議NAP在血液病中鑒別診斷的應(yīng)用

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【摘要】目的研究中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶（nap）活性測定在血液病鑒別診斷中的應(yīng)用價值。方法采集215例血液病患者和30名健康人的靜脈血制備血涂片，經(jīng)Kaplow偶氮偶聯(lián)法進(jìn)行NAP細(xì)胞化學(xué)染色，顯微鏡油鏡觀察100個成熟中性粒細(xì)胞，以五級積分值記錄結(jié)果。結(jié)果急性淋巴細(xì)胞白血病(ALL)、類白血病反應(yīng)(LR)、再生障礙性貧血(AA)、慢性淋巴細(xì)胞性白血病(CLL)、多發(fā)性骨髓瘤(MM)，真性紅細(xì)胞增多癥(PV)6組疾病NAP積分明顯高于對照組(P<0.01)；CLL、惡性組織細(xì)胞病(MH)、骨髓增生異常綜合征(MDS-RAEBT)、陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥(PNH)4組疾病NAP積分明顯低于上述6組疾病和對照組(P<0.01)；AMLNAP積分略低于對照組，但差異無顯著性(P>0.05)，與ALL比較差異有高度顯著性(P<0.01)。結(jié)論NAP活性測定可支持血液病的鑒別診斷。

【關(guān)鍵詞】堿性磷酸酶；血液病

堿性磷酸酶主要見于成熟中性粒細(xì)胞、網(wǎng)狀細(xì)胞和吞噬細(xì)胞，其他細(xì)胞皆為陰性反應(yīng)。總結(jié)我院血液科215例血液病人的中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶(NAP)活性觀察，進(jìn)行對比分析，以探討NAP在血液病中鑒別診斷的應(yīng)用價值。

1資料與方法

1.1一般資料本組215例血液病均來源于我院血液科2002～2007年經(jīng)骨髓涂片細(xì)胞學(xué)分析、病理檢查及有關(guān)實(shí)驗(yàn)室檢查并結(jié)合臨床參照文獻(xiàn)［1］確診病例，其中再生障礙性貧血(AA)47例、骨髓增生異常綜合征(MDS-RAEBT)5例、真性紅細(xì)胞增多癥（PV）4例、急性髓細(xì)胞白血病(AML)69例、急性淋巴細(xì)胞白血病(ALL)50例、惡性組織細(xì)胞病(MH)3例、類白血病反應(yīng)（LR）13例、陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥(PNH)4例、慢性粒細(xì)胞白血病(CML)13例、多發(fā)性骨髓瘤（MM）4例、慢性淋巴細(xì)胞性白血病（CLL）3例。健康人群30例為對照組，其中男18例，女12例。患者和健康人群均采集靜脈血制備血涂片2張。

1.2試劑Kaplow偶氮偶聯(lián)法：①固定液：25%甲醛乙醇溶液；②丙二醇緩沖液：0.05mmol/L2-氨基-2-甲基-1，3-丙二醇溶液(pH9.75)；③基質(zhì)孵育液(pH9.4-9.6新鮮配制)：α-磷酸萘酚鈉20mg溶于緩沖液20ml，再加入堅(jiān)牢藍(lán)RR20mg；④蘇木素復(fù)染液。細(xì)胞染色方法:新鮮血片用固定液冷固定(4～10℃)30s，水洗、晾干后放入基質(zhì)孵育液(按上述方法新鮮配制)中，37℃溫浴30min，流水沖洗，晾干后蘇木素復(fù)染液復(fù)染5min，水洗、晾干。顯微鏡油鏡觀察100個成熟中性粒細(xì)胞，按每個細(xì)胞漿內(nèi)顆粒多少分成五級：(-)、(1+)、(2+)、(3+)、(4+)，用半定量記分法，以積分值記錄結(jié)果［2］。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理計(jì)量數(shù)據(jù)以±s表示，應(yīng)用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件，行單因素方差分析，以α=0.05為檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。

2結(jié)果

2.1對照組與血液病患者NAP積分結(jié)果對比AA、LR和ALL等的NAP積分顯著高于對照組；MDS-RAEBT、CML、MH、PNH的NAP積分明顯低于對照組，其中MH和CML的NAP積分最低；AML的NAP積分略低于對照組，但差異無顯著性，見表1。

2.2LSD及S-N-K多重比較結(jié)果AA與PNH的NAP積分差異有高度顯著性（t=4.95，P＜0.01)；NAP積分在LR與CML組間(t=16.62)、ALL與AML組間(t=15.08)、MH與MM組間(t=4.11)、CLL與CML組間(t=59.34)差異均有高度顯著性（P＜0.01)，這與楊曉春等人的研究結(jié)果一致［3］。

3討論

NAP是成熟粒細(xì)胞S顆粒釋放的一種酶，其活力與成熟粒細(xì)胞的成熟程度和功能、感染的程度、細(xì)菌或病毒的種類有關(guān)［2］。在嚴(yán)重細(xì)菌感染，LR、AA、ALL、CML急性變，PV、MM等疾病中NAP活性增高；在CML、MH、MDS-RAEBT、DNH、繼發(fā)性紅細(xì)胞增多癥等疾病中NAP活性減低。

表1215例血液病與對照組NAP積分比較（略）

注：t為與對照組比較

本組資料顯示，在215例血液病中各組疾病NAP的活性積分與對照組比較：ALL、LR、AA、MM均明顯高于對照組；MDS-RAEBT、CML、MH、PNH均明顯低于對照組。而在各組疾病的鑒別診斷，如PNH與AA的鑒別：前者降低，后者顯著增高，AA者中性粒細(xì)胞越低，貧血越重，NAP則越高。經(jīng)過觀察，AA在緩解時NAP積分有下降趨勢，但很難恢復(fù)正常。ALL與AML的鑒別中，前者NAP活性增多明顯，后者NAP活性正常或略低。CML與LR的鑒別中，前者明顯降低，后者明顯增高［4］。MH與反應(yīng)性組織細(xì)胞增生癥差異有顯著性，前者降低，后者增高。

綜上所述，NAP的活性對于血液病的鑒別診斷有重要臨床價值。

【參考文獻(xiàn)】

［1］張之南.血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)［M］.天津:天津科學(xué)技術(shù)出版社，1991：1.

［2］陳方平，覃西.血液學(xué)檢驗(yàn)［M］.2版.北京:人民衛(wèi)生出版社，2003：48-49.

［3］楊曉春.中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶活性測定在全血細(xì)胞減少疾病鑒別診斷中的價值［J］.淮海醫(yī)藥，2006，24(6)：487-488.

［4］石青武.中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶染色在血液病診斷中的應(yīng)用［J］.青海醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2004，25(3)：213-215.