熒光范文10篇

【摘要】本文對眼底熒光血管造影檢查技術進行了基本介紹，對眼底熒光造影室護士應具有的素質進行綜述，通過做好造影前的宣教、明確造影過程中可能出現的各項不良反應及應對措施等一系列方法來提高造影室護理人員的綜合素質，以期更好地預防患者造影檢查過程中不良反應的發生。

【關鍵詞】眼底熒光造影；不良反應；護理；素質

1眼底熒光血管造影的簡介及重要性

眼底熒光血管造影（fundusfluoresceinangiography，FFA）是一項特殊的診斷眼底疾病的檢查方法，目前已廣泛應用于對眼科疾病患者的診治中[1]。這項技術的原理是對患者靜脈注射熒光造影劑，利用熒光造影劑在眼睛血液循環過程中產生的熒光，采用眼底照相機動態地記錄病人眼底血管的結構及異常狀況，從而反映病人眼底血管的生理及病理變化[2]。眼底熒光血管造影檢查是眼科一種重要的形態檢查，可以發現眼底鏡難以確定的視網膜脈絡膜病變[3]，能夠盡快了解到視網膜的血液循環情況及血管狀態，為臨床提供重要診斷參考[4]。但是熒光素鈉注入人體后可能發生一系列不良反應，如惡心、嘔吐、皮疹、過敏性休克，嚴重的甚至威脅生命[5]。因此，在實施FFA前應向病人做好細致的溝通及有效的護理，消除病人的疑慮和緊張心理，醫護人員熟悉FFA容易引起的各類不良反應的表現及應對方法，有利于減少不良反應的發生、提高病人的檢查配合度，因此提高眼底熒光造影室護士的自身素質有著非常重要的意義。

2眼底熒光造影室護士應具有的素質

眼底熒光造影檢查存在一定的潛在風險，熒光造影室護士的技術水平、護理經驗及對搶救病人的熟練程度直接關系病人的安危及不良反應的發生幾率，為減少不良反應的發生，提高造影檢查效果，必須科學、嚴格、規范地對造影室進行管理，并提高造影室護理人員的專業素質水平。2.1遵循護理原則。造影前應嚴格遵循“三查七對”制度，檢查藥液有無破損、變質，有效期，觀察藥物是否有渾濁或顆粒物。充分告知患者眼底熒光造影檢查的意義，不良反應及禁忌癥，患者知情同意書上患者及家屬雙人簽字，為患者做造影編號，記錄患者電話，疾病種類，住址，對患者基本情況進行造冊登記。2.2做好造影前的宣教。2.2.1對患者進行飲食護理。由于空腹患者接受眼底造影檢查更易發生嘔吐、惡心、暈厥等不良反應，因此造影前應做好充分告知患者不能空腹進行造影檢查，鼓勵患者正常進食后再進行檢查。檢查前，囑咐患者清淡飲食，盡量不要食用刺激、辛辣及易導致腹脹的食物，也不要暴飲暴食，患者應在機體處于正常的狀況下接受檢查。2.2.2對患者進行常規檢查。詢問病人既往史、藥物過敏史、全身疾病史及家族史，對孕婦及嚴重過敏體質的患者必須禁止其做造影檢查以防止不良事件的發生。2.2.3對患者進行心理護理。造影前向患者及其家屬詳細介紹檢查的流程及造影時需要注意的事項。由于造影是在暗室進行，患者易出現緊張、恐懼、無助的心理，因此應主動與患者進行互動，給予患者鼓勵與肯定，讓患者情緒穩定，配合醫護人員進行造影檢查。還應告知患者散瞳后出現視物模糊及畏光屬于正常現象，6～8h后癥狀消失，以消除患者的疑慮、緩解患者的緊張、無助情緒，增強患者的安全感[6]。2.3搶救藥物及設備的準備。造影室內要備齊各項搶救物品及搶救器械，如血壓計、聽診器、供氧管、輸液器、刀片、頭皮針、手電筒、電動吸引器、氧氣袋、心內注射針等及急救藥品，如阿托品、鹽酸腎上腺素、異丙腎上腺素、多巴胺、尼克剎米、鹽酸洛貝林、地塞米松、25%葡萄糖、0.9%NS等。由造影室護士每天清點、審核并記錄，保證搶救儀器設備均處于備用狀態，搶救藥品無過期情況。造影室門口備用平車，便于轉送患者時使用，造影室內有完善的患者過敏性休克搶救操作流程，眼科醫護人員要做到全員掌握。2.4明確造影過程中可能出現的不良反應及應對措施。2.4.1胃腸道刺激反應、惡心、嘔吐與應對措施。造影過程中常常出現胃腸道刺激反應、惡心、嘔吐等一過性的不良反應，一般發生在熒光素鈉注入后的30～80秒內，此時囑咐患者深呼吸數次，精神放松，休息片刻，同時按掐患者的內關穴，數秒后癥狀即自行緩解。2.4.2皮膚瘙癢、蕁麻疹與應對措施。如果遇到病人出現皮膚瘙癢、蕁麻疹，若癥狀較輕可給予患者口服抗過敏藥撲爾敏4mg，若癥狀較為嚴重，需要給患者注射5mg地塞米松。吸氧對癥處理后大多數患者當天瘙癢癥狀即消失，皮疹逐漸減退[7]。2.4.3呼吸困難、暈厥，胸悶、氣促與應對措施極少數患者在造影開始后出現呼吸困難、暈厥，胸悶、氣促等不良反應，此時應立即停止檢查，醫護人員輔助患者取平臥體位，就地搶救，遵醫囑給予患者靜脈注射地塞米松、腎上腺素，同時給予氧氣吸入5L/min，密切關注患者血壓、脈搏的變化情況[8]。必要時給患者建立靜脈通道并請急診內科或麻醉科醫師協助搶救。2.5造影結束后的健康宣教。造影檢查結束后叮囑患者在造影室內休息30min以進一步觀察病人情況，確定無不良反應后方可讓其離去。造影檢查完后應注重交代患者因散瞳及注射熒光造影劑會導致暫時的視覺改變，視物模糊，流淚、畏光等現象，叮囑病人多休息，避免強光，禁止駕車等活動。熒光素鈉染料大部分經腎臟代謝隨尿液快速排出體外，因此注射熒光素鈉數小時后尿會變黃，必須向病人及家屬解釋這是正常現象，以消除患者的恐懼心理。指導患者檢查結束當天大量飲白開水，促進體內的熒光素盡快排出體外，通常24h內造影劑即可從患者體內完全排出。2.6加強責任心。護理職業的高風險性質決定了從業人員必須具備高度的責任心，一個優秀的造影室護士必須具有高穩定性、高自律性、高慎獨性，眼睛是一盞明燈，作為一名造影室護士更應具備時刻維護患者生命和安全的責任心。

1常用照明方法與特點

常用的電光源主要有熱致發光光源，氣體放電發光光源，固體發光光源等三類。

熱致發光光源如白熾燈，它利用斯涅藩－波爾茲曼定律，即物體溫度越高，它幅射出的能量越大。這可用式（1）表示。

E=μ×ξ×T4（1）

式中：E為物體在溫度T時單位面積和單位時間內的紅外幅射總能量；

圖1

[摘要]在原子熒光的含量分析過程中，由于生物樣品成分復雜，對于不同種類的生物樣品，其前處理方法的多樣性對分析測試的效率和精密度均有影響，并有多種進樣技術被用于生物樣品的分析測試中。本文歸納總結了目前原子熒光光譜技術中常見的生物樣品如綠葉植物、果蔬、糧食制品、酒類、動物源制品等生命應用等領域的常見生物類樣品的預處理及儀器進樣與聯用技術，旨在為與生物樣品相關的原子熒光分析提供參考。

[關鍵詞]生物樣品；原子熒光；前處理；消解；進樣技術

原子熒光光譜分析技術基于不同原子的波長輻射特異性，經熒光強度對樣品進行定量分析，具有高效率和高準確率的特點，被廣泛應用于污染檢測，食品科學，生命科學，地質學等領域[1-3]。目前，我國已將利用原子熒光光譜分析技術檢測食品中的重金屬含量列為國家檢測標準之一。在原子熒光光譜分析領域，所涉及的生物樣品種類繁多，且不同種類的樣品如植物、肉類、糧食、糧油、毛發等的有機物組成和元素含量有較大差別，在實際測試時，選用有針對性的樣品預處理方法與進樣預處理聯用技術，有利于提高測試效率，降低基體干擾，減少儀器損耗。不同于常規巖石，礦石，沉積物，土壤等固體樣品，為了保證樣品的代表性和結果的可靠性，在樣品消解前，需有針對性地進行選材，干燥，勻漿和研磨等預處理流程。此外，生物樣品含有大量有機物，目前采用的前處理消解方法有直接稀釋法、萃取法、干灰化法、酸溶法、加壓分解法、微波消解法和酶分解法等。其中，低溫干灰化法和高溫干灰化法中高溫或干燥的處理過程，會使微量金屬離子損失嚴重，導致各微量元素的回收率降低。一般采用酸溶法破壞樣品中的有機物，釋放被測元素，以利于后續測定。常見的酸溶法有敞口酸消解法、加壓消解法和微波消解法等。針對不同類型的生物樣品，在消解前，需要進行預處理。

1樣品預處理

1.1植源性樣品

植物根、莖、葉樣品經清洗，低溫干燥，研磨，過篩后，使用酸溶法溶解。在敞開酸溶法中，一般采用硝酸+高氯酸組合，加熱溶解樣品。使用微波消解時，一般采用硝酸+過氧化氫溶解樣品。陳雙等[4]優化了微波消解茶葉的硝酸和過氧化氫最佳含量，提出硝酸8mL和過氧化氫1mL進行消解時，可將0.2000g茶葉完全消解，且熒光強度較好。蔬菜、水果類樣品，將樣品清洗干凈后，將樣品分為皮、果肉和種子，果肉可用攪拌機打成糊狀并勻漿；或將果皮，果肉，種子分別用烘箱低溫烘干至恒重，粉碎研磨后備用。大米，淀粉類糧食樣品，直接研磨，過篩后，使用酸溶法溶解。酒類樣品，將樣品先進行低溫消解，揮發酒精，整個過程中應注意防止樣品沸騰以致碳化。在樣品剩余1~2mL時加入硝酸進行常規酸溶法消解。糧油類樣品，可直接稱取樣品后進行消解處理。沈佳等[1]在使用原子熒光光譜法測定山茶油中的痕量砷時發現，使用濕法消解過程中，樣品反應劇烈，易有泡沫溢出且易爆沸，且樣品容易發生碳化。經優化后發現消化0.30g樣品油，使用硝酸6mL和過氧化氫4mL進行消解時，消解最完全，測定結果的精密度較為理想。開建榮[6]等將大米用粉碎機粉碎，過100目篩，稱取適量過篩后的大米粉分別按照10毫升混合酸(硝酸與高氯酸體積比為4︰1)濕法消解和6mL硝酸混合2mL過氧化氫微波消解進行前處理，測試的結果表明，微波消解試劑消耗量少，耗時短，過程繁瑣，從可量化的指標來看，微波消解優于濕法消解。此外，對于菌類樣品，金針菇等攜帶培養基質的鮮品，需去除根部培養基；雙孢蘑菇、草菇、香菇等鮮品，需將帶有培養基質或覆土的菇腳部分去除，并用干凈紗布或毛刷輕輕擦去樣品表面的附著物。水分含量在15%以上的干制食用菌樣品，清洗完后需在60~70℃下烘至適宜粉碎(用于農藥殘留檢測的樣品除外)，同時測定烘干前后樣品水分。食用菌干品，用干凈毛刷或紗布除去表面附著物，不可水洗。經碎樣后進行常規酸溶法消解。

摘要：電子鎮流器由于具有節能，發光無頻閃和易于實現聯網控制（如IEC929附錄E的有關要求）等一系列優點，而得到了廣泛的應用。熒光燈如采用適當的燈絲預熱方法，對提高熒光燈的壽命有非常重要的作用。介紹了幾種常用的熒光燈燈絲預熱方法及特點。

關鍵詞：熒光燈；燈絲電流預熱型；燈絲電壓預熱型

1常用照明方法與特點

常用的電光源主要有熱致發光光源，氣體放電發光光源，固體發光光源等三類。

熱致發光光源如白熾燈，它利用斯涅藩－波爾茲曼定律，即物體溫度越高，它幅射出的能量越大。這可用式（1）表示。

E=μ×ξ×T4（1）

［摘要］目的：合成(SA)z(Bio)xPVA(BCPDA)yEu3+復合物，并用于構建妊娠相關血漿蛋白A固相時間分辨免疫熒光試劑。方法：用PVA作為載體結合BCPDAEu3+和生物素親和素，以雙抗體夾心法原理，結合生物素標記抗體和包被抗體建立PAPPA時間分辨免疫熒光試劑，并進行方法學評價。結果：成功的合成了活性的(SA)z(Bio)xPVA(BCPDA)yEu3+復合物，構建PAPPA試劑檢測靈敏度為0.7mIU/L；批內變異系數在3.89%～4.96%之間,批間變異系數在7.35%～9.27%之間。結論：合成的(SA)z(Bio)xPVA(BCPDA)yEu3+復合物較高的反應活性，可以用于多種試劑的構建。構建的PAPPA試劑靈敏度高，具有潛在的臨床應用價值。

［關鍵詞］妊娠相關血漿蛋白A；固相時間分辨熒光免疫；親和素—生物素—聚乙烯胺—4,7二氯磺苯基1，10啡羅啉2，9二羧酸—銪復合物；唐氏綜合征

DevelopADirectSolidPhaseLanthaneTimeresolvedFluoroimmunoassayReagentofPAPPAutilizingPVA

Abstract:ObjectiveTodevelopadirectsolidphaselanthanetimeresolvedfluoroimmunoassayreagentofPAPPAbysynthesizingacomplexof(SA)z(Bio)xPVA(BCPDA)yEu3+.MethodsPolyvinylamine(PVA)waslabeledwithbiotinstreptavidinandeuropiumchelateof4,7bis(chlorosulfophenyl)1,10phenanthroline2,9dicarboxylicacid(BCPDA).UsinglabeledPVAcomplex,WedesignedtwositesandwichtimeresolvedfluoroimmunoassayofPAPPAandevaluatedassaycharacteristicsofPAPPAkit.ResultsWesuccessedsynthesizingaconjuageteof(SA)z(Bio)xPVA(BCPDA)yEu3+andareagentofPAPPA.Detectionlimitsachievedwere0.7mIU/L.Thecalibrationcurvewaslinear010000mIU/L.Intraandinterassayimprecision(CV)was3.89%4.96%and7.35%9.27%.Recoverywas95.8%104.2%.ConclusionsTheconjugateof(SA)z(Bio)xPVA(BCPDA)yEu3+synthesiziedwasreactive,highlyfouorescent.Asortsofkitcouldbesynthesized,takingadvantageofit.ThereagentofPAPPAwaspotentiallysuitedforuseinclinicalwithhighlyanalyticalsensitivity.

Keywords:PregnancyassociatedplasmaproteinA;Directsolidphaselanthanetimeresolvedfluoroimmunoassay;StreptavidinbiotinPolyvinylamineeuropiumchelateof4,7bis(chlorosulfophenyl)1,10phenanthroline2,9dicarboxylicacid;Down''''sSyndrome

妊娠相關血漿蛋白A(PregnancyassociatedplasmaproteinA，PAPPA)是一種高分子α2糖蛋白，20世紀70年代在孕婦血清中被發現［1］。在孕婦血中主要PAPPA是胎盤滋養層組織分泌，它是一種異源四聚體，由兩個分子量為200000~250000亞基構成。PAPPA亞基和兩個嗜紅細胞主要基礎蛋白(Proformofeosinophilmajorbasicprotein)以二硫鍵結合而成［2］，在孕婦血中只存在微量游離單體PAPPA。PAPPA亞基由1547個多聚核苷酸構成，包括1個拉長的鋅指結構，3個Lin—notch重復序列，以及5個短一致重復序列［3］。在體內PAPPA是一種蛋白酶，主要針對胰島素樣生長因子結合蛋白4(IGFBP4)和胰島素樣生長因子結合蛋白5(IGFBP5)起作用。胰島素樣生長因子I(IGFI)在促進細胞分裂和增殖起重要作用，它主要通過IGF1受體起作用，IGFI、II的生物活性受6個高親和性IDFBP調節［4，5］。PAPPA主要用于產前篩查唐氏綜合征(Down''''sSyndrome，DS)，迄今醫學上對此病尚無有效的治療和預防措施，只能通過產前篩查防止DS兒的出生，但目前開展的絨毛活檢,羊水穿刺及臍帶血穿刺均為侵入性檢查,有1%～3%的流產率,且方法繁瑣,出報告時間長,不適宜大范圍孕婦的普查,僅限于高危人群的診斷。大量報道認為PAPPA可作為DS胎兒產前篩查的的標志物。在15周～20周通過結合孕婦孕周、超聲診斷和FreeβHCG可以鑒別65%～75%，但要在3個月～6個月結合AFP、游離E3以及抑制素上述成分可鑒別85%～90%［6］。有文獻［7］報道PAPPA在急性冠狀動脈綜合征(ACS)的早期診斷有一定的意義，PAPPA在ACS患者血清含量＜30mIU/L，同時結構不同于孕婦體內的PAPPA且存在動態變化，必須利用超靈敏的方法進行檢測。國內PAPPA的診斷試劑大多為ELISA和PerkinElmer公司生產的解離增強時間分辨熒光免疫分析(dissociatedenhancelanthanetimeresolvedfluoroimmunoassay,DELFIA)試劑，無國產PAPPA時間分辨熒光試劑。我們利用PVA(聚乙烯胺)作為載體結合BCPDA鑭系螯合物合成一種高靈敏的固相時間分辨熒光免疫分析(directsolidphaselanthanetimeresolvedfluoroimmunoassay,DSLFIA)試劑。為提高檢測靈敏度和克服BCPDA標記抗體使抗體失活的問題，我們引入了生物素親和素(biotinstreptavidinsystem)系統。

【摘要】目的采用熒光光度法測定加替沙星的含量。方法在pH6.0的Britton-Robinson(B-R)緩沖溶液中,剛果紅能與鈣黃綠素生成配合物,使鈣黃綠素熒光猝滅,加入加替沙星后,加替沙星與剛果紅可生成比鈣黃綠素-剛果紅更穩定的配合物,使鈣黃綠素游離重現熒光。結果將該方用于片劑、粉針劑和尿液中加替沙星的測定,結果與文獻報道的紫外法一致。結論所用方法簡單、快速、準確、靈敏。

【關鍵詞】鈣黃綠素;剛果紅;加替沙星

Fluorometrydeterminationofgatifloxacinwithcalcein-congored

【Abstract】ObjectiveToestablishamethodfordeterminationofgatifloxacinbyfluorometry.MethodsThecomplexbetweencongored(CR)andcalceininpH6.0Britton-Robinson(B-R)buffersolutionquenchedfluorescenceofcalcein.Thecomplexofgatifloxacin-CRwasmorestablethanthatofcalcein-CR.Whengatifloxacinwasaddedintosystem,thecalceincouldbefreedanditsfluorescenceappearedagain.ResultsThismethodhadbeenappliedtothedeterminationofgatifloxacinintablet,injectionandurine,andtheresultswereveryclosetothoseobtainedbyusingUVmethodthatreported.ConclusionThismethodissimple,rapid,accurateandsensitive.

【Keywords】calcein;congored;gatifloxacin

加替沙星(gatifloxacin,AM-1155,GFLX)是新的第四代喹諾酮類抗生素藥物,具有抗菌譜廣,抗菌活性強的特點。它對革蘭陽性菌、革蘭陰性菌、厭氧菌及衣原體均具有強大的抗菌作用[1]。加替沙星的測定方法有高效液相色譜法、熒光光度法、反相離子對色譜法、高效毛細管電泳法和紫外分光光度法[2~6]等。但利用鈣黃綠素-剛果紅熒光體系來測定加替沙星含量還未見報道。本文經研究發現剛果紅能與鈣黃綠素生成沒有熒光的配合物,使鈣黃綠素熒光猝滅,加入加替沙星后,加替沙星與剛果紅反應生成比鈣黃綠素-剛果紅更穩定的配合物,游離出鈣黃綠素,釋放出熒光。以此為基礎,建立了測定加替沙星的新方法。

摘要：熒光PCR定量技術(QuantitativePCR)是一種新興的基因定位技術。這項技術靈敏、簡便、快速、不需使用放射性同位素，PCR完成后，通過測序儀的自動識別即可對待測DNA進行定量分析。在遺傳病，特別是一些以大片段缺失為主要突變類型的遺傳病診斷中，熒光PCR定量技術發揮了很重要的作用。

關鍵詞：熒光PCR定量技術；基因定位技術；遺傳病

在早期的遺傳學分子診斷中，主要依賴于SouthernBlotting，寡核苷酸雜交等技術。自1985年Saiki等首次描述聚合酶鏈反應(polymerasechainreaction，PCR)以來，PCR技術因為其靈敏特異，省時省力等諸多優點而受到了人們的高度重視，已經應用于生物醫學和化學等基礎研究的各個領域，并且成為醫學臨床和法醫學研究的強有力分析工具之一[1-3]。然而，近幾年來，研究者們不再滿足于得知某一特異DNA序列的存在與否，他們更著眼于對其進行精確的核酸定量。盡管把PCR作為一種定量的工具，在技術上還面臨著一些挑戰。熒光PCR基因定位技術是近十余年來興起的一種分子生物學技術，與其他定量方法相比，具有靈敏、簡便、快速、不需使用放射性同位素的特點，在基因表達、傳染病和遺傳病的診斷等方面迅速得到了廣泛應用。

一、熒光PCR基因定位技術的原理

熒光PCR定量技術的主要原理為：在PCR前，通過化學方法在引物的5’端通過共價方式連接一個熒光分子。由于在進行PCR時，引物和待擴增模板端的堿基不需要完全匹配，熒光PCR引物和普通PCR引物一樣，能夠對待測模板進行指數擴增。擴增完成后，根據PCR的產量，將熒光PCR產物直接或按一定比例稀釋后，和內標、載樣緩沖液混合，在自動測序儀上進行電泳。在自動測序儀內激光的激發下，PCR產物上的熒光分子發出固定波長的激發光，被儀器內的光電管捕獲。根據PCR產物從開始電泳到經過光電管的時間，測序儀自動計算出相應產物的實際堿基數。不同泳道之間電泳速度的差別，通過各產物內混合的內標校正。同時，測序儀也自動標出相應產物的熒光強度，該數值就是熒光PCR定量技術對模板進行定量與定位的基礎。與非定量PCR分析方法不同，熒光PCR的操作程序有助于評估污染的情況，即測出污染的程度，即使陰性對照產生了正的信號，只要這些信號比實驗樣品的低得多，依據這樣的結果，至少可以推測出實驗中所得出的信號是真實的。在一定程度上，熒光PCR消除了普通PCR過于敏感、假陽性率高的缺點。熒光PCR常用于研究發病機制、估計病毒的負荷量、監測臨床治療進展或用于診斷遺傳缺陷等。通過對靶基因量的檢測，將其與疾病的臨床表現、臨床分型以及各種標志酶的值聯系起來，為疾病的診斷和藥物治療監測提供科學的依據。目前，該技術已廣泛應用于多種遺傳病的診斷和產前篩查，如地中海貧血、兒童型脊肌萎縮癥、杜氏/貝氏肌營養不良、胖骨肌萎縮癥和各種染色體病等。

二、熒光PCR基因定位技術在遺傳病診斷中的應用

一、方法

1.材料

實驗于2013年4～5月在連云港市第一人民醫院麻醉科、疼痛科、病理科、影像科、連云港市臨床醫學實驗中心與神經外科實驗室完成。健康清潔級三、四月齡家兔8只，雌雄各半，體重2.5～3.1kg，由徐州醫學院動物中心提供[許可證號：SCXX（蘇）2003～0003]。動物置于安靜、溫暖（15～20℃）、避強光的環境下正常喂養48h，禁食24h后進行實驗。實驗中對動物的處置符合中華人民共和國科學技術部頒布的《關于善待實驗動物的指導性意見》的相關要求。儀器與試劑：單層螺旋CT機(SiemensEmotion)、CM1100冰凍切片機(Leica，Germany)、ZX-004熒光顯微鏡，PM-30照相系統(Olympus，Japan)、丙泊酚（商品名：得普利麻；200mg/支，AstrZeneca，UK）、氯胺酮（0.1g/支，江蘇恒瑞醫藥股份有限公司）、核黃(Sigma，USA)。

2.實驗方法

核黃逆行神經追蹤8只家兔按隨機數字表法分為2組。經耳緣靜脈注射丙泊酚(2mg/kg)和氯胺酮(2mg/kg)麻醉家兔后，在CT引導下經雙側C3/4關節突關節分別注射熒光逆行神經追蹤劑核黃50ul(1g/L)，進行神經追蹤。組織標本制備及形態學觀察：分別于術后18、36h再次麻醉家兔，經心臟依次灌注生理鹽水300～400ml、20g/L多聚甲醛和12.5g/L戊二醛的0.1mol/L磷酸緩沖液（pH7.3）500～800ml、含50g/L蔗糖的磷酸緩沖液（4℃）500ml。隨后分別取雙側頸胸椎脊神經節、雙側頸胸交感神經節、腸系膜下神經節、脊髓、頸椎間盤纖維環、頸椎間盤髓核、頸椎關節突滑膜、肩關節滑膜，在含200g/L蔗糖的磷酸緩沖液（4℃）中過夜后，行連續冰凍切片，分別做成2套，一套20um蒸餾水貼片，直接在OlympusZX-004熒光顯微鏡下觀察，拍攝光學相片。另一套7um行蘇木精-伊紅染色后置于熒光顯微鏡下，觀察有無新的發現。

3.主要觀察指標

縣科技有限公司座落在縣鳳凰工業園區，占地110畝，分二期建設。目前，一期52畝建筑面積11000平方米已全部竣工，辦公樓、員工宿舍全部裝修完成，擬于12月中旬入駐，四棟廠房正在設備安裝，擬于12月底試生產。

一、關于縣科技有限公司原材料的來源

該公司生產用的主要原材料是硼廢料和熒光粉廢料。其中硼廢料來源于硼磁材在生產加工中成型、切削、磨床廢料，約占硼產量的30%；熒光粉廢料來源于稀土三基色制粉、涂料及廢管回收環節。該公司大多股東在冶金行業中工作多年，長期與產品上下游的硼和熒光粉生產或需求企業建立了良好的合作關系，公司成立后，與市新世紀材料有限公司、黃山桂明廢舊金屬回收有限公司、贛州立強新材料有限責任公司、贛州海川工貿有限公司等企業分別簽訂了每月提供硼廢料100噸的長期合作合同（四個公司合計每月400噸）。原材料供應充分。

二、關于縣科技有限公司工藝技術

該公司是從事硼廢料及熒光粉廢料的生產企業，工藝技術采用氧化焙燒、鹽酸優溶的硼生產的專有技術，以及低酸低溫回收熒光粉廢料的專有技術，其中關鍵設備有內熱式回轉窯及外熱式回轉窯、雷蒙磨大型壓濾機等，均是硼廢料及熒光粉廢料綜合利用的專用設備。

從上述情況看，該公司是專業從事硼廢料及熒光粉廢料綜合利用的生產企業，建設年處理硼廢料5000噸、熒光粉廢料10000噸，綜合回收生產氧化鐠、氧化鋱、氧化銪等高純稀土氧化物1500噸，無論是原料來源，還是工藝技術以及經營管理等方面，都有本身的優勢。

急性白血病（acuteleukemia，AL）是造血干細胞惡性克隆性疾病，為發病率占首位的小兒臨床惡性血液腫瘤疾病。AL可以分為兩大類：急性淋巴細胞白血病（acutelymphoblasticleukemia，ALL）和急性髓細胞白血病（acutemyeloidleukemia，AML）。主要臨床癥狀為貧血、出血、器官浸潤和感染等，嚴重威脅患兒生命安全[1]。國際上一般通過MICM[綜合形態學（morphology）、免疫學（immunology）、細胞遺傳學（cytogenetics）、分子生物學（moleculebiology）]分型對初診惡性血液病患者進行準確診斷與規范治療，以提高患者生存率[2-4]。因此，及時、有效的診斷對于AL患兒的預后和治療具有十分重要的意義。本研究采用常規染色體核型分析和熒光原位雜交技術對140例AL患兒進行檢測，探討聯合檢測對提高白血病染色體異常檢出率的價值。

1材料和方法

1.1樣本收集選取2017年1月—2018年12月上海市兒童醫院140例AL患兒，其中ALL患兒99例、AML患兒41例。診斷和分型均符合中華醫學會兒科學分會血液學組2014年制訂的《兒童急性淋巴細胞白血病診療建議（第四次修訂）》[5]。抽取患兒3～5mL骨髓，進行常規細胞遺傳學（染色體核型分析）和熒光原位雜交檢測。1.2試劑與儀器ChangMediumMF/BMC細胞培養試劑（美國irvinescientific公司）、Sigma-AlorichGs500染液（美國Sigma-Alorich公司）、VysisFISH探針（美國Abbott公司）、CX41、BX51、BX61顯微鏡（日本Olympus公司）、CDS5細胞生成干燥箱（美國Thermotron公司），Thermobrite雜交儀（美國Leica公司）。1.3方法1.3.1染色體核型分析采用直接法和24h法制備染色體標本，根據人類細胞基因組學國際命名體系2016分析二倍體核型20個中期分裂相。1.3.2熒光原位雜交檢測探針分別為ETV6/RUNX1、BCR/ABL1、MLL、PBX1/TCF3、PML/RARα、ETO/AML1、CBFβ、MYC、CCND1/IGH、IGH/BCL2，在熒光顯微鏡下通過DAPI、CY3.5、FITC與三色融合濾光片觀察樣本的信號，計數300個細胞，如遇信號異常，則加數至500個或更多。

2結果

2.1染色體核型分析結果99例ALL患兒中，20.2%（20/99）染色體核型正常；45.5%（45/99）核型異常，所有核型異常中，單純數目異常占15.6%（7/45），結構異常占53.3%（24/45），數目及結構均異常占31.1%（14/45）；不完全計數占24.2%（24/99），未見分裂相占10.1%（10/99）。19.5%（8/41）的AML患兒核型正常，核型異常占75.6%（31/41）；結構異常占64.5%（20/41），數目與結構均異常占35.5%（11/41），不完全計數4.9%（2/41）。ALL患兒染色體特異性異常包括der（19）t（1：19）12.5%（3/24）、t（9：22）16.3%（4/24）、t（8：14）8.3%（2/24）、t/del（11）（q23）20.8%（5/24）；高超二倍體占35.6%（16/45），中位染色體數為56（正常為52～67），主要是獲得三倍體，其中100%獲得X染色體，以下依次為獲得21號（93.8%）、18號（68.8%）、6號（62.5%）、14和4號（各56.3%）、8號和10號（各31.3%）、17號（31.3%）。AML患兒染色體特異性異常包括t（15：17）及17號染色體數目異常占25.8%（8/31）。產生ETO-AML1融合蛋白的t（8：21）占16.1%（5/31）（高于文獻[6]中12.0%～15.0%的發生率）、t/del（11）（q23）占22.6%（7/31）、inv（16）占9.7%（3/31）。此外，數目與結構均異常占35.5%（11/31），累及染色體X、8、7、21。2.2熒光原位雜交檢測結果ALL患兒熒光原位雜交檢測異常率為80.7%（113/140）（1例患兒多種探針異常只計數1次）。28例染色體核型正常患兒中，熒光原位雜交檢測異常11例（39.3%）；76例核型異常患兒中，熒光原位雜交檢測結果正常11例（14.5%）。ALL患兒中出現幾種探針同時異常的現象，AML患兒則未發現這一現象。熒光原位雜交檢測共檢出異常信號151例次，其中ALL124例次，AML27例次。2.2.1ALL患兒熒光原位雜交檢測異常特征ALL患兒熒光原位雜交檢測異常率為86.9%（86/99）。異常信號共124次，ETV6/RUNX11異常信號占50.0%（62/124），PBX1/TCF3異常信號占23.4%（29/124），BCR/ABL1異常信號占14.5%（18/124），MLL檢測t/del（11）（q23）占9.7%（12/124），MYC/IGH占1.6%（2/124），MYC占0.8%（1/124）。2.2.2AML患兒熒光原位雜交檢測異常特征AML患兒熒光原位雜交檢測異常率為65.9%（27/41），低于ALL患兒，其中ETO/AML1占29.6%（8/27）、PML/RARα占29.6%（8/27）、CBFβ/inv（16）占22.2%（6/27），MLL探針檢測t/del（11）（q23）占18.5%（5/27）。2.32種方法聯合檢測結果染色體核型分析、熒光原位雜交和聯合檢測結果見表1、表2。

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