zhuǎn)基因大豆。該方法用于成功測(cè)試RounfupReady，這是一種抗草甘膦的轉(zhuǎn)基因大豆。但是，PCR方法只適用于轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品基礎(chǔ)測(cè)試，一些綠色植物或土壤微生物也將攜帶CaMV35S和NOS基因成分，檢測(cè)結(jié)果很可能是假陽(yáng)性。

2基于基因芯片的檢測(cè)法

一、數(shù)字人體力學(xué)模型

數(shù)字人體力學(xué)模型具有幾何學(xué)、運(yùn)動(dòng)學(xué)、動(dòng)力學(xué)的特征，主要有:數(shù)字人體多體系統(tǒng)力學(xué)模型、數(shù)字人體非完整系統(tǒng)力學(xué)模型、數(shù)字人體變質(zhì)量系統(tǒng)力學(xué)模型、數(shù)字人體碰撞系統(tǒng)力學(xué)模型、數(shù)字人體破壞系統(tǒng)力學(xué)模型、數(shù)字人體流體系統(tǒng)力學(xué)模型、數(shù)字人體極端系統(tǒng)力學(xué)模型。人體是由多種不同物質(zhì)結(jié)構(gòu)組成，因此，可用若干塑性、流變體、流體、彈性體組成的系統(tǒng)模型加以描述，構(gòu)建數(shù)字人體多體系統(tǒng)力學(xué)模型，一般采用“有限段建模法”;把人體系統(tǒng)作為一個(gè)非完整的系統(tǒng)，來(lái)進(jìn)行力學(xué)研究，更接近人體系統(tǒng)的實(shí)際，構(gòu)建數(shù)字人體非完整系統(tǒng)力學(xué)模型，其最大優(yōu)點(diǎn)是在定量分析和模擬分析時(shí)，可將邊界條件動(dòng)態(tài)的進(jìn)行;構(gòu)建數(shù)字人體變質(zhì)量系統(tǒng)力學(xué)模型，主要包括變質(zhì)量人體系統(tǒng)的牛頓力學(xué)和分析力學(xué)，是研究人體質(zhì)量變化物體的運(yùn)動(dòng)及作用力之間的關(guān)系;構(gòu)建數(shù)字人體碰撞系統(tǒng)力學(xué)模型，主要包括人體的外部碰撞、碰撞后人體的響應(yīng)、人體與環(huán)境的關(guān)系;對(duì)于人體內(nèi)部的液體流動(dòng)、組織間液體的非線性交換、對(duì)流，構(gòu)建數(shù)字人體流體系統(tǒng)力學(xué)模型;對(duì)于人體內(nèi)部的溫度、壓力，構(gòu)建數(shù)字人體極端系統(tǒng)力學(xué)模型，比如對(duì)流、輻射、熱應(yīng)力和高溫低溫疲勞試驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?/p>

二、數(shù)字人體信息模型

數(shù)字人體信息模型是有關(guān)人體系統(tǒng)物質(zhì)流、能量流、信息流的性質(zhì)、時(shí)空變化、特征、運(yùn)動(dòng)狀態(tài)的模型。人體信息是指有關(guān)人體諸要素的物質(zhì)和能量的性質(zhì)、特征和狀態(tài)表征的知識(shí)，包括物質(zhì)信息和能量信息，數(shù)據(jù)是信息的載體。數(shù)據(jù)是未經(jīng)處理的數(shù)字、文字、聲音、圖像等，而信息是以有意義的形式加以排列和處理的數(shù)據(jù)。構(gòu)建數(shù)字人體信息模型，用以研究人體系統(tǒng)信息機(jī)制，從信息流的角度，探討人體系統(tǒng)信息的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)、獲取和處理。研討人體系統(tǒng)的物質(zhì)流、能量流、信息流所形成的機(jī)制，從而構(gòu)建數(shù)字人體信息模型。一般來(lái)說(shuō)，產(chǎn)生人體系統(tǒng)物質(zhì)流、能量流的基礎(chǔ)理論是有差異性、非均衡理論、耗散結(jié)構(gòu)理論、引力場(chǎng)理論，而物質(zhì)流、能量流又是信息流的基礎(chǔ)。構(gòu)建數(shù)字人體信息模型，可以對(duì)人體系統(tǒng)信息的機(jī)制、產(chǎn)生、獲取、處理、傳播等規(guī)律進(jìn)行研究。包括:數(shù)字人體認(rèn)知模型、信息圖譜模型、全息信息模型、記憶信息模型等。

三、數(shù)字人體基因模型

1985年美國(guó)科學(xué)家率先提出人類基因組計(jì)劃，1990年美國(guó)、英國(guó)、法國(guó)、德國(guó)、日本、中國(guó)科學(xué)家分工合作，正式啟動(dòng)了人類基因組計(jì)劃，測(cè)定人染色體30億個(gè)核苷酸序列的堿基組成，現(xiàn)在已注釋的人類編碼基因34057個(gè)，功能基因12404個(gè)。醫(yī)學(xué)界已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，有些疾病是遺傳病致病基因所致，比如亨廷頓舞蹈病、遺傳性結(jié)腸癌、乳腺癌等是單基因遺傳病致病基因所致，而心血管疾病、腫瘤、自身免疫性疾病、老年性癡呆、精神分裂癥等則是多基因疾病。利用基因技術(shù)構(gòu)建數(shù)字人體基因模型，進(jìn)行遺傳圖譜繪制、物理圖譜繪制、基因序列測(cè)定、基因序列中個(gè)體差異的辨識(shí)、基因鑒定、基因功能分析是數(shù)字人體的一個(gè)重要方面。基因技術(shù)的應(yīng)用及建模，使數(shù)字人體向更深層次邁進(jìn)，繪制人基因圖譜，進(jìn)而發(fā)現(xiàn)人類基因并確定其染色體位置，破解人類遺傳信息。科學(xué)家們正在對(duì)大規(guī)模基因組、大規(guī)模基因功能表達(dá)譜進(jìn)行信息分析，對(duì)完整基因組進(jìn)行比較研究，力求發(fā)現(xiàn)新基因。構(gòu)建數(shù)字人體基因模型是人類基因組計(jì)劃的一個(gè)重要組成部分，已有可喜的進(jìn)展，基因診斷、基因治療、疾病易感基因的識(shí)別已在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域得到了初步應(yīng)用。