烏蕨不同部位總黃酮分析論文

時間:2022-11-15 02:18:00

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烏蕨不同部位總黃酮分析論文

【摘要】:[目的]比較烏蕨全草、根、莖、葉等不同部位黃酮和元素的含量差異。[方法]采用可見分光光度法測定不同部位總黃酮的含量;采用電感耦合等離子體原子發射光譜法(ICPAES法)測定不同部位元素的含量。[結果]烏蕨全草、根、莖、葉等不同部位總黃酮含量分別11.89%、4.47%、3.46%和11.75%,不同藥用部位元素的含量存在一定的差異。[結論]烏蕨含有豐富的黃酮類化合物和多種元素,具開發價值。中國論文聯盟

【關鍵詞】烏蕨;不同部位;總黃酮;元素

Abstract:[Objective]ComparisonofthecontentofgeneralflavoneandelementsinthedifferentpartsofStenolomachusanum(L.)Ching.[Methods]Totalflavonewasdeterminedbyvisspectrophotometer.Elementsweredeterminedbyinductivelycoupledplasmaatomicemissionspectrometry(ICPAES).[Results]ThecontentsofgeneralflavoneinthedifferentpartsofStenolomachusanum(L.)Chingarerespectively11.89%,4.47%,3.46%and11.75%.Andtherearesomedifferencesinthecontentsofelementsbetweenthedifferentparts.[Conclusion]ThereareabundantelementsandgeneralflavoneinthedifferentpartsofStenolomachusanum(L.)Ching.AstheresultrevealsthatStenolomachusanum(L.)Chingisveryvaluable.

Keywords:Stenolomachusanum(L.)Ching;differentparts;generalFlavonoids;element

烏蕨[Stenolomachusanum(L.)Ching]為鱗始蕨科植物烏蕨的全草,又名野雞尾、金花草、中華金粉蕨,具有清熱、解毒、利濕、止血的功效[1]。本文就烏蕨全草、根、莖、葉等不同部位的總黃酮和微量元素含量進行比較分析,為烏蕨的進一步研究和資源開發提供依據。

1儀器與試藥

1.1儀器

WND200A型高速中藥粉碎機(上海微型電機廠),BS224S精密電子天平(北京賽多利斯儀器系統有限公司),TU1900雙光束紫外可見分光光度計(北京普析通用儀器有限公司),IRIS/AP型電感耦合等離子體發射光譜儀(美國TJA公司),全自動回流消化儀(重慶南岸玻璃儀器廠)。

1.2試藥

蘆丁標準品(中國藥品生物制品檢定所,批號為0080-9705);硝酸、高氯酸均為優級純,其他試劑均為分析純,測微量元素用水為雙蒸水。烏蕨藥材于2008年10月采于杭州九溪,經熊耀康教授鑒定為烏蕨Stenolomachusanum(L.)Ching的地上部分,陰干,粉碎,備用。

2實驗方法與結果

2.1總黃酮含量測定[4]

2.1.1對照品溶液的制備:精密稱取105℃干燥恒重的蘆丁對照品16.50mg,加60%乙醇溶解定容于50ml容量瓶,得濃度為0.33mg/ml對照品溶液,備用。

2.1.2供試品溶液的制備:定量稱取烏蕨干燥粗粉5.0g,加16倍量0.1%HCl-60%乙醇回流提取4h,提取1次,提取液減壓濃縮,加60%乙醇定容至25ml,作為供試品溶液備用。

2.1.3標準曲線的制作:精密吸取標準品溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0ml,分別置25ml容量瓶中,加入5%NaNO21.0ml,搖勻,放置6min后加入10%Al(NO3)31.0ml,搖勻,放置6min后加入4%NaOH10ml,再加60%乙醇稀釋至刻度,混勻,靜置15min,于510nm處,以相應試劑作空白,測定吸光度,以蘆丁濃度為縱坐標,以吸光度值為橫坐標,繪制標準曲線,得回歸方程:Y=2.778X-0.0775(r=0.9991),結果表明蘆丁在0.016~0.99mg范圍內呈良好的線性關系。

中國論文聯盟-2.1.4精密度實驗:取蘆丁對照品溶液2.0ml,置25ml容量瓶中,按“2.1.3”項操作,平行測定5次,結果其RSD為0.21%,表明精密度良好。

2.1.5重復性實驗:取同1份樣品溶液5份,分別按“2.1.3”項操作,結果RSD為0.72%。

2.1.6穩定性實驗:取1份樣品溶液,按上述實驗方法在顯色完全后0、10、20、30、45、60min分別測定吸光度,結果RSD為1.08%。實驗表明:供試品溶液在1.0h內穩定的。

2.1.7加樣回收率實驗:取已知總黃酮含量的烏蕨樣品6份,分別精密添加已知濃度的蘆丁對照品適量。按供試品溶液制備方法制備,按“2.1.3”項操作,測定總黃酮含量,計算測定回收率,結果平均回收率為99.34%,RSD為1.82%。

2.1.8烏蕨不同部位總黃酮含量的測定:精密吸取提取液適量,按“2.1.3”項操作,測定吸光度A,結果見表1。表1烏蕨根、莖、葉、全草等不同部位總黃酮含量測定結果(略)

2.2微量元素含量的測定[5]

2.2.1供試品溶液的制備:各取藥材約0.5g,精密稱定,置50ml凱氏燒瓶,加8.0ml消化液[V(HNO3)∶V(HClO4)=4∶1],靜置過夜,加熱回流消化至無色透明,冷卻后,定量轉移至100mL容量瓶中,加超純水稀釋至刻度,搖勻,備用。取相同體積的消化液,同法消化,制備空白溶液。

2.2.2混合標準溶液的制備:分別取各重金屬元素標準品溶液適量,用5%硝酸溶液制成混合溶液,梯度稀釋,作為混合標準品溶液備用。

2.2.3測定方法:儀器工作參數:檢測器CID的低波段(<265nm)積分時間:15s;高波段(>265nm)積分時間:5s;進樣蠕動泵轉速:100r/min;進樣霧化器氬氣壓力:28psi;輔助氣流量:1.0L/min;高頻發生器功率:1500W;樣品沖洗時間:5s;測定波長范圍:193.7~407.7nm。

依次將儀器的進樣管插入各個濃度的混合標準品溶液中進行測定,以每一濃度測得的3次讀數的平均值為縱坐標,相應元素標準溶液濃度為橫坐標,作標準曲線,并進行方法學考察。由各元素的標準曲線計算微量元素的含量,測定結果見表2。表2烏蕨根、莖、全草、葉等不同部位微量元素含量測定結果(略)

3討論

3.1由實驗可知,烏蕨全草、根、莖、葉等不同部位總黃酮含量分別11.89%、4.47%、3.46%和11.75%,總黃酮含量在葉中較高,而根與莖中總黃酮含量較低。烏蕨富含黃酮類化合物,而黃酮類化合物在臨床上具有預防血液類疾病、治療冠狀動脈硬化、抗癌、抗菌、抗衰老、抗糖尿病等作用,食品上作為甜味劑、天然色素等食品添加劑。因此提取烏蕨中的黃酮類化合物,不單可以用于臨床藥物的研究,也可用于食品與工業方面。

3.2元素測定結果表明,烏蕨全草、根、莖、葉等不同部位均含有豐富的微量元素,其中含B、Ca、K、Na、P、S等多種常量元素;此外還含Cu、Fe、Zn、Cr、Co等多種人體必需的微量元素。其中K、Fe、Ca、Na等元素含量均較高,其次為Mn、Zn、Cu。而有害元素Pb、As、Cu在地上部分含量較低,根中Pb、As、Cu含量都高出了《藥用植物及制劑進口綠色行業標準》(Hg≤0.2μg/g、Pb≤5.0μg/g、As≤2.0μg/g、Cd≤0.3μg/g和Cu≤20.0μg/g),可能是由于本身的沉積或者土壤受到污染造成。

【參考文獻】

[1]江蘇新醫學院.中藥大辭典(上冊)[S].上海:上海人民出版社,1985:157158.

[2]馬鶯,王靜.功能性食品活性成分測定[M].北京:化學工業出版社,2005:253.

[3]吳巧鳳,曾曉艷.蘇州薺苧總黃酮與微量元素含量的測定[J].廣東微量元素科學,2004,11(9):3437.