到手香水提液研究論文

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1材料

1.1藥材及水提液的制備和揮發油的提取到手香，2001年引種于陽西縣原中山醫科大學藥材基地，在中山大學校園內繁殖。到手香水提液最大濃度濃縮液（稠膏）的制備：取到手香地上部分，晾干剪碎后，精密稱取碎葉,加一定體積蒸餾水，浸泡后加熱煮沸提取，冷卻后用雙層紗布過濾，濾渣用蒸餾水清洗3次并過濾，棄去濾渣，合并濾液。濾液再用布氏漏斗墊雙層濾紙抽濾，得到濾液為到手香水提液。在溫度為70℃、壓力為-0.08MPa、轉速為60r/min的條件下，減壓蒸餾濃縮至最大濃度稠膏，并保證稠膏不會凝結，得到到手香水提液最大濃度濃縮液（稠膏）［3］，濃度為4.706g/ml。供小鼠最大耐受量實驗用。揮發油的提取：取到手香地上部分，晾干剪碎后，精密稱取碎葉50.0g于1000ml蒸餾瓶中，加入600ml蒸餾水，按《中國藥典》規定的方法揮發油測定法［4］提得黃色油狀物,出油率為1.2%。取揮發油適量,用食用油稀釋至各個濃度，供霍恩氏法LD50測定用。

1.2動物昆明小鼠，體重18～22g，普通級標準，合格證號：粵檢證字第2003A030號，由原第一軍醫大學(現更名為南方醫科大學)實驗動物中心提供。

2方法

2.1到手香水提液急性毒性實驗（最大耐受量測定）選擇健康昆明小鼠，體重在18～22g共20只，雌雄各半，按性別分兩組，每組10只，稱重和標記，分開飼養，實驗前和實驗的觀察期內，均按正常飼料條件飼養。

灌胃給藥：灌胃給藥小鼠1次，0.8ml/20g（到手香水提液濃度4.706g/ml）。連續觀察14d，詳細記錄動物的反應情況，包括飲食、運動狀況、排泄狀況等各個指標，計算出總給藥量（折合生藥量g/kg）。

2.2到手香揮發油急性毒性實驗（霍恩氏法LD50測定）選擇健康昆明小鼠20只，體重18～22g，稱重、標記，隨機分4組，每組5只，雌雄分別為2，3只。各組小鼠分別灌胃給藥0.4ml/20g（給藥前禁食16h，不禁水）。給藥后連續觀察7d，詳細記錄動物的反應情況，包括飲食、運動狀況、排泄狀況、死亡時間及當時狀況等各個指標［5］。

到手香揮發油濃度：用食用油將到手香揮發油稀釋至各個濃度：0.05，0.1075，4.65，10.0ml/ml，給藥劑量遞增比為1013=2.15，分別為1.0，2.15，4.62，10.0ml/kg。

3結果

3.1到手香水提液急性毒性實驗（最大耐受量測定）小鼠雌雄各10只給藥后，蜷縮少動，但很快就恢復正常，小鼠無其它異常行為，7d無小鼠死亡，且各方面狀態正常，體重增至24～28g，14d后亦無死亡，且各方面狀態正常，體重增至32～37g，將小鼠處死，解剖觀察，未見腦、心、肝、肺、脾、腎、胃、腸有肉眼可見的明顯異常，毛色正常。結果見表1。表1到手香水提液最大耐受量實驗結果（略）

小鼠對到手香水提物（折算為生藥量）最大耐受量：4.706g/ml×0.8ml/20g=188.2g/kg。

3.2到手香揮發油急性毒性實驗（LD50測定）第1組、第2組各有一只在第2天死亡，其余4只除在前兩天活動略為減緩外，各項指標均正常，且7d后亦無死亡；第3組在兩天內全部死亡，第4組在3h內全部死亡（結果見表2）。后兩組動物在給藥后蜷縮少動，進食飲水都大為減少，甚至不進食不飲水，直至死亡未見有掙扎等任何動作，死亡后解剖觀察動物，未見腦、心、肝、肺、脾、腎、胃、腸有肉眼可見的明顯異常，毛色亦正常。

查霍恩氏法LD50值計算用表（劑量遞增法測定LD50值計算用表A1），劑量1＝1.00ml/kg、劑量2＝2.15ml/kg，劑量3＝4.65ml/kg，劑量4＝10.0ml/kg，組1，組2，組3，組4死亡動物數為1，1，5，5，對應的LD50值為2.37ml/kg，可信限為1.42～3.95ml/kg。按到手香揮發油提取率1.2%折算為生藥，則小鼠對到手香揮發油（折算為生藥）LD50為197.5g/kg，可信限為118.3～329.2g/kg。

4討論

小鼠對到手香水提液（折算為生藥量）最大耐受量：188.2g/kg，對動物無明顯急性毒性。按照20g小鼠與70kg人的體表面積之比為：387.9（山東中藥學院《中藥藥理學實驗講義》1994），轉換成人對到手香水提物（折算為生藥量）最大耐受量：1460.1g/70kg，因此可以初步推斷，對人來說到手香水提物無明顯急性毒性。

霍恩氏法測定小鼠對到手香揮發油LD50值為：2.37ml/kg，可信限為1.42～3.95ml/kg。轉換成人對到手香揮發油（折算為生藥量）LD50為：18.39ml/70kg，說明到手香揮發油對人也有一定的毒性。表2到手香揮發油急性毒性正式實驗數據（略）

到手香作為一個在國內沒有收錄而民間有使用的藥用植物，對其毒理學研究，包括水提液急性毒性實驗（最大耐受量測定）和揮發油急性毒性實驗（LD50測定），可為到手香使用提供安全的實驗數據，對到手香的實際應用有著重要的意義。同時這是對到手香進行進一步研究與藥效學研究提供理論基礎和科學依據。

【參考文獻】

［1］郭華仁，應紹舜.未見引種記錄的東南亞觀賞植物種源［J］.臺灣之種苗，1995，24（1）：26.

［2］中華人民共和國國家標準.GB：15193.3.

［3］王世清，鄭蕓.金鐵鎖的顯微和理化鑒定研究［J］.中國民族民間醫藥雜志，2002，11（6）：351.

［4］國家藥典委員會，中國藥典［S］.北京：化學工業出版社，2000：64.

［5］寧立人，洪恂.現代中藥學大辭典［M］.北京：人民衛生出版社，2001：392.

【摘要】目的對到手香進行毒理學研究，包括到手香水提液急性毒性實驗和到手香揮發油急性毒性實驗。方法將到手香水提液以最大濃度4.706g/ml，最大劑量0.8ml/20g對小鼠灌胃給藥，測定到手香水提液對小鼠的最大耐受量。采用霍恩氏（Horn）法，將小鼠隨機分4組，按1.0，2.15，4.62，10.0ml/kg劑量對小鼠灌胃給藥，測定到手香揮發油對小鼠半數致死量。結果到手香水提液（折算為生藥量）對小鼠最大耐受量：188.2g/kg，到手香揮發油對小鼠LD50為：2.37ml/kg。結論到手香水提液對小鼠無明顯急性毒性，到手香揮發油對小鼠有一定的急性毒性。

【關鍵詞】到手香急性毒性最大耐受量半數致死量