小鼠血漿鈣和磷含量影響論文

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摘要：血漿鈣磷

斯氏小體(corpusclesofStannius,CS)是硬骨魚類獨有的內分泌腺，其分泌的斯鈣素(stanniocalcin,STC)具有抑制魚類鰓、腸的鈣轉運和促進腎小管對磷酸鹽的重吸收以調節鈣、磷代謝的功能。現已證實，人和哺乳動物中也存在有STC，其生理功能表現在抑制腸對鈣的吸收、促進腸對磷酸鹽的吸收及促進腎小管對磷酸鹽的重吸收以調節鈣、磷代謝，并且對魚的鰓鈣轉運也有抑制功能。那么魚類CS分泌物能否對哺乳動物的鈣、磷代謝產生影響呢?魚類CS勻漿液對大鼠血清鈣、磷含量的影響已有報道，而魚類CS勻漿液能否也對小鼠血清鈣、磷代謝產生影響，國內外未見報道。為此，我們觀察了鯉魚CS勻漿液對小鼠血漿鈣、磷代謝的影響。

1材料方法

(1)實驗材料實驗用昆明種小鼠由本院實驗動物房提供，共計48只，體重19～26g,雌性2只雄性46只。用于制備CS勻漿液的鯉魚(Cyprinuscarpio)購自當地集貿市場，體重380～520g，均為雌性，性腺發育至Ⅳ期。

(2)鯉魚CS勻漿液的制備按仇存網等的方法，取出鯉魚CS稱重后，加入一定比例的生理鹽水制備成10mg/ml、5mg/ml、2.5mg/ml的CS勻漿液，3000r/min離心5min后，取上清液備用。

(3)實驗方法取小鼠48只，隨機分為6組。正常對照組腹腔注射生理鹽水，另一組腹腔注射5mg/ml的鯉魚CS勻漿液；其余4組在腹腔注射5mmol/LCaCl2溶液的基礎上，一組腹腔注射生理鹽水，另外3組分別腹腔注射2.5mg/ml、5mg/ml和mg/ml的鯉魚CS勻漿液。上述6組注射劑量均為0.2ml/10g體重。注射2h后眼眶靜脈叢采血，肝素抗凝，6000r/min離心5min后取血漿備用。

(4)血漿鈣、磷含量的測定血漿鈣、磷含量的測定分別按鄰甲酚酞絡合酮(OCPC)法和鉬藍法進行，所用試劑均為北京中生生物工程高技術公司生產，操作步驟嚴格按產品說明進行，722-光柵分光光度計(上海第三分析儀器廠)比色測定。

(5)統計學方法實驗數據采用單因素方差分析進行統計學處理，結果用均數±標準差(±s)表示。

2結果

按上述實驗方法測得各組血漿鈣和血漿磷水平見表1。經方差分析表明摘要：(1)僅注射5mg/ml鯉魚CS勻漿液和注射5mmol/LCaCl2溶液的小鼠和正常對照組小鼠相比，血漿鈣水平分別出現極顯著降低(P＜0.01)或升高(P＜0.01)；而血漿磷水平分別出現升高(無顯著性差異)和顯著降低(P＜0.05)，說明5mg/ml鯉魚CS勻漿液對正常小鼠具有降血鈣功能。(2)在給小鼠腹腔注射5mmol/LCaCl2溶液基礎上，分別腹腔注射不同濃度的鯉魚CS勻漿液的小鼠和僅注射5mmol/LCaCl2溶液的小鼠相比，三組小鼠血漿鈣水平均出現極顯著下降（P＜0.01)，而血漿磷水平只在鯉魚CS勻漿液達5mg/ml以上時，才出現升高現象(P＜0.01)；但和正常對照組小鼠相比，僅注射10mg/ml鯉魚CS勻漿液的小鼠血漿鈣出現極顯著下降(P＜0.01),血漿磷水平均無顯著性差異，這說明鯉魚CS勻漿液具有緩解因注射5mmol/LCaCl2溶液而出現的高血鈣和低血磷狀況。GroupPlasmacalcium

(mmol/L)

Plasmaphosphorus

(mmol/L)

Normalcontrol1.689±0.0661.845±0.134

CShomogenate(5mg/ml)1.550±0.097**1.976±0.271

CaCl2(5mmol/L)1.806±0.074**1.686±0.131*

CaCl2+CS(2.5mg/ml)1.699±0.107##1.823±0.133

CaCl2+CS(5mg/ml)1.695±0.038##1.891±0.115##

CaCl2+CS(10mg/ml)1.558±0.038##1.878±0.169##

*P＜0.05,**P＜0.01,vsnormalcontrol;##P＜0.01,vsCaCl2(5mmol/L)group

3討論

魚類CS勻漿液對哺乳動物鈣、磷代謝的影響效應已有報道。Leung等首先觀察到CS具有降低大鼠血鈣的功能，他們給幼年雄性大鼠靜脈注射美洲鰻鱺的CS粗提液后，大鼠出現劑量-依賴性的低血鈣反應。但Ukawa等分別給雄性大鼠注射適應于三種不同生活環境的魚(淡水鰻鱺、1/3海水金魚及海水隆頭魚)CS勻漿液后，3小時內未觀察到血清鈣和血清磷濃度的顯著性變化。而Patel等給雄性大鼠注射鯉魚CS勻漿液后1小時，大鼠即出現明顯的低血鈣和高血磷現象，且雌魚CS勻漿液較雄魚CS勻漿液的功能更加顯著。盡管這些作者的實驗結果不完全一致，但仍然可以說明魚類CS勻漿液能對大鼠血鈣和血磷水平生產影響。

從我們在小鼠上的實驗結果來看，給小鼠腹腔注射雌性鯉魚CS勻漿液2h后能夠使小鼠出現血鈣降低和血磷升高的現象，并且能使小鼠因注射5mmol/LCaCl2溶液出現的高血鈣和低血磷現象得以緩解，并存在劑量依靠效應。這些結果進一步證實鯉魚CS分泌物能夠影響哺乳動物鈣、磷代謝，但影響途徑和機制有待進一步探索。