提取物范文10篇

時間:2024-03-21 09:22:38

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青翹提取物的抑菌活性作用探索

摘要:目的研究青翹提取物的抑菌活性。方法以金色葡萄球菌、大腸桿菌和白色念球菌為代表菌種,用K-B紙片擴(kuò)散法對青翹提取物的抑菌活性進(jìn)行研究。結(jié)果青翹不同提取物對供試菌均有一定的抑菌活性,其中醋酸乙酯提取物和正丁醇提取物具有較強的抑菌活性。提取物對金色葡萄球菌的抑菌活性與提取物濃度呈正比,對大腸桿菌和白色念球菌的抑菌活性與提取物濃度不呈簡單的正比關(guān)系。結(jié)論青翹不同提取物對金色葡萄球菌、大腸桿菌和白色念球菌均有抑制作用。

關(guān)鍵詞:青翹;提取物;抑菌活性

連翹為木犀科(Oleaceae)連翹屬(Forsythia)植物連翹Forsythiasuspensa(Thunb.)Vahl的干燥果實。連翹藥材商品分為“青翹”和“老翹”。果實初熟尚帶綠色時采收蒸熟,曬干,習(xí)稱“青翹”;果實熟透顏色發(fā)黃時采收,曬干,習(xí)稱“老翹”[1]。

連翹是中國臨床常用傳統(tǒng)中藥之一,又名黃花條、連殼、青翹、落翹、黃奇丹等。已有的研究報道表明,連翹種子揮發(fā)油對3種真菌有明顯的抑制作用,陜西產(chǎn)青翹、老翹和連翹葉均對大腸桿菌和金色葡萄球菌也有較好的抑制作用[2~6],上述研究報道都沒有對連翹的提取物進(jìn)行系統(tǒng)的抑菌活性研究。本研究首次以山西道地藥材青翹作為研究對象,比較其不同極性提取物的抑菌活性,旨在為臨床應(yīng)用連翹提供理論依據(jù)。

1材料與儀器

1.1藥材青翹200806購自山西省安澤縣連翹GAP生產(chǎn)基地,植物標(biāo)本由山西省藥檢所郭文菊研究員鑒定,植物標(biāo)本現(xiàn)存于山西中醫(yī)學(xué)院實驗中心。

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三七提取物在心血管疾病的應(yīng)用

摘要:三七為五加科植物三七的干燥根,是臨床常用中藥,有益氣活血、化瘀通脈等功效。隨著我國中醫(yī)提取精煉技術(shù)的提高,三七提取物廣泛用于疾病治療,并取得較大進(jìn)展。現(xiàn)本文系統(tǒng)性介紹三七提取物在冠心病、心律失常、心力衰竭、高血壓中的應(yīng)用,并總結(jié)三七提取物的作用機制,旨在為中醫(yī)治療心血管疾病提供一定的理論依據(jù)。

關(guān)鍵詞:三七提取物;心血管疾病;三七總皂苷;作用機制

心血管疾病是全球第一大致死疾病,據(jù)不完全統(tǒng)計,全球死于心血管疾病病例達(dá)到1770萬例,占全球病死率的31%左右[1]。一般心血管疾病的發(fā)生、發(fā)展由心肌缺血、缺氧等原因?qū)е拢韧魉幹委熆扇〉靡欢ǔ尚ВL期、大劑量用藥存在較多不良反應(yīng),整體效果欠佳[2]。近年來,傳統(tǒng)中醫(yī)藥治療心血管疾病的優(yōu)勢明顯。三七在我國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中應(yīng)用悠久、廣泛,初次記載于《本草綱目》中,別名有金不換、田參、田七等,隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)提取技術(shù)的發(fā)展,三七含有的皂苷、蛋白氨基酸、黃銅、多糖、無機物、油脂類等生物藥理成分,逐漸用于心血管疾病。基于此此,本文旨在對三七提取物在心血管疾病中的應(yīng)用意義進(jìn)行綜述,分析其藥理作用機制,現(xiàn)報道如下。

1冠心病

三七相關(guān)或三七提取物(三七總皂苷、三七冠心寧)能增加冠狀動脈血流量,改善心肌微循環(huán),糾正心肌組織缺氧缺血,起到顯著的抗冠心病效果。李穎慧等[3]通過動物大鼠模型試驗,證實三七總皂苷紅花提取物復(fù)方配伍可糾正心肌缺血,減輕心肌再灌注損傷,并能抑制炎癥反應(yīng)。茹翱等[4]報道指出,給予冠脈介入術(shù)后冠心病患者三七粉沖服,可增加患者左心室心排出量、每搏量。董艷等[5]報道指出,三七總皂苷通過對血管內(nèi)皮生長因子(vascularen-dothelialgrowthfactor,VEGF)、基質(zhì)金屬蛋白酶(matrixmetalloproteinases,MMP)-9、MMP-1等潛在靶基因進(jìn)行調(diào)控,可發(fā)揮抗動脈粥樣硬化、抗炎作用,減少血管內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡數(shù)量,保護(hù)缺血的心肌組織。因此,三七提取物對冠心病的作用機制主要有:①因冠心病由冠脈血栓形成、斑塊破裂堵塞冠脈導(dǎo)致的心肌缺血,三七提取物可抑制機體氧化應(yīng)激反應(yīng),減輕炎癥反應(yīng),糾正心肌組織的缺血缺氧;②三七提取物通過增加冠脈血流,可加快冠脈微循環(huán),改善心肌缺氧性壞死[6];③抗血小板是治療冠心病的基礎(chǔ),三七總皂苷可對血小板聚集產(chǎn)生抑制作用,且與阿司匹林聯(lián)用,可提高阿司匹林的抗血小板功效,并能保護(hù)胃黏膜,減少胃腸道不適感,提高治療有效性與安全性;后,會造成血管內(nèi)皮功能損壞,導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞凋亡并脫落,或冠脈斑塊脫落并堵塞動脈血管,進(jìn)而導(dǎo)致心肌組織缺血及缺氧。因此,三七提取物可通過降血脂、減輕血液黏稠、減少內(nèi)皮細(xì)胞凋亡數(shù)量,起到糾正冠脈缺血、缺氧的作用。

2心律失常

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開口箭提取物研究論文

【摘要】目的通過體外細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),探討開口箭提取物的細(xì)胞毒活性,為進(jìn)行深層次研究提供依據(jù)。方法采用四甲基偶氮唑鹽(MTT)比色法。結(jié)果開口箭甲醇提取物、總皂苷、30%總皂苷和70%總皂苷對HL-60和Caski細(xì)胞的抑制作用顯著,與陰性對照相比(P<0.05),對HL-60細(xì)胞的抑制率達(dá)到60.12%,72.25%,89.09%,95.17%,其IC50為65.57,45.07,35.40,22.89μg/ml。對Caski細(xì)胞的抑制率達(dá)到63.94%,71.48%,62.49%,73.43%,其IC50為108.42,84.53,41.02,47.19μg/ml。結(jié)論開口箭提取物對HL-60和Caski細(xì)胞具有明顯的抑制作用。

【關(guān)鍵詞】開口箭;皂苷;MTT法;細(xì)胞毒活性

Abstract:ObjectiveToobservethecytotoxicitiesoftheextractsofTupistrachinensisBak.withinvitrocellculturetechnology,andprovideevidenceforthefurtherresearch.MethodsThecytotoxicitieswereassayedbyMTTmethodsonHL-60andCaskitumorcells.ResultsTheinhibitioneffectoftheextractsofTupistrachinensisBak.,totalsaponins,30%totalsaponinsand70%totalsaponinsonHL-60andCaskicellswereallprominent,comparedwiththenegativemodelgroup(P<0.05).TheirinhibitionratiosonHL-60tumorcellswereasfollows:60.12%,72.25%,89.09%and95.17%,andtheirIC50were65.57,45.07,35.40and22.89μg/ml.TheirinhibitionratiosonCaskicellswere63.94%,71.48%,62.49%and73.43%,andtheirIC50were108.42,84.53,41.02,47.19μg/ml.ConclusionTheextractsofTupistrachinensisBak.havesignificantcytotoxicityonHL-60andCaskitumorcells.

Keywords:TupistrachinensisBak.;Saponin;MTTmethod;Cytotoxicity

開口箭(TupistrachinensisBak.)系百合科Liliaceae鈴蘭族開口箭屬植物,為著名的傳統(tǒng)中藥,主治勞熱咳嗽、跌打損傷、風(fēng)濕痹痛等癥,民間用于治療咽喉炎、扁桃體炎等。現(xiàn)證明開口箭具有祛痰、抗炎、抑菌及醒酒作用[1,2]。

本實驗室通過實驗證實湖北省產(chǎn)開口箭含有甾體皂苷和甾體皂苷元,且含量較高[3]。皂苷具有增強免疫功能、抗輻射、抑制腫瘤生長、抗炎、降血糖等廣泛的生物學(xué)活性,近年越來越受人們的普遍關(guān)注。有研究證實開口箭同屬植物皂苷成分有細(xì)胞毒活性[4,5]。本文旨在通過體外抗腫瘤實驗,觀察開口箭提取物對HL-60和Caski細(xì)胞的細(xì)胞毒活性,現(xiàn)報告如下。

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透析青翹提取物的抑菌活性

摘要:目的研究青翹提取物的抑菌活性。方法以金色葡萄球菌、大腸桿菌和白色念球菌為代表菌種,用K-B紙片擴(kuò)散法對青翹提取物的抑菌活性進(jìn)行研究。結(jié)果青翹不同提取物對供試菌均有一定的抑菌活性,其中醋酸乙酯提取物和正丁醇提取物具有較強的抑菌活性。提取物對金色葡萄球菌的抑菌活性與提取物濃度呈正比,對大腸桿菌和白色念球菌的抑菌活性與提取物濃度不呈簡單的正比關(guān)系。結(jié)論青翹不同提取物對金色葡萄球菌、大腸桿菌和白色念球菌均有抑制作用。

關(guān)鍵詞:青翹;提取物;抑菌活性

連翹為木犀科(Oleaceae)連翹屬(Forsythia)植物連翹Forsythiasuspensa(Thunb.)Vahl的干燥果實。連翹藥材商品分為“青翹”和“老翹”。果實初熟尚帶綠色時采收蒸熟,曬干,習(xí)稱“青翹”;果實熟透顏色發(fā)黃時采收,曬干,習(xí)稱“老翹”[1]。

連翹是中國臨床常用傳統(tǒng)中藥之一,又名黃花條、連殼、青翹、落翹、黃奇丹等。已有的研究報道表明,連翹種子揮發(fā)油對3種真菌有明顯的抑制作用,陜西產(chǎn)青翹、老翹和連翹葉均對大腸桿菌和金色葡萄球菌也有較好的抑制作用[2~6],上述研究報道都沒有對連翹的提取物進(jìn)行系統(tǒng)的抑菌活性研究。本研究首次以山西道地藥材青翹作為研究對象,比較其不同極性提取物的抑菌活性,旨在為臨床應(yīng)用連翹提供理論依據(jù)。

1材料與儀器

1.1藥材青翹2008??06購自山西省安澤縣連翹GAP生產(chǎn)基地,植物標(biāo)本由山西省藥檢所郭文菊研究員鑒定,植物標(biāo)本現(xiàn)存于山西中醫(yī)學(xué)院實驗中心。

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崗梅水提取物抗炎分析論文

1材料與方法

1.1藥物及試劑崗梅水提取物采用水煎法自制,方法為:取適量崗梅,每次用8倍量水煎煮1h,共2次,合并2次水煎煮液,濃縮,備用;阿司匹林片:河北石家莊制藥集團(tuán)生產(chǎn),批號:041114;烏拉坦:國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn),批號:E60521;二甲苯:廣東光華化學(xué)廠有限公司生產(chǎn),批號:20050218;角叉菜膠購自美國Sigma公司,批號:59C-0328;青霉素和鏈霉素混合液(每毫升含800U青霉素和650U鏈霉素)。

1.2動物昆明種小鼠,雄性,體質(zhì)量20~24g,SPF級,由第一軍醫(yī)大學(xué)實驗動物中心提供,動物合格證號:2004A063號;SD大鼠,雄性,體質(zhì)量150~180g,清潔級標(biāo)準(zhǔn),由中山大學(xué)實驗動物中心提供,動物合格證號:粵檢證字2003A070。

1.3儀器大鼠足跖容積測定裝置,參照文獻(xiàn)[2]方法定制。

1.4方法

1.4.1對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響[2]取昆明種小鼠60只,隨機分為正常對照組、模型對照組、崗梅水提取物低、中、高劑量組、陽性對照藥物(阿司匹林)組,共6組,每組10只,實驗前小鼠禁食不禁水12h,然后各組小鼠按0.1mL/10g體質(zhì)量灌胃給藥,1次/d,共7d,其中正常對照組和模型對照組給等體積蒸餾水。末次給藥后30min,除正常對照組外,其余各組小鼠于右耳正反兩面涂上二甲苯50μL致炎,致炎1h后脫頸椎處死動物,用直徑9mm打孔器沖下左耳和右耳同一部位的圓片,于分析天平上稱重,以兩耳片重差值為炎癥腫脹度。

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中藥提取物的國際化策略分析研究

中藥提取物是從中藥產(chǎn)業(yè)中分化出來的新興領(lǐng)域,公務(wù)員之家,全國公務(wù)員公同的天地是對中藥材的深度加工。中藥提取物的本質(zhì)是中藥原料藥,具有投入少、技術(shù)含量高、產(chǎn)品附加值大、國際市場廣泛等優(yōu)勢和特點。中藥提取物經(jīng)多年的發(fā)展,已具備一定的產(chǎn)業(yè)規(guī)模,出口比例已超過中藥,并呈現(xiàn)上升趨勢。但是,中藥提取物在研制、生產(chǎn)、流通等各個環(huán)節(jié)缺乏必要的管理規(guī)范,嚴(yán)重地?fù)p害了中藥出口產(chǎn)品在國際上的形象,致使中藥提取物平均出口價格大幅下降。業(yè)內(nèi)人士呼吁,中藥提取物急需產(chǎn)業(yè)化的調(diào)控和規(guī)范。

國際管理模式可借鑒

廣義的中藥提取物是指以世界范圍內(nèi)的傳統(tǒng)草藥為原料,利用現(xiàn)代植物化學(xué)提取分離技術(shù),提取分離所獲得的、具有明確指標(biāo)成分的單一組分或混合組分。在國際市場,中藥提取物商品形態(tài)包括三類:

一是純度達(dá)到%以上的,以單一化合物為檢測對象的中藥提取物,其結(jié)構(gòu)清楚、藥效明確、藥理學(xué)研究資料全面,屬國外藥典登載品種或藥品專利保護(hù)品種,在國內(nèi)一般稱其為天然藥物或植物化學(xué)藥物,如蘆丁、甘草酸、紫杉醇等均屬此類。

二是經(jīng)過一定分離如柱層析分離、沉淀分離、萃取分離等分離工藝過程所獲得的部分成分較為集中的多組分中藥提取物,或有效部位有明確的含量測試指標(biāo),被測成分一般為活性成分,含量在%之間,并得到藥物學(xué)界相對公認(rèn)的提取物,如銀杏黃酮、藍(lán)莓提取物。但由于它們還含有相當(dāng)?shù)钠渌煞郑瑢@些未知成分的藥理作用并未深入研究,因而,在使用時不斷有新的發(fā)現(xiàn)。

三是經(jīng)過水或乙醇提取、未加分離的單一中藥浸膏粉或流浸膏,這些浸膏粉有明確的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。

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崗梅水提取物抗炎實驗研究論文

【摘要】目的研究崗梅水提取物的抗炎作用。方法采用二甲苯致小鼠耳廓腫脹法、角叉菜膠致大鼠足跖腫脹法、大鼠棉球肉芽腫法和醋酸致小鼠毛細(xì)血管通透性增高法觀察崗梅水提取物的抗炎作用。結(jié)果崗梅水提取物能明顯抑制二甲苯所致的小鼠耳廓腫脹和角叉菜膠所致的大鼠足跖腫脹及炎性組織中PGE2的生成,減少大鼠棉球肉芽腫的形成,同時對醋酸所致小鼠毛細(xì)血管通透性增高具有顯著抑制作用。結(jié)論崗梅水提取物具有明顯抗炎作用。

【關(guān)鍵詞】崗梅;水提取物;抗炎;大鼠

Abstract:ObjectiveTostudytheanti-inflammatoryactivityofthewaterextractfromRadixetCaulisIlicisAsprellae.MethodsThemodelsofxylene-inducedearedemainmice,hindpawedemainducedwithcarrageeninrats,granulomainducedwithcottonballinrats,andcapillarypermeabilityincreaseinducedwithaceticacidinmicewereusedtoobservetheanti-inflammatoryeffects.ResultsThewaterextractfromRadixetCaulisIlicisAsprellaecouldinhibitxylene-inducedearedemaandcapillarypermeabilityincreaseinmice,hindpawedemaandPGE2increaseinducedwithcarrageenandgranulomainducedwithcottonballinrats.ConclusionThewaterextractfromRadixetCaulisIlicisAsprellaehassignificantanti-inflammatoryeffects.

Keywords:RadixetCaulisIlicisAsprellae;waterextract;antiinflammatory;mice

崗梅是冬青科植物梅葉冬青Ilexasprella(Hook.etArm.)champ.exBenth.的干燥根及莖。其味苦、微甘、性涼。有清熱解毒、生津止渴、利咽消腫、散瘀止痛之功,常用于感冒發(fā)熱、肺熱咳嗽、熱病津傷口渴等[1]。崗梅主產(chǎn)于兩廣地區(qū)(廣東、廣西),是多種涼茶中的主要藥味,應(yīng)用較廣。但目前尚未見有關(guān)崗梅水提取物抗炎作用的系統(tǒng)報道,筆者對崗梅水提取物進(jìn)行抗炎作用的動物實驗研究,報告如下。

1材料與方法

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牛耳楓與辣蓼提取物研究論文

1材料與儀器

1.1試藥腸胃康顆粒劑(海口市制藥廠生產(chǎn),批號060709,規(guī)格:每袋袋裝8g);牛耳楓與辣蓼提取物(NLWE)(黑色粉末,自制,每克樣品相當(dāng)于原生藥10.0g);阿司匹林腸溶片(昆明云健制藥有限公司生產(chǎn),批號20060320,規(guī)格25mg);硫酸阿托品注射液(天津藥業(yè)集團(tuán)新鄭股份有限公司生產(chǎn),批號0601181,規(guī)格:2ml∶1mg);伊文思藍(lán)(中國醫(yī)藥集團(tuán)上海試劑公司生產(chǎn),批號20030714,規(guī)格1.0g);乙酰膽堿(Ach)(上海三愛思試劑有限公司生產(chǎn),批號20030620,規(guī)格:1);氯化鋇(BaCl2)(廣州化學(xué)試劑廠生產(chǎn),批號040503-2,規(guī)格500g)。

1.2動物昆明種小鼠,體重18~22g,合格證號2006A070;Wistar大鼠,體重180~220g,合格證號2006A07;豚鼠,體重250~300g,合格證號2006A067。以上動物均由中山大學(xué)實驗動物中心提供。適應(yīng)環(huán)境一周,自由飲水進(jìn)食。

1.3儀器YLS-6B智能熱板儀(山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院設(shè)備站);BL-420E生物機能實驗系統(tǒng)(成都泰盟科技有限公司);ZH-Z型離體器官測量系統(tǒng)(安徽省淮北正華生物儀器設(shè)備有限公司);UV22401PC紫外分光光度計(日本島津);分析電子天平(北京瑞利,精度0.1mg)。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法本實驗數(shù)據(jù)結(jié)果均以±s表示,劑量資料比較,采用t檢驗,統(tǒng)計軟件為SPSS13.0。

2方法及結(jié)果[1,2]

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金釵石斛提取物抗白內(nèi)障研究論文

【摘要】【目的】探討金釵石斛(DendrobiumnobileLindl.)總生物堿和粗多糖對白內(nèi)障的抑制作用。【方法】采用溶劑法分離提取金釵石斛總生物堿和粗多糖;體外培養(yǎng)大鼠晶狀體,加入H2O2與總生物堿(或粗多糖)共培養(yǎng)24h;分別在培養(yǎng)后6、12、18、24h共4個時段于解剖顯微鏡下觀察并記錄晶狀體混濁度的改變;檢測晶狀體水溶性蛋白、谷胱甘肽(GSH)的含量及總超氧化物歧化酶(TSOD)和丙二醛(MDA)的活性。【結(jié)果】金釵石斛總生物堿和粗多糖均能減輕晶狀體混濁度,并能顯著升高晶狀體水溶性蛋白、GSH含量及TSOD活性,降低MDA的活性(均P<0.05),其中石斛總生物堿高劑量組效果最佳。【結(jié)論】金釵石斛總生物堿和粗多糖在體外均有一定的抗白內(nèi)障作用,其機制與拮抗晶狀體的氧化損傷有關(guān),而總生物堿的效果優(yōu)于粗多糖。

【關(guān)鍵詞】金釵石斛/藥理學(xué)金釵石斛/化學(xué)白內(nèi)障/中藥療法晶狀體/病理學(xué)器官培養(yǎng)

白內(nèi)障(cataract)是一種常見的致盲眼病,它是多種因素共同作用的結(jié)果,氧化損傷是其發(fā)病機制之一[1]。當(dāng)前許多中藥研究都是從提高晶狀體抗氧化能力入手,利用抗氧化劑或抗氧化酶激活劑來消除或中和晶狀體中的氧化產(chǎn)物,阻止或逆轉(zhuǎn)晶狀體變渾濁,從而抑制或延緩白內(nèi)障的發(fā)生發(fā)展[2]。石斛是一種名貴中藥材,抗白內(nèi)障是其主治功效之一。已有研究證實,石斛水煎劑可通過改變晶狀體相關(guān)酶的活性而對D半乳糖性白內(nèi)障起到防治作用[3],石斛的乙酸乙酯提取物在體外還可抑制醛糖還原酶和過氧化脂質(zhì)(LPO)的產(chǎn)生[4],這些研究在一定程度上揭示了石斛抗白內(nèi)障的作用機理。然而,石斛化學(xué)成分復(fù)雜,其抗白內(nèi)障的具體有效成分是什么,至今仍未見報道。本實驗通過體外培養(yǎng)晶狀體,對金釵石斛(DendrobiumnobileLindl.)的粗提物總生物堿(totalalkaloids)和粗多糖(polysaccharides)抗白內(nèi)障作用進(jìn)行了探討,現(xiàn)報道如下。

1材料和方法

1.1動物4~5周齡Wistar大鼠20只,體質(zhì)量80~120g,雌雄不限,由廣州中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供,合格證號:粵臨證字2007A025。

1.2藥材和試劑金釵石斛由貴州赤水信天石斛有限公司提供,經(jīng)廣州中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定教研室李薇教授鑒定。DMEM低糖培養(yǎng)基(杭州吉諾生物醫(yī)藥技術(shù)有限公司);胎牛血清(杭州四季青生物工程材料有限公司);磷酸鹽緩沖液(PBS,福州邁新生物技術(shù)開發(fā)公司);體積分?jǐn)?shù)30%過氧化氫(H2O2,浙江臨安化工二廠);吡諾克辛鈉滴眼液(武漢天天明藥業(yè)有限責(zé)任公司,批號:070102);Bradford蛋白質(zhì)定量試劑盒(上海申能博彩生物科技有限公司);谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)測定試劑盒均為南京建成生物工程研究所產(chǎn)品;其他試劑均為國產(chǎn)分析純。

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五味子提取物抑菌作用研究論文

1資料與方法

1.1菌種與培養(yǎng)基試驗菌為金黃色葡萄球菌、大腸埃希氏菌、綠膿桿菌和肺炎克雷伯氏菌,由浙江省臺州醫(yī)院微生物實驗室友情贈送。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基按文獻(xiàn)[4]自制,PH為6.0(用PBS配制[5])。

1.2五味子提取物的制備五味子飲片購自臨海市醫(yī)藥有限公司,經(jīng)70℃烘干后研成粉末。取粉末10g用75%乙醇在超聲波清洗器中提取,反復(fù)多次,直至浸出液色淡。將浸出液濃縮,并定容到10ml,即1ml提取液為1g五味子的提取物[6]。提取液過0.22μm濾膜除菌,4℃貯存?zhèn)溆谩?/p>

1.3抑菌試驗

1.3.1抑菌效力的測定將供試菌從斜面轉(zhuǎn)接到5ml液體培養(yǎng)基,30℃培養(yǎng)24h,吸取50μl到5ml液體培養(yǎng)基,30℃培養(yǎng)6h后取100μl菌液均勻涂布到平板上;再貼上濾紙圓片(φ6mm,提取液浸24h后風(fēng)干),每皿4片,重復(fù)3次。37℃倒置培養(yǎng)24h后測定抑菌圈大小,用無菌水作空白對照,確定抑菌效果。

1.3.2最低抑菌濃度(MIC)的測定采用二倍稀釋法[7]測定提取物對供試菌的MIC。取7支試管,第1支加入10ml提取液,其余6支各加入5ml無菌水,從第1支吸取5ml提取液移至第2支,混勻后,再吸取5ml至第3支,以此類推,最后1支試管取出5ml棄去,每一試管的濃度分別為1000、500、250、125、62.5、31.3和15.6mg/ml。分別將5ml上述各濃度的提取物與20ml牛肉膏固體培養(yǎng)基混勻,制成提取物的濃度分別為200、100、50、25、12.5、6.3和3.2mg/ml(w/v)的平板,接種菌液后倒置培養(yǎng)24h觀察,以沒有供試菌生長的最低濃度為提取物的MIC。

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