立春詩句范文
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導語:如何才能寫好一篇立春詩句,這就需要搜集整理更多的資料和文獻,歡迎閱讀由公務員之家整理的十篇范文,供你借鑒。
篇1
1、雨打梨花深閉門,誤了青春,忘了青春。____唐寅《一剪梅·雨打梨花深閉門》
2、春宵一刻值千金,花有清香月有陰。____蘇軾《春宵·春宵一刻值千金》
3、人面不知何處去,桃花依舊笑春風。____崔護《題都城南莊》
4、沾衣欲濕杏花雨,吹面不寒楊柳風。____志南《絕句》
5、夜月一簾幽夢,春風十里柔情。____秦觀《八六子·倚危亭》
6、紅酥手,黃縢酒,滿城春*宮墻柳。____陸游《釵頭鳳·紅酥手》
7、小樓一夜聽春雨,深巷明朝賣杏花。____陸游《臨安春雨初霽》
8、寂寞空庭春欲晚,梨花滿地不開門。____劉方平《春怨》
9、人間四月芳菲盡,山寺桃花始盛開。____白居易《大林寺桃花》
10、江碧鳥逾白,山青花欲燃。____杜甫《絕句二首》
11、讀書不覺已春深,一寸光陰一寸金。____王貞白《白鹿洞二首·其一》
12、沉舟側畔千帆過,病樹前頭萬木春。____劉禹錫《酬樂天揚州初逢席上見贈》
13、竹外桃花三兩枝,春江水暖鴨先知。____蘇軾《惠崇春江晚景 / 惠崇春江曉景》
14、江南無所有,聊贈一枝春。____陸凱《贈范曄詩》
15、春風十里揚州路,卷上珠簾總不如。____杜牧《贈別》
16、人閑桂花落,夜靜春山空。____王維《鳥鳴澗》
17、流水落花春去也,天上人間。____李煜《浪淘沙令·簾外雨潺潺》
18、相見時難別亦難,東風無力百花殘。____李商隱《無題·相見時難別亦難》
19、春江潮水連海平,海上明月共潮生。____張若虛《春江花月夜》
20、紅豆生南國,春來發幾枝。____王維《相思》
21、天街小雨潤如酥,草色遙看近卻無。____韓愈《早春呈水部張十八員外 / 初春小雨 / 早春》
22、春風又綠江南岸,明月何時照我還?____王安石《泊船瓜洲》
23、春心莫共花爭發,一寸相思一寸灰!____李商隱《無題·颯颯東風細雨來》
24、春水碧于天,畫船聽雨眠。____韋莊《菩薩蠻·人人盡說江南好》
25、等閑識得東風面,萬紫千紅總是春。____朱熹《春日》
26、知否,知否?應是綠肥紅瘦。____李清照《如夢令·昨夜雨疏風驟》
27、滿目山河空念遠,落花風雨更傷春。____晏殊《浣溪沙·一向年光有限身》
28、綠楊煙外曉寒輕,紅杏枝頭春意鬧。____宋祁《玉樓春·春景》
29、流光容易把人拋,紅了櫻桃,綠了芭蕉。____蔣捷《一剪梅·舟過吳江》
30、故人西辭黃鶴樓,煙花三月下揚州。____李白《黃鶴樓送孟浩然之廣陵》
31、遲日江山麗,春風花草香。____杜甫《絕句二首》
32、草長鶯飛二月天,拂堤楊柳醉春煙。____高鼎《村居》
33、誰家玉笛暗飛聲,散入春風滿洛城。____李白《春夜洛城聞笛 / 春夜洛陽城聞笛》
34、羌笛何須怨楊柳,春風不度玉門關。____王之渙《涼州詞二首·其一》
35、春潮帶雨晚來急,野渡無人舟自橫。____韋應物《滁州西澗》
36、兩個黃鸝鳴翠柳,一行白鷺上青天。____杜甫《絕句》
37、風乍起,吹皺一池春水。____馮延巳《謁金門·風乍起》
38、海棠未雨,梨花先雪,一半春休。____王雱《眼兒媚·楊柳絲絲弄輕柔》
39、若待上林花似錦,出門俱是看花人。____楊巨源《城東早春》
40、花褪殘紅青杏小。燕子飛時,綠水人家繞。____蘇軾《蝶戀花·春景》
41、有情芍藥含春淚,無力薔薇臥曉枝。____秦觀《春日》
42、日出江花紅勝火,春來江水綠如藍。____白居易《憶江南·江南好》
43、亂花漸欲迷人眼,淺草才能沒馬蹄。____白居易《錢塘湖春行》
44、好雨知時節,當春乃發生。____杜甫《春夜喜雨》
45、爆竹聲中一歲除,春風送暖入屠蘇。____王安石《元日》
46、一片春愁待酒澆。江上舟搖,樓上簾招。____蔣捷《一剪梅·舟過吳江》
47、千里鶯啼綠映紅,水村山郭酒旗風。____杜牧《江南春》
48、唯有門前鏡湖水,春風不改舊時波。____賀知章《回鄉偶書二首》
篇2
1、城春草木深這一句詩句的歷史背景安史之亂。
2、出自杜甫的《春望》。國破山河在,城春草木深。感時花濺淚,恨別鳥驚心。烽火連三月,家書抵萬金。白頭搔更短,渾欲不勝簪。譯文:長安淪陷,國家破碎,只有山河依舊;春天來了,人煙稀少的長安城里草木茂密。感于戰敗的時局,看到花開而潸然淚下,內心惆悵怨恨,聽到鳥鳴而心驚膽戰。連綿的戰火已經延續了半年多,家書難得,一封抵得上萬兩黃金。愁緒纏繞,搔頭思考,白發越搔越短,簡直要不能插簪了。
3、《春望》是唐代大詩人杜甫創作的一首詩,此詩前四句寫春日長安凄慘破敗的景象,飽含著興衰感慨;后四句寫詩人掛念親人、心系國事的情懷,充溢著凄苦哀思,表現出詩人愛國之情,也展示出詩人憂國憂民、感時傷懷的高尚情感。
(來源:文章屋網 )
篇3
1、該劇改編自馮唐的小說《北京北京》,講述了秋水在本碩連讀八年的大學生涯中,結識了愛人小紅與一群好兄弟。畢業后幾經坎坷,讓他們對青春時代產生無盡懷念與感悟的故事。
2、二十世紀九十年代,文學青年秋水遵從父母的意愿考入醫學院,遇到性格截然不同卻一樣愛他的小紅和趙英男。面對兩個女孩的追求,秋水雖然選擇了自己認為應該喜歡的趙英男,但心里一直住著小紅;在秋水與趙英男交往的七年里,小紅也還是一直守在秋水身邊。即將畢業之時,癡迷文學的秋水被趙英男批評不務正業,兩人漸行漸遠;但小紅理解秋水,欣賞他的文學才華,是秋水的心靈伴侶。
(來源:文章屋網 )
篇4
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篇5
主持人:梅林竹雨
莊 主:百媚千紅 (以《落花香》為題目步莊主韻)
。
清泉的開場白:梅林竹雨、百媚千紅是網絡上的詩歌才女。她們以聰慧的才華吸引了
全國愛好詩詞的詩友。常在空間吟詩對句。清泉觀后深有感觸,認為在詩歌低迷的今
天,團結廣大詩歌愛好者,成立一個詩社,互相交流作品,學習和提高詩歌創作,何
樂而不為!本人根據梅林竹雨辛勤整理,編輯了此篇《春季賽詩會》。意在如此。有
何不妥,還望大家原諒
梅林竹雨步韻百媚千紅《落花香》
七絕【落花香】八首 步韻 百媚千紅
【1】
風推雨逐筑春殤,夢醒樓臺看曉棠。
獨秀閑庭無以趣,問君可聞落花香。
【2】
瀟瀟春雨望誰量,傾向繁枝惹恨長。
一夜東風無意虐,城庭陌野落花香。
【3】
夜聲漸籟月光涼,無故尋愁酒痛腸。
前日庭前相對醉,今宵墨研落花香。
【4】
蜂飛蝶舞繞山梁,杏雨桃風施意長。
無奈綠肥紅粉退,徘徊不舍落花香。
【5】
窗臺月映柳絲長,欲賦春詩句句殤。
倦墨昏燈情寄枕,夢中幾縷落花香。
【6】
紅綃香斷覺凄涼,不忍樽前獨自傷。
置酒呼來箋上客,閑庭弄韻落花香。
【7】
千紅百媚也曾狂,誰比風流占宋唐?
縱使無情無義客,也憐一地落花香。
【8】
有情有意醞華章,墨底無私譽滿堂。
兩處緣深終不忘,與君共賦落花香。
【9】
外一首
詞來詩往好文章,筆墨橫飛盡肖狂。
百媚千紅題意巧,家家醉賦落花香。
百媚千紅原詩:
****
七絕【落花香】八首
【一】
詩中愁怨酒中殤,暮雨瀟瀟濕海棠。
消瘦人兒勤執筆,素函沾滿落花香。
【二】
情深緣淺自思量,過盡深春恨夜長。
疏影臨窗風細細,送來陣陣落花香。
【三】
冰弦慢奏指微涼,一曲離歌碎斷腸。
惆望星窗幽夢遠,庭前唯有落花香。
【四】
雙雙紫燕棲雕梁,眷眷情深綺夢長。
煙雨紅塵君與度,癡心還賞落花香。
【五】
紅箋小字蘊情長,千念無休粉淚殤。
燕子雙飛誰共我,自憐滿地落花香。
【六】
彎彎新月透寒涼,回首前緣枉自傷。
曲徑幽深閑渡步,羅衣沾滿落花香。
【七】
蘭亭把酒賦詩狂,錦句佳文論宋唐。
墨舞人生多快意,酒樽沾滿落花香。
【八】
有花有酒有文章,墨客文人聚一堂。
笑論春秋千古事,別時同賦落花香。
**眾詩友和詩步韻**
幽若-嫦娥落月和詩
1.
橫琴奏斷淚成殤, 古陌清風瘦海棠。
孤影伶仃寂寒夜, 誰人共賞落花香
2.
橫琴奏斷淚成殤, 古陌清風瘦海棠。
孤影伶仃寂寒夜, 誰人共賞落花香
3.
燈花挑盡夜難量,寸寸愁思寸寸長。
訴盡清箋情未寄,怎描窗外落花香
4.
燈花挑盡夜難量,寸寸愁思寸寸長。
訴盡清箋情未寄,怎描窗外落花香
5.
古樓弦月夜寒涼,更漏未息人斷腸。
素女憑欄寂聲問,心思寄與落花香
6.
余音三日繞陳梁,未了高山流水長。
正恨今生知己少,與君執手落花香!
7.
羅衾難暖夜綿長,血帕同焚盡淚殤。
一世籬人檐下寄,半生但葬落花香!
8.
無人共我話凄涼,織就寒衣縷縷傷。
月下關山千里外,夫君可憶落花香
9.
誰言稚子但癡狂 潑墨詩洋傲宋唐。
海內書山勤為徑,揮毫寫盡落花香。
秋山和詩
1.
艷妝秾麗孕情殤,誰在深春泣露棠。
昨夜欣聞宜沐雨,今朝忽嘆落花香。
2.
牽情軟語繞雕梁,一剪東風柳線長。
紫羽翩翩云上下,新巢壘就落花香。
3.
孤燈鈍筆耐昏涼,試步君詩忘餓腸。
自感陳詞難適意,吟箋時透落花香。
4.
春風著意密絲量,云綻霞鋪織錦長。
雙袖撩紗杯映玉,酒唇沾得落花香。
5.
重包疊裹裱辭章,附雅憐庸寄陋堂。
墨款無名欣自貴,四時同賞落花香。
6.
嘶風猶喜去途長,萬里心存伏櫪殤。
百戰難消神駿骨,輕蹄愧染落花香。
7.
晚風蕭瑟驟添涼,或恐春英夜漬傷。
羅帳輕舒權抵虐,暖熏期共落花香。
8.
縱情詩酒近癡狂,順水跟風搏宋唐。
律辯中華傳雅韻,春深閑賦落花香。
心如止水和詩:
1.
孤芳難解夜幽涼,未語心思酬舊傷。
冷月無計憐惜顧,殘霜幾度落花香
2.
相思愁解枉然量,夢擾秋寒猶恨長。
無助殘殤心寂寂,哪堪零落碾魂香。
3.
霜風猶染夜思涼,殘寂還摧淚斷腸。
無語相對凝眸悴,休將疏離落泥香。
4.
清寒月寂枕幽長,舊緒縈懷寂寞殤。
夢系情思酬對盞,恐驚落落淚花香。
5.
風欺雨顧助心殤,月冷星寒老海棠。
誰系愁癡蘋惹緒,忍將淚眸袖殘香。
6.
高朋雅韻情意長,馨詞款款慰愁殤。
雀上枝梢啼笑語,才下眉頭落花香。
錦繡伊人 和詩
1.
秋水長天云霧翔,昆侖掩翠紅日妝。
霞光墨染彩錦繡,細雨潤筆落花香。
2.
家家爭賦落花香,百媚千紅好文章。
梅林步韻長亭外,竹雨斜織古道旁。
3.
百花爭艷滿庭芳,低吟淺唱皆成章。
天南海北聚一堂,巧筆癡賦落花香。
蝸牛也牛和詩
1.
驟雨叩窗夜初涼,無限相思轉柔腸。
若是人生無聚散,怎知幸福似花香。
2.
情深緣淺費思量,花自飄香嫌夜長。
只恨東風無情意,吹落百花空余香。
花香盈袖 和詩
1.
搜腸刮肚費思量,腹內空空怨夜長。
喜看眾友新詩就,只恨自己笨花香。
2.
夜雨聲聲敲斷腸,夢里又添新憂傷。
明朝怕見海棠淚,滿園都是落花香。
醉言夢語和詩
1.
橫箋潑墨正疏狂,對月抒情效宋唐。
一陳東風千樹綠,只聞滿卷滿花香。
2.
落影無意染澄江,不奈春老謝幕忙!
因有花紅爭先賦,唯恐來年無好章!
春風依舊和詩:
1.
孤燈瘦體影猶長, 月暗星移已是殤。
詩韻乏詞難入墨, 夜風吹過落花香。
2.
文風雅韻不輕狂,細琢精磨效宋唐。
雪月風情詩里頌,最憐庭院落花香。
浮云和詩:
江南神往不成殤,紅豆東邊戀海棠。
我寫詩詞和月色,行行沾滿夜花香
清影凝霜和詩:
一溪春水浣斜陽,粉蝶翩翩入畫堂。
雁字相思誰與寄,歸來恰是落花香。
清風飄雪和詩
蕭風細雨潤愁腸,拈香執筆惹心傷,
已現梅林詩千百,班門豈敢把斧揚。
重劍無鋒 和詩
清風拂面柳絲長,情到濃時卻是殤。
最是春深花滿地,小舟泛盡水中香。
清風明月 和詩
遍灑珠璣字字香,梅林竹雨好文章。
景融情意馨香透,詞賦清醇醉四方。
云中月和詩:
一夜春風幽夢長,無端搖月落花殤。
高潔誰念梅枝瘦,撣去粉華只留香。
落花人獨立和詩
月淡星稀夜微涼,思君萬里幾斷腸。
獨酌醉臥殘紅暈,清風可寄鬢花香。
慕云風和詩:
音沉客倦透心涼,玉笛聲催斷寸腸。
戶外楊花頻落去,疏簾淡對海棠香。
紅塵之:煙的寂寞和詩
梅林竹雨落花香, 夢醒晨風微微涼,
別院偶聞鳥鳴叫,尋聲移步看端詳!
清泉 和詩:(另附學詩扎記八首)
獨守寒窗身覺涼,怨詩句句痛斷腸;
風摧雨打灑滿地,誰聞庭院落花香。
***
。
四月二十九日是百媚千紅生日,梅林竹雨賦詞祝賀
【滿庭芳,祝百媚千紅生辰快樂!】百媚千紅,吟風醉月,素顏濃裹幽芳。東風細雨,滋潤蕊欣狂。馨夢盈香滿院,誕辰至、云雀鳴窗。同聲祝,汁飛墨引,萬古絕風揚。春秋應載夢,詩詞秀麗,夢筆成章。莫愁女,文壇一代娥皇。日月風花共醉,紅顏俏,福壽安康!情緣何須細問,字里見衷腸!
學詩扎記(一)步韻百媚千紅、梅林竹雨《落花香》
一、舉杯飲酒心中殤,點點淚水濕海棠;
問訊遠方作詩人,何知滿地落花香?
二、心事重重難思量,無緣逢君說短長;
詩稿焚作漫天灰,猶如桃李落花香。
三、秋風瑟瑟身覺涼,一聲別離痛斷腸;
從此都是天涯客,難聞庭院落花香。
四、春歸燕來繞屋梁,往返穿梭筑巢忙;
世間生靈皆有情,林中陣陣落花香。
五、獨依欄桿沐月光,遙望遠方路茫茫;
春去春來又一年,小院片片落花香。
六、詩人天生性情狂,弄文舞墨學宋唐;
枉費心思化夢蝶,深春處處落花香。
七、文友揮筆寫詩章,天南地北聚一堂;
梅林竹雨莫愁女,吟詩作賦落花香。
篇6
原文:
《董生秉純吉夕貽書求詩》朝代:清 作者:全祖望
遠聞奠雁結縭日,大好小春紅葉天。
佳兒佳婦定難得,正身正家豈偶然。
篇7
“心逐春光萬里流,回風吹墮望京樓。”下一句是:江南盡是相思樹,和雨和煙系紫騮。
原文:
《題望京樓》朝代:清 作者:屈大均
心逐春光萬里流,回風吹墮望京樓。
江南盡是相思樹,和雨和煙系紫騮。
篇8
(二) 鬧鐘對我來說的作用就是讓我換個姿勢睡覺 就算窮途末路也不會回頭找那些背叛過我的狗
(三) 說實話 我真的挺羨慕你的皮膚的 你說你怎么能把它保養的那么厚呢
(四) 學渣苦,學渣累,學渣考前不能睡,學渣還要瞻學霸,待到期考一結束,學渣一把辛酸一把淚。
(五) 有人說我帥 我笑了 結果他們說我笑起來更帥
(六) 考試給學生扣分是違法的,刑法規定:利用他人無知造成他人損失的行為就是欺詐罪
(七) 不要怪校服不好,其實還挺好的。起碼袖子能裝好多好多吃的,兜里也可以,想蹭哪蹭哪
(八) 你們怎么說我帥都行我不介意但是別扯上我朋友和他們沒關系他們只是一群無辜的傻狍子
(九) 父母為了阻止你早戀,都采用過哪些喪盡天良的辦法?給了我這張臉...
(十) 我生氣的時候你別笑 因為你一笑我就會跟著笑 這樣很沒面子知道嗎
(十一) 愛我你怕了嗎 眼淚你忘了嗎 還記得仰望天空度角說你愛我嗎 不是說好做彼此的舔屎嗎???
(十二) 我簡直不敢相信 我整天好吃好喝伺候著我的那群脂肪細胞 當我在寒風中要凍死的時候它們一個二個就裝作不懂的
(十三) 生活小技巧 當你某一陣覺得自己生活特別寬裕的時候一定要記得給大衣口袋書包夾層或者是書或本子里塞點錢
(十四) 我總結一下現在的網紅,高鼻白臉美瞳眼,嘟嘴長發錐子臉。有時候你和網紅只差一個鼻影和美瞳的距離。
(十五) 長發及腰有什么了不起的,有種你劉海及腰啊。
(十六) 假期生活是這樣的,你在半夜十一二點打電話給我,我不介意,但你要是早上六七點打電話給我,我不介意弄死你
(十七) 漂亮女生不會跟漂亮女生做朋友她們只會找長相一般的女生當跟班這就是賤的所在
(十八) 別用你那盜版蒙娜麗莎般的微笑沖著我,我的胃沒你想象的那么堅強
(十九) 我希望我的好朋友們都能發肆發狠的讀書,然后考上理想的大學找到合適的工作,然后養我
(二十) 其實當初我也是有八塊腹肌的 只是練第九塊的時候走火入魔九九歸一了!
(二十一) 老師,我想請假。 你怎么了? 我暈課。 滾! 謝謝老師!
(二十二) 我們究竟要變得多堅強才能承受住這世間的荒涼
(二十三) 作為一件衣服,你居然不會自己洗澡,要我給你洗,你丟不丟衣服的臉,你說!
(二十四) 我就喜歡你這種不喜歡我又反抗不了我,只能一次次被我強吻的女人
(二十五) 目前狀態:學不進去 玩不痛快 睡不踏實 渾身不對勁 吃的還特多
(二十六) 弱水三千只取一瓢是什么意思? 就是整組的作業我只抄她的
(二十七) 掙錢是一種能力 花錢是一種技術 我能力有限 但我花錢的技術相當牛逼
(二十八) 大冬天的,不想上課讓舍友幫忙請假,第二天我中暑的消息傳遍校園。
(二十九) 不要在你最好的年紀做一個只會玩手機的丑逼
篇9
【關鍵詞】 白藜蘆醇;微小RNA-146a;肺泡巨噬細胞;腫瘤壞死因子-α
Effect of ResveRatRol on expRession of lipopolysacchaRide-induced micRoRNA-146a in alveolaR macRophages Zeng Zhenguo,Shao Qiang,Li Yong,Ding Chengzhi, Qing Cheng, Liu Fen, Zhan Yian, Nie Cheng, Jie Kemin, Gong Honghan, Qian Kejian. DepaRtment of CRitical CaRe Medicine, FiRst Affiliated Hospital, Medical College of Nanchang UniveRsity, Nanchang 330006, China
CoRResponding authoR: Qian Kejian,Email:qkj0607@sohu,com
【AbstRact】Objective To obseRve the effect of ResveRatRol on expRession of lipopolysacchaRide (LPS) -induced micRoRNA-146a (miR-146a) in alveolaR macRophages. Methods Rat alveolaR macRophages(NR8383)weRe seeded at 2×106cell/poRe in 6 well plates in vitRo and incubated foR 90 min. NR8383 weRe Randomly divided into fouR gRoups: contRol gRoup, NR8383 stimulated with phosphate buffeR solution (PBS); LPS-stimulated gRoup, NR8383 stimulated with 1μg/mL of LPS; ResveRatRol-tReated gRoup, NR8383 tReated with diffeRent concentRations of ResveRatRol (1 μg/mL oR 10 μg/mL) foR 30 min, then stimulated with 1 μg/mL of LPS. AfteR incubation foR 6 h, the cells weRe haRvested and the supeRnatant of cell cultuRe medium was collected. The expRession of miR-146a of cells was detected by using fluoRoilluminance Real-time quantitative PCR device, and the levels of TNF-α pRotein in the supeRnatant weRe assayed by using enzyme-linked immunosoRbent assay (ELISA).Results CompaRed with contRol gRoup, the expRession of miR-146a and the level of TNF-α weRe significantly incReased in LPS stimulated gRoup (miR-146a’ s expRession folds: 5,92±1,57 vs 1,03±0,58,P
【Key woRds】ResveRatRol; MicRoRNA-146a; AlveolaR macRophages; TumoR necRosis factoR-α
大量臨床及實驗研究表明,白藜蘆醇對膿毒癥肺損傷具有保護作用[1-5]。微小RNA-146a(miR-146a)是TLRs/NF-κB炎癥通路中重要的負反饋調控介質,能夠抑制炎癥反應[6]。本課題組前期研究發現,miR-146a參與了肺泡巨噬細胞炎癥反應,有望成為抑制肺泡巨噬細胞炎癥反應的新途徑[7-8]。研究發現,白藜蘆醇與miRNA關系密切,有可能通過miRNA發揮其抗炎作用[9-11]。然而,在肺泡巨噬細胞炎癥反應模型中,白藜蘆醇是否影響miR-146a的表達以及是否通過上調miR-146a的表達來抑制炎癥介質釋放均未見報道。
1 材料與方法
1,1 實驗材料
大鼠肺泡巨噬細胞株NR8383(中國科學院細胞庫),胎牛血清(美國HyClone),Ham’ s F-12K培養基(美國Sigma-AldRich),LPS(E,coli 0111∶ B4,美國Sigma-AldRich),白藜蘆醇(美國Enzo life sciences),TRIzol Reagent(美國InvitRogen),四甲基偶氮唑鹽(MTT,北京索來寶科技有限公司),TaqMan UniveRsal 聚合酶鏈反應(PCR)檢測試劑盒、TaqMan MicRoRNA 逆轉錄試劑盒、TaqMan MicRoRNA 檢測試劑盒(美國ABI),十二烷基硫酸鈉(SDS,美國Sigma-AldRich),大鼠TNF-α ELISA試劑盒(上海明睿生物),氯仿、異丙醇、無水乙醇等均為國產分析純。
1,2 細胞培養
R8383細胞培養于含15%FBS、1,5 g/L碳酸氫鈉、2 mmol L-谷氨酰胺的Ham’ s F-12K完全培養基中,置于大氣壓下37 ℃、含5%體積分數CO2的溫濕培養箱中培養,2~3 d更換培養液,3~4 d傳代1次。
1,3 MTT比色法檢測白藜蘆醇對細胞活性的影響
取指數生長期NR8383細胞,按每孔細胞0,5×104個接種至96孔板。細胞貼壁90 min后,分別加入0,1、1、10、50、100 μg/mL終質量濃度的白藜蘆醇,每組設5個復孔,同時設陰性對照組(等體積PBS替代白藜蘆醇)和陽性對照組(等體積10%二甲亞砜替代白藜蘆醇)。加藥后細胞再培養48 h,加入5 g/L MTT 溶液20 μL/孔,繼續培養4 h,加入三聯溶解液100 μL/孔,于培養箱內繼續孵育8 h,用酶標儀(波長570 nm)測定各孔的吸光度(OD 570 nm)值。
1,4 細胞處理及分組
取指數生長期NR8383細胞,按每孔細胞2×106個接種至6孔板。細胞培養90 min后,分為以下四組:(1) LPS處理組:培養板中加入LPS溶液(終質量濃度1 μg/mL);(2) PBS對照組:培養板中加入等體積PBS溶液;(3) 白藜蘆醇+LPS組:培養板中加入不同濃度白藜蘆醇溶液(終質量濃度1 μg/mL、10 μg/mL)預處理30 min后,加入LPS溶液(終質量濃度1 μg/mL)。細胞培養6 h后,離心收集細胞上清液和細胞團塊,保存于-80 ℃冰箱,分別用于ELISA檢測和細胞總RNA提取。
1,5 檢測指標及方法
1,5,1 TNF-α蛋白測定 收集各組細胞培養上清液,檢測按照ELISA試劑盒使用說明書進行檢測。
1,5,2 miR-146a表達測定 采用TRIzol法提取細胞中的總RNA,通過瓊脂糖凝膠電泳檢測總RNA完整性及純度,紫外分光光度計測定總RNA濃度。采用TaqMan MicRoRNA逆轉錄試劑盒進行反轉錄,反應條件:16 ℃ 30 min,42 ℃ 30 min,85 ℃ 5 min。采用TaqMan UniveRsal 聚合酶鏈反應(PCR)檢測試劑盒進行PCR擴增,反應條件:95 ℃ 10 Rain;95 ℃ 15 s,60 ℃ 60 s,40個擴增循環,在ABI 7500定量PCR儀上擴增和檢測。操作均按說明書進行,所有操作均在冰上完成。選取U6 snRNA作為內參照,miR-146a的相對表達量采用2-Ct計算。
1,6 統計學方法
采用SPSS 13,0統計軟件進行分析,數據以均數±標準差(x±s)表示,組間比較采用單因素方差分析,組間兩兩比較采用SNK-q檢驗,以P
2 結果
2,1 MTT比色法檢測白藜蘆醇對NR8383
細胞活性的影響
白藜蘆醇在0,1~100 μg/mL的質量濃度范圍內對NR8383細胞無毒性作用。見圖1。
2,2 TNF-α蛋白含量及細胞內miR-146a的表達變化
表1顯示,與PBS對照組相比,LPS處理組TNF-α蛋白含量及miR-146a表達均明顯升高(P
3 討論
膿毒癥并發急性肺損傷是膿毒癥高病死率的主要原因[12,13],如果發生膿毒癥時避免或減輕肺損傷的發生,將有助于提高膿毒癥患者的成功救治率。肺組織中最多的非實質性細胞是肺泡巨噬細胞[14],膿毒癥發生時,肺泡巨噬細胞內TLRs/NF-κB炎癥通路活化,導致大量炎癥基因的轉錄活化,失控性釋放大量炎癥因子,形成肺內炎癥“瀑布”反應,導致ALI的發生。LPS是革蘭陰性菌細胞壁的主要致病成分,是導致TLRs/NF-κB活化的常見因子。本研究結果顯示,LPS刺激肺泡巨噬細胞后,導致TNF-α分泌顯著增加。
白藜蘆醇是一種多酚類化合物,是天然的植物抗菌素。它能夠抑制肺泡巨噬細胞的活化,減少細胞內炎癥因子的釋放,避免或減輕膿毒癥時肺損傷,提高膿毒癥時肺損傷的治療效果[1-5,15]。本實驗研究也證實,白藜蘆醇預處理大鼠肺泡巨噬細胞后,能明顯抑制LPS誘導的炎癥因子TNF-α 的產生,并且其抑制作用呈劑量依賴性。
miRNAs是一類小的內源性非編碼RNA,通過識別靶基因mRNA的3’ 端非編碼區來抑制靶蛋白的翻譯或促進靶基因的降解[16-17]。miRNAs通過抑制炎癥相關靶基因的轉錄表達,在炎癥反應調控中具有重要作用。miR-146a在TLRs/NF-κB通路中具有重要調控作用。它的靶基因是TLRs/NF-κB通路中的兩個重要接頭蛋白編碼基因IRAK-1和TRAF-6。miR-146a上調后將負性調控TLRs/NF-κB通路,能夠抑制炎癥介質的升高[6,18]。并且已證實miR-146a參與調節了LPS誘導的肺泡巨噬細胞炎癥反應[7-8]。在本實驗中,用LPS刺激肺泡巨噬細胞后,也誘導了miR-146a的表達上調,與前者報道結果相似。
研究發現,白藜蘆醇通過影響miRNA前體的轉錄和miRNA的加工成熟,能特異性地引起一些miRNAs改變,包括miR-21、miR-146a、miR-663等,這些miRNAs都參與炎癥反應的調控[9-11]。本研究發現,白藜蘆醇預處理大鼠肺泡巨噬細胞后,能明顯促進miR-146a的表達上調,并且相比于較低質量濃度白藜蘆醇組(1 μg/mL組),較高質量濃度白藜蘆醇組(10 μg/mL)更能誘導miR-146a的表達。
綜上所述,在LPS誘導的肺泡巨噬細胞炎癥反應中,白藜蘆醇能夠抑制炎癥因子TNF-α的產生,并上調miR-146a的表達,由此筆者可以推測,白藜蘆醇調控炎癥的機制之一可能是通過升高細胞內miR-146a的表達水平來發揮其抗炎作用。
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(收稿日期:2013-05-07)
DOI:10,3760/cma,j,issn,1671-0282,2014,01,009
基金項目:國家自然科學基金(81060152);江西省自然科學基金(2009GZY0215)
作者單位:330006 南昌,南昌大學第一附屬醫院重癥醫學科(曾振國、邵強、丁成志、卿城、劉芬、詹以安、聶成、錢克儉),腫瘤科(李勇),影像科(龔洪翰);南昌大學醫學院生物化學與分子生物學教研室(揭克敏)
篇10
有關春天的詩句
1、萬物蘇萌山水醒,農家歲首又謀耕。
2、擊罷泥牛物候新,一鞭分與萬家春。
3、今夜偏知春氣暖,蟲聲新透綠窗紗。
4、不知細葉誰裁出,二月春風似剪刀。
5、竹外桃花三兩枝,春江水暖鴨先知。
6、菜絲生葉落雕盤,欲去春衣怯曉寒。
7、上林宮館好,春光獨早知。
8、誰言寸草心,報得三春暉。
9、九重天子去蒙塵,御柳無情依舊春。
10、冰絲玉縷簇青紅,已逗花梢一信風。
11、好雨知時節,當春乃發生。隨風潛入夜,潤物細無聲。——唐·杜甫《春夜喜雨》
12、春雨斷橋人不渡,小船撐出綠蔭來——宋·徐俯《春游湖》
13、春潮帶雨晚來急,野渡無人舟自橫。——唐韋應物《滁州西澗》
14、小樓一夜聽春雨,深巷明朝賣杏花。——宋陸游《臨安春雨初霽》
15、灞橋楊柳年年恨,鴛浦芙蓉葉葉愁。——蘇庠《鷓鴣天·楓落河梁野水秋》
16、笙歌散盡游人去,始覺春空。——歐陽修《采桑子·群芳過后西湖好》
17、總是愁媒,欲訴誰消遣。——蘇軾《蝶戀花·蝶懶鶯慵春過半》
18、春未老,風細柳斜斜。——蘇軾《望江南·超然臺作》
19、江南春盡離腸斷,蘋滿汀洲人未歸。——寇準《江南春·波渺渺》
20、綠暗紅嫣渾可事。——歐陽修《青玉案·一年春事都來幾》
21、從此陽春應有腳,百花富貴草精神。
22、千里鶯啼綠映紅,水村山郭酒旗風。
23、舊歷年光看卷盡,立春何用更相催。
24、今年春色早,應為剪刀催。
25、綠楊煙外曉寒輕,紅杏枝頭春意鬧。
26、還欣好景平生事,贏得旬余分外春。
27、柳色早黃淺,水文新綠微。
28、泥牛鞭散六街塵,生菜挑來葉葉春。