魚腥草不同部位藥效活性論文
時間:2022-01-26 05:00:00
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1器材
1.1動物昆明種健康小鼠,雌雄皆用,體重18~22g,由四川省實驗動物專委會養殖場提供。
1.2藥物與試劑
魚腥草經陳幼竹博士鑒定為三白草科蕺菜屬植物蕺菜HouttuyniacordataThunb.。氯仿、醋酸乙酯、正丁醇、石油醚、冰醋酸,二甲苯等均為分析純由成都科龍化工試劑廠提供,水為蒸餾水。陽性藥,阿司匹林,西安博華制藥有限責任公司,批號050204;地塞米松:成都第一制藥有限公司,批號0504004;枸櫞酸噴托維林片,天津藥業焦作有限公司,批號040302。用時研細,用蒸餾水配成所需濃度。
1.3儀器
CM-1超聲霧化治療儀,合力醫療器械廠,中國上海;電子天平(BS210S,madebystartorius)。
2方法及結果
2.1供試樣品的制備
精密稱取適量魚腥草1.0kg,加水適量煎煮兩次,2h/次,過濾,合并兩次濾液,濃縮至1000ml,依次用石油醚、氯仿、醋酸乙酯、正丁醇萃取,得各部位萃取物。將各部位萃取物低溫減壓回收溶劑石油醚、氯仿部位合并定容于20ml,醋酸乙酯部位定容于200ml、正丁醇萃取定容于100ml,水部位定容于500ml。分別吸取75ml的氯仿部位和醋酸乙酯部位溶液定容于500ml,吸取37.5,187.5ml的正丁醇和水部位的溶液分別定容于500ml,即為高劑量藥物濃度。稀釋一倍為低劑量。
2.2抗炎藥理實驗[4]
取雄性小鼠100只,隨機分為10組,每組10只,其中陽性對照組為地塞米松。灌胃給藥1次/d(0.2ml/10g小鼠重量),連續6d,于末次給藥1h后,用鼠耳腫脹法觀察抗炎作用。分別于各組小鼠左耳前后涂二甲苯0.05ml/只,右耳不涂作對照,1h后將小鼠頸部脫臼處死,剪下左右耳,用9mm直徑打孔器分別在同一部位打下圓耳片,稱重,左右耳重量之差作為腫脹度。并計算耳腫抑制率。給藥組與生理鹽水組對照,結果見表1。表1魚腥草不同提取物對小鼠耳腫脹抗炎作用觀察(略)
由表1可知,與生理鹽水組相比,魚腥草氯仿提取物大劑量組和水提取物大劑量組對二甲苯致小鼠耳炎癥均具有極顯著的抑制作用(P<0.01);魚腥草正丁醇提取物大小劑量組、魚腥草水提取物小劑量組對二甲苯致小鼠耳炎癥均具有顯著的抑制作用(P<0.05),而魚腥草氯仿提取物小劑量組、魚腥草醋酸乙酯大小劑量組均對二甲苯致小鼠耳炎癥沒有抗炎作用。
抑制率(%)=(對照組平均腫脹值-給藥組平均腫脹值)/對照組平均腫脹值×100%
2.3鎮咳藥理實驗[5]
取小鼠100只,雌、雄各半,隨機分為10組,每組10只,其中陽性對照組為枸櫞酸噴托維林片。灌胃給藥1次/d(0.2ml/10g小鼠重量),連續6d,于末次給藥1h后,用濃氨水誘導法觀察鎮咳作用。即將小鼠放入玻璃鐘罩內,打開通過橡皮管與之相連的超聲霧化器,將濃氨水均勻地噴入玻璃鐘罩內,噴霧10s,立即取出小鼠,以小鼠腹肌收縮并張大口為咳嗽動作指標,分別觀察各組小鼠2min中咳嗽次數。結果見表2。表2魚腥草不同提取物對小鼠的止咳作用觀察(略)
由表2可知,與生理鹽水組相比,魚腥草氯仿提取物、水提取物、正丁醇提取物均對濃氨水誘導法引起的咳嗽具有較好的止咳效果,而魚腥草醋酸乙酯部位則沒有止咳作用。
2.4鎮痛藥理實驗[6]
取雄性小鼠100只,隨機分為10組,每組10只,其中陽性對照組為阿司匹林。灌胃給藥1次/d(0.2ml/10g小鼠重量),連續6d,于末次給藥30min后,用冰醋酸扭體法觀察鎮痛作用,分別給每只小鼠腹腔注射0.6%的冰醋酸0.2ml,記錄5min內扭體次數,計算抑制率。結果見表3。
抑制率(%)=(空白組扭體反應均數-試藥組扭體反應數)/空白組扭體反應均數×100%
由表3可知,與生理鹽水組相比,魚腥草氯仿提取物對由醋酸引起的化學刺激致痛有極顯著的鎮痛作用(P<0.01),魚腥草水提取物對由醋酸引起的化學刺激致痛有顯著的鎮痛作用(P<0.05),而魚腥草的醋酸乙酯提取物對醋酸引起的化學刺激致痛則沒有鎮痛作用。表3魚腥草不同提取物對小鼠的鎮痛作用觀察(略)
3結論
魚腥草氯仿提取物、水提取物對二甲苯致小鼠耳炎癥,濃氨水誘導法引起的咳嗽,醋酸引起的化學刺激致痛具有顯著的抗炎、止咳和鎮痛作用,正丁醇提取部位對二甲苯致小鼠耳炎癥,濃氨水誘導法引起的咳嗽具有抗炎和止咳作用,其中魚腥草氯仿提取物和水提取物大劑量組抗炎作用最強,氯仿提取部位鎮痛作用最強,而醋酸乙酯部位藥理作用不明顯。這提示氯仿和水提取部位為魚腥草的主要有效部位,另外正丁醇部位為抗炎和止咳的有效部位。這為魚腥草的活性成分的化學和藥理研究提供理論依據。
課題組對魚腥草的氯仿部位和正丁醇部位采取柱層析化學分離和結構鑒定[7,8],從正丁醇部位分得金絲桃苷、槲皮苷、4-β-D葡萄糖-3-羥基苯甲酸、綠原酸甲酯、3,4-二羥基苯甲酸、蕓香苷異、槲皮苷、山柰酚-3-O-β-蕓香糖苷、槲皮素-3-O-β-D-半乳糖-7-O-β-D-葡萄糖苷、槲皮素-3-O-a-D-鼠李糖-7-O-β-D-葡萄糖苷、4-羥基-4[3′-(β-D-葡萄糖)亞丁基]-3,5,5-三甲基-2-環己稀-1-醇、2-(3,4二羥基)-苯乙基-β-D-葡萄糖苷、對羥基苯乙醇-β-D-葡萄糖苷、硝酸鉀等成分。從氯仿部位分得胡椒內酰胺、馬兜玲內酰胺B、金線吊烏龜二酮堿B等成分。提示這些化學成分為魚腥草的活性成分,但其作用機理還有待進一步的研究。
【參考文獻】
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【摘要】目的比較魚腥草不同提取部位的藥理活性。方法通過二甲苯致小鼠耳炎癥實驗,觀察魚腥草不同提取部位的抗炎作用;采用濃氨水誘導法引起的咳嗽實驗,觀察魚腥草不同提取部位的止咳作用;采取醋酸引起的化學刺激致痛實驗,考察魚腥草不同提取部位的鎮痛作用。結果魚腥草氯仿提取物、水提取物對二甲苯致小鼠耳炎癥,濃氨水誘導法引起的咳嗽,醋酸引起的化學刺激致痛具有顯著的抗炎、止咳和鎮痛作用,正丁醇提取部位具有顯著的抗炎和止咳作用。結論抗炎和止咳的有效部位為魚腥草氯仿部位、水部位和正丁醇提取部位,鎮痛的活性部位為魚腥草氯仿部位和水部位。
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