脂質(zhì)體前體制劑研究論文

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目的：脂質(zhì)體前體的制備解決了脂質(zhì)體分散系的物理不穩(wěn)定性：如藥物的滲漏、粒子的聚集以及磷脂在液態(tài)下的氧化、水解，為脂質(zhì)體在臨床上的應(yīng)用提供了一個行之有效的方法，它使脂質(zhì)體以固態(tài)形式貯存，只是在臨用前加入分散介質(zhì)即可再分散形成脂質(zhì)體。方法：對近年來國內(nèi)外脂質(zhì)體前體的研究情況做文獻檢索，介紹了各種制備方法及影響新脂質(zhì)體粒徑和藥物包裹率的因素。結(jié)果：通過適當(dāng)?shù)姆椒斑x擇合適的支持劑，可以制備出穩(wěn)定性好、包裹率高的脂質(zhì)體前體。結(jié)論：對脂質(zhì)體前體的進一步研究有一定的意義。

近年來，脂質(zhì)體做為藥物載體已被廣泛研究，一部分工作已達(dá)到了臨床應(yīng)用階段［1］。脂質(zhì)體能夠適用臨床，必須達(dá)到如下要求：具有較高的包裹率；完全除去所含有機溶劑；能夠經(jīng)受滅菌；制備方法適合工業(yè)生產(chǎn)。目前，脂質(zhì)體的制備方法主要有醚注入法、逆向蒸發(fā)法、薄膜法等［2］，研究者們對這些方法都進行了各方面的研究，但是脂質(zhì)體在溶液狀態(tài)下仍存在著一些問題，脂質(zhì)體分散系的不穩(wěn)定性：如藥物的滲漏、粒子的聚集以及磷脂在液態(tài)下的氧化、水解，這就影響了脂質(zhì)體在臨床上的應(yīng)用。為了保證脂質(zhì)體在長期貯存中的穩(wěn)定性，藥學(xué)工作者們一直都在尋找著解決的方法，其中脂質(zhì)體前體的制備提供了一個行之有效的方法，它使脂質(zhì)體以固態(tài)形式貯存，只是在臨用前加入分散介質(zhì)即可再分散形成脂質(zhì)體，這種方法不但解決了上述存在的問題，而且便于運輸使用，也適用于工業(yè)生產(chǎn)。

關(guān)于脂質(zhì)體前體與前體脂質(zhì)體，我們認(rèn)為是兩個不同的概念。脂質(zhì)體前體是指將脂質(zhì)體分散系經(jīng)噴干、凍干后，使用前加入溶劑可再分散成脂質(zhì)體；而前體脂質(zhì)體是指脂質(zhì)體膜材經(jīng)過一定的修飾，膜材接上高分子或氨基酸等可在體內(nèi)降解的前體，可以分散狀態(tài)存在，也可以固態(tài)存在，二者不可統(tǒng)一而論，我們僅對前一種研究情況綜述。脂質(zhì)體前體的制備方法很多，一種簡單方法是將磷脂和脂溶性藥物溶于有機溶劑中，加入一種水溶性載體（支持劑），然后在真空下抽干形成流動性較好的粉末，它容易水化再分散形成脂質(zhì)體，而且具有較高的包裹率。payneNI等人［3］制備了脂溶性藥物兩性霉素b脂質(zhì)體前體，并對其穩(wěn)定性及再分散后脂質(zhì)體粒子大小的影響因素進行了考察，指出脂質(zhì)體前體的粒徑及水化溫度（假定此溫度高于所用磷脂的相轉(zhuǎn)化溫度）對再分散后新脂質(zhì)體粒徑幾乎沒有影響。兩性霉素b脂質(zhì)體前體在20℃下放置9個月再分散后粒徑?jīng)]有變化，放置6個月后藥物的包裹率也未下降。顯微照相表明，水化從脂質(zhì)表面開始，支持劑和脂質(zhì)完全溶解后才從中心形成脂質(zhì)體。國內(nèi)王俊平等人用此方法，以葡萄糖為載體制備了阿霉素脂質(zhì)體前體，再分散后脂質(zhì)體平均粒徑為1.5μm。這種方法將脂溶性藥物及磷脂包衣于一種流動性好的載體上而制成脂質(zhì)體前體，方法簡單，但所用有機溶劑量較大。

楊志軍等人［4］采用噴霧干燥方法制備了黃芩脂質(zhì)體前體，并從幾個方面探討了影響黃芩脂質(zhì)體再分散粒子大小的因素。分別以山梨醇、葡萄糖、蔗糖、乳糖等非揮發(fā)性、高沸點的物質(zhì)作為流動床內(nèi)循環(huán)流動的芯料，減低了在噴霧過程中原脂質(zhì)體相互碰撞的機會，從而在一定程度上抑制了脂質(zhì)體粒徑的增大。但各種糖對再分散后的新脂質(zhì)體粒徑的影響沒有差別。另外，水化時的溶媒和所包裹藥物的不同也是影響脂質(zhì)體粒子大小的因素。溶媒的pH值、離子強度（不同濃度naCI溶液）對新脂質(zhì)體粒徑影響甚微，但是人工腸液、kH2PO4溶液對空白脂質(zhì)體雖無影響，卻使包有黃芩的脂質(zhì)體粒徑大大增加，說明黃芩中的黃酮與磷脂的氫鍵被溶媒所破壞，所以粒徑增大。陳騏等以5-Fu為藥物，考察了噴干法制備脂質(zhì)體前體的處方工藝，用丙乙醛監(jiān)測法、酸度法考察了脂質(zhì)體膜材在噴干過程中的穩(wěn)定性。實驗證明用簡單振搖的方法即可水合再分散形成脂質(zhì)體，在通常范圍內(nèi)，振搖時間及溫度對新脂質(zhì)體的粒徑無顯著影響。制備脂質(zhì)體所用磷脂可以經(jīng)受噴干的瞬間高溫，未有氧化水解等破壞，穩(wěn)定性較好。

以上所介紹的兩種方法都有一定的局限性，前者不適合于工業(yè)生產(chǎn)，后者對熱不穩(wěn)定性藥物不適用，這樣冷凍干燥法則提供了一種可行的方法，國內(nèi)外對此法研究較多，主要集中在如何選擇一個合適的支持劑，防止藥物在冷凍干燥過程中藥物的滲漏及粒子間的相互聚集［5～8］。雖然許多支持劑如糖類、蛋白質(zhì)類、氨基酸類等都顯示出對脂質(zhì)體的凍干過程中具有一定的保護作用，但發(fā)現(xiàn)多糖類及多元醇類效果優(yōu)于其他類支持劑，其中海藻糖、山梨醇是公認(rèn)最有效的［9］，并對他們的作用機理進行了研究［10～12］。脂質(zhì)體在冷凍干燥后以凝膠態(tài)存在，當(dāng)其水合時必然有一個從凝膠態(tài)向液晶態(tài)轉(zhuǎn)變的過程，脂質(zhì)體在液晶態(tài)下，脂質(zhì)雙分子層膜的流動性增加，通透性也增加，因此在水合過程中，脂質(zhì)體內(nèi)所包裹的藥物就會滲漏出來，而當(dāng)加入海藻糖等支持劑后［13］，通過dSC分析，相轉(zhuǎn)化溫度tm大大降低，使原來處于凝膠態(tài)的凍干脂質(zhì)體仍處于液晶態(tài)，因此在水合過程中沒有引起相變，只要原脂質(zhì)體穩(wěn)定，再分散后內(nèi)部藥物的滲漏就會減少甚至不滲漏。tm的降低是由于海藻糖與磷脂的末端基團形成氫鍵，從而使分子間范德華力降低造成的［11］。分別以葡萄糖、蔗糖、乳糖、海藻糖為支持劑，測定冷凍干燥后藥物的包裹率，發(fā)現(xiàn)蔗糖和海藻糖更能有效地防止藥物的滲漏。選擇一種合適的支持劑是制備凍干脂質(zhì)體前體的關(guān)鍵因素，但其他影響因素也不容忽視［14］。如原脂質(zhì)體的粒子大小、帶電情況、支持劑與磷脂的干重比等。一般原脂質(zhì)體的粒徑在100μm左右是最佳條件，可以使藥物在凍干過程中不發(fā)生滲漏，粒子太大或太小都不穩(wěn)定；原脂質(zhì)體帶負(fù)電穩(wěn)定性稍高一些；另外，加入支持劑的總量并不是主要因素，關(guān)鍵是支持劑與磷脂的干重比。防止粒子間聚集一般需要支持劑與磷脂比為2∶1就可以了，而防止藥物滲漏，支持劑的比例量要大得多。還有一個有趣的發(fā)現(xiàn)是［15］：支持劑必須在原脂質(zhì)體雙分子層內(nèi)外都含有才能起保護作用，僅存在于外部或內(nèi)部穩(wěn)定性就較差，藥物滲漏較多。takashiOhsawa等人［16］采用了一種新型方法制備了蛋白類藥物脂質(zhì)體前體，包裹率可達(dá)50％以上。方法是：即先制備空白脂質(zhì)體進行冷凍干燥，然后將藥物加入到凍干空白脂質(zhì)體中充分振搖即形成藥物脂質(zhì)體，這種方法的包裹率較高，而且沒有藥物在凍干過程的滲漏問題，尤其對易分解的藥物，可以不經(jīng)過脂質(zhì)體的制備過程，至今未見用此方法制備非蛋白類藥物的報道，我們將對這方面做進一步的研究。

冷凍干燥法制備脂質(zhì)體一個更為突出的應(yīng)用是［17］在免疫原脂質(zhì)體共軛物的制備上。我們知道脂質(zhì)體作為蛋白質(zhì)（如疫苗等）載體已越來越成為人們研究的重點［18］，因為脂質(zhì)體無毒，可生物降解且沒有抗原性。為了省去每次都要制備脂質(zhì)體的麻煩，可以先制備表面含有配基官能團的脂質(zhì)體，然后進行冷凍干燥，在水化時免疫原蛋白迅速以共價鍵結(jié)合于脂質(zhì)體上。這樣帶有配基的脂質(zhì)體前體可以作為免疫原的空白載體（或溶劑），就可隨時制備穩(wěn)定性好、活性毫無損失的免疫原脂質(zhì)體共軛物。相同原理下，在疫苗人工合成及藥物靶向作用方面［19］，冷凍干燥法制備脂質(zhì)體前體也有著廣泛的應(yīng)用。國外一種稱為mTP-PE（mu-ramyltripeptidephosphatidylethanolamine）凍干脂質(zhì)體已經(jīng)進入了Ⅱ期臨床。

冷凍干燥法適用于工業(yè)生產(chǎn)，而且容易達(dá)到無菌要求，為脂質(zhì)體在臨床上的應(yīng)用創(chuàng)造了條件。我們相信，隨著科學(xué)技術(shù)的不斷前進，脂質(zhì)體作為一種新型制劑必將會克服其在應(yīng)用上的種種不利因素，成為具有廣泛發(fā)展前景及較高藥用價值的制劑。

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