關(guān)龍膽保肝作用分析論文

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1材料

1.1動(dòng)物昆明種小鼠，體重（20.0±2.0）g，雌雄各半，哈爾濱市獸醫(yī)研究所，動(dòng)物質(zhì)量合格證號(hào)：黑XCXK20020001。

1.2試劑四氯化碳（CCl4），哈爾濱市新達(dá)化工廠產(chǎn)品（分析純），批號(hào)000718；硫代乙酰胺（TAA），天津市科密歐化學(xué)試劑開發(fā)中心（分析純），批號(hào)20040102；D-半乳糖胺（GlanN）：北京化工廠，批號(hào)870522；聯(lián)苯雙酯，德州德藥制藥有限公司，批號(hào)040410；甲醇，天津市科密歐化學(xué)試劑開發(fā)中心（分析純），批號(hào)20011222；谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）試劑盒、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）試劑盒、堿性磷酸酶（AKP）試劑盒，南京建成生物工程研究所,批號(hào)20040915。

1.3藥材關(guān)龍膽，采自哈爾濱市蔣化龍膽種植基地，經(jīng)哈爾濱商業(yè)大學(xué)中藥鑒定教研室沈志濱副教授鑒定為關(guān)龍膽。

2方法

取關(guān)龍膽根浸膏0.90g，加蒸餾水配成0.015g/ml溶液備用。給小鼠按20ml/kg灌胃給藥（相當(dāng)于生藥5g/kg給藥）。分別取關(guān)龍膽地上部分浸膏30.4，15.2，7.6g加蒸餾水配成0.5，0.25，0.125g/ml溶液備用。給小鼠按20ml/kg灌胃給藥（分別相當(dāng)于生藥25，50，75g/kg給藥）。

2.1龍膽地上部分對(duì)氨基半乳糖（GlanN）急性肝損傷的保護(hù)作用?。?0±2）g健康小鼠，雌雄各半，隨機(jī)分成正常組、模型組、關(guān)龍膽根組、不同劑量關(guān)龍膽地上部分組、聯(lián)苯雙酯組。除正常組、模型組小鼠每日灌胃生理鹽水20ml/kg外，其它各組均按20ml/kg給藥，1次/d，連續(xù)4d。于末次給藥或生理鹽水后0.5h，除正常組小鼠ip生理鹽水20ml/kg外，其余6組小鼠分別按120mg/kg腹腔注射10%GlaN,18h后，眼眶取血，3000r/min離心10min，取血清測ALT，AST，AKP。

2.2龍膽地上部分對(duì)硫代乙酰胺（TAA）急性肝損傷的保護(hù)作用取（20±2）g健康小鼠，雌雄各半，隨機(jī)分成正常組、模型組、關(guān)龍膽根組、不同劑量關(guān)龍膽地上部分組、聯(lián)苯雙酯組。除正常組、模型組小鼠每日灌胃生理鹽水20ml/kg外，其它各組均按20ml/kg給藥，1次/d，連續(xù)4d。于末次給藥或生理鹽水后30min，除正常組小鼠腹腔注射生理鹽水20ml/kg外，其余6組小鼠分別按50mg/kg腹腔注射TAA,18h后，眼眶取血，3000r/min離心10min，取血清測ALT，AST，AKP。

2.3龍膽地上部分對(duì)CCl4急性肝損傷的保護(hù)作用?。?0±2）g健康小鼠，雌雄各半，隨機(jī)分成正常組、模型組、關(guān)龍膽根組、不同劑量關(guān)龍膽地上部分組、聯(lián)苯雙酯組。除正常組、模型組小鼠每日灌胃生理鹽水20ml/kg外，其它各組均按20ml/kg給藥，1次/d，連續(xù)4d。于末次給藥或生理鹽水后30min，除正常組小鼠腹腔注射生理鹽水20ml/kg外，其余6組小鼠分別腹腔注射0.15%CCl410ml/kg。18h后，眼眶取血，3000r/min離心10min，取血清測ALT，AST，AKP。

3結(jié)果

3.1龍膽地上部分對(duì)小鼠氨基半乳糖(GlanN)急性肝損傷的保護(hù)作用血清生化測定結(jié)果表明，GlanN肝損傷組（模型組）小鼠血清轉(zhuǎn)氨酶ALT，AST和A均明顯升高，說明造模成功。龍膽地上部分總提物高、中、低劑量組，龍膽根總提物組與模型組比較雖然可以在一定程度上降低ALT，AST，AKP水平，但經(jīng)過數(shù)理統(tǒng)計(jì)分析，并沒有顯著性差異。說明龍膽全草對(duì)GlaN所致的急性肝損傷無明顯保護(hù)作用。結(jié)果見表1。表1龍膽地上部分總提物對(duì)GlanN肝損傷小鼠血清ALT，AST，AKP水平的影響(略)

3.2龍膽地上部分對(duì)小鼠TAA急性肝損傷的保護(hù)作用血清生化測定結(jié)果表明，TAA肝損傷組（模型組）小鼠血清轉(zhuǎn)氨酶ALT，AST，AKP均明顯升高，說明造模成功。龍膽地上部分總提物高，中，低劑量組、龍膽根組與陽性對(duì)照藥聯(lián)苯雙酯均可對(duì)抗血清ALT，AST、AKP的升高，總提物高、中、低劑量組與模型組對(duì)照有顯著性差別(P<0.05),與龍膽根組比較無顯著性差異（P>0.05）。見表2。表2龍膽地上部分總提物對(duì)TAA肝損傷小鼠血清ALT，AST，AKP水平的影響(略)

3.3龍膽地上部分對(duì)小鼠CCl4急性肝損傷的保護(hù)作用血清生化測定結(jié)果表明，CCl4肝損傷組（模型組）小鼠血清中轉(zhuǎn)氨酶ALT，AST和堿性磷酸酶AKP均明顯升高，說明造模成功。龍膽地上部分總提物高、中、低劑量組、龍膽根總提物組與陽性對(duì)照藥聯(lián)苯雙酯均可對(duì)抗血清ALT，AST，AKP的升高，地上部分總提物高、中、低劑量組與模型組對(duì)照有顯著性差別(P<0.05)。與龍膽根組比較無顯著性差異（P>0.05）。結(jié)果見表3。表3龍膽地上部分總提物對(duì)CCl4肝損傷小鼠血清ALT，AST，AKP水平的影響(略)

4討論

我們采用昆明種小鼠，設(shè)計(jì)3個(gè)實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)關(guān)龍膽地上部分有一定的保肝作用，可降低各種肝損傷模型的ALT，AST，AKP等。CCl4，TAA，GlanN都是引起肝損傷的傳統(tǒng)肝損傷模型，關(guān)龍膽地上部分可使CCl4引起的肝損傷轉(zhuǎn)氨酶下降，和龍膽根及根莖作用一致，提示龍膽地上部分具有抗氧化作用和細(xì)胞保護(hù)作用。TAA干擾RNA從細(xì)胞核到細(xì)胞質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)過程，影響蛋白質(zhì)的合成。龍膽地上部分能降低TAA對(duì)肝臟的侵害作用，和龍膽根及根莖作用一致，提示龍膽地上部分可以保護(hù)肝細(xì)胞膜，不至于使細(xì)胞的離子環(huán)境破壞，導(dǎo)致肝細(xì)胞壞死。關(guān)龍膽地上部分對(duì)GlanN無明顯保護(hù)作用，與龍膽根及根莖作用一致。

通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，關(guān)龍膽地上部分和龍膽地下部分的給藥量與其含有的龍膽苦苷量有一定的相關(guān)性。當(dāng)關(guān)龍膽地上部分以5～10倍地下部分藥量給藥時(shí)，兩者呈現(xiàn)一致的藥效，但當(dāng)繼續(xù)增加地上部分的藥量時(shí)，無明顯改變，且小鼠體重減輕，可能是由于地上部分葉綠素等的影響，使小鼠食欲降低。

實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)三花龍膽和其它龍膽地上部分也含有一定量的龍膽苦苷和當(dāng)藥苦苷［6］，我們下一步將對(duì)三花龍膽和其它龍膽地上部分的保肝作用進(jìn)行研究。

【參考文獻(xiàn)】

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［6］張建生,田子新,樓之岑.九種龍膽中五種裂環(huán)烯醚萜苷類苦味成分的高效液相色譜定量分析［J］.藥學(xué)學(xué)報(bào),1991,26(11)：864.

【摘要】目的通過不同毒物引起的肝損傷來研究關(guān)龍膽地上部分的保肝作用。方法選用D半乳糖胺、硫代乙酰胺、四氯化碳等3個(gè)肝損傷毒物造肝損傷模型，通過不同機(jī)制引起的肝損傷來研究關(guān)龍膽地上部分的保肝作用。結(jié)果關(guān)龍膽地上部分有一定的保肝作用，可降低各種肝損傷模型的ALT，AST，AKP等。結(jié)論關(guān)龍膽地上部分也有一定的藥用價(jià)值，用全草取代地下部分入藥有一定的可行性。

【關(guān)鍵詞】關(guān)龍膽保肝作用谷丙轉(zhuǎn)氨酶谷草轉(zhuǎn)氨酶堿性磷酸酶