艾葉炭化學成分分析

導語：艾葉炭化學成分分析一文來源于網友上傳，不代表本站觀點，若需要原創文章可咨詢客服老師，歡迎參考。

摘要：目的對艾葉炭中化學成分進行分離及結構鑒定，為炒炭存性理論以及艾葉炭質量標準的提升提供實驗依據。方法采用回流提取法、CC（柱色譜）、HPLC及NMR對艾葉炭進行提取、分離純化及化合物結構鑒定。結果從艾葉炭中分離出2個化合物，化合物1為槲皮素，化合物2為二十八烷醇。結論進一步驗證了炒炭存性理論，為艾葉炭的活性研究及臨床應用奠定基礎。

關鍵詞：艾葉炭；槲皮素；二十八烷醇

艾葉炭由菊科多年生草本植物艾（ArtemisiaargyiLévl，etVant）的干燥葉經高溫炮制而來。中藥艾葉被廣泛用作食物和草藥，具有溫經止血、散寒止痛的功效。艾葉中含有揮發油、黃酮類、鞣質類、三萜類等多種化學成分[1-8]，具有抗菌抗病毒、平喘鎮咳祛痰、保肝、抗腫瘤、抗氧化等多種藥理活性作用[9-12]。根據中藥炒炭存性理論，艾葉高溫炒炭過程是炭化而非灰化，炒炭后原指標性成分桉油精消失[13]，但仍有部分有機物未炭化，且有新的化學成分生成[14]。同時炒炭后難溶性草酸鈣簇晶大幅減少產生游離鈣離子，止血作用明顯增強[15-17]。目前艾葉炭的化學研究十分稀少，在本課題組前期研究基礎上，艾葉炭地方質量標準已被收載于2020年版《吉林省中藥飲片炮制規范》第40頁，本研究旨在對艾葉炭化學成分進行研究，進一步闡明中藥炒炭存性理論并為臨床應用奠定基礎。

1材料與儀器

1.1藥材艾葉炭為實驗室自制，產品批號為20200511。艾葉炮制過程：將艾葉飲片凈選，除去雜質、梗及灰屑，揉散置滾筒式炒藥機中，設置鍋底溫度為180℃，轉速為20r·min-1，待艾葉炒制冒黃煙，取少量水均勻噴灑，翻炒16min左右，待艾葉表面焦黑色，炒干，滅盡火星，取出，放涼得艾葉炭。其外觀呈不規則碎片，表面為黑褐色，符合2020年版《吉林省中藥飲片炮制規范》中的艾葉炭標準。1.2試劑與儀器乙腈（HPLC，FisherCo.，美國），磷酸（HPLC，國藥集團化學試劑有限公司，中國）甲醇（AR，HPLC，國藥集團化學試劑有限公司，中國），正己烷（AR，HPLC，北京化工廠，中國），乙酸乙酯（AR，HPLC，廣東光華科技股份有限公司，中國），純化水為實驗室自制；核磁共振光譜儀（1HNMR：400MHz，13CNMR：100MHz，MerkCo.，德國），使用CDCl3和DMSO-d6為溶劑，高效液相色譜儀（Aglient：1260In?nityII，美國；Waters：600Controller，Delta600，2487，美國），精密電子天平（FA1204B上海菁海儀器有限公司，中國），層析用硅膠（200-300目，青島海洋化工廠，中國），高效液相色譜柱（SHIMADZUC1810mm×250mm；GSA10250SIL1900110mm×250mm，環球色譜有限公司，中國），三用紫外分析儀（ZF-6，安靈股份有限公司，中國），旋轉蒸發器（RE-52A，上海亞榮生化儀器廠，中國），水浴鍋（HH-6，邦西儀器科技上海有限公司，中國）。

2方法與結果

2.1提取與分離艾葉炭1.0kg甲醇回流提取2次，每次30min，合并提取液，濃縮得到20.10g提取物。經硅膠柱色譜（200～300目），以正己烷-乙酸乙酯（10:0～0:10）溶劑系統梯度洗脫，經TLC檢識合并相似流分，得到Fr.1-5。將Fr.1通過半制備正向高效液相色譜法（正己烷:乙酸乙酯=10:1，2.0mL·min-1），分離得到化合物2（68.72mg，Rt35.7min），高效液相色譜圖1B；從Fr.4通過半制備反向高效液相色譜法（乙腈:0.1%磷酸=55:45，2.0mL·min-1），分離得到化合物1（75.69mg，Rt22.4min），高效液相色譜圖見圖1A。2.2結構鑒定化合物1黃綠色粉末；1HNMR（600MHz，DMSO-d6，TMS），δH：9.58（1H，s，OH-3），12.50（1H，s，OH-5），6.21（1H，d，J=2.0Hz，H-6），10.76（H，s，OH-7），6.42（1H，d，J=2.0Hz，H-8），7.69（1H，d，J=2.2Hz，H-2′），9.35（1H，s，OH-3′），9.30（1H，s，OH-4′），6.90（1H，d，J=8.5Hz，H-5′），7.56（1H，dd，J=8.5Hz，2.2Hz，H-6′）；13C-NMR（150MHz，DMSO，TMS），δC：148.1（C-2），136.2（C-3），176.3（C-4），161.2（C-5），98.6（C-6），164.9（C-7），93.8（C-8），156.6（C-9），103.5（C-10），120.4（C-1′），116.1（C-2′），145.5（C-3′），147.2（C-4′），115.5（C-5′），122.4（C-6′）。以上數據與文獻[18-19]報道一致，故鑒定化合物1為槲皮素（Quercetin），化學結構見圖2A。化合物2白色粉末；LR-EIMS（m/z，392），1H-NMR（600MHz，CDCl3，TMS），δH：3.59（2H，t，J=6.78Hz，H-1），2.02（H，d，J=5.16Hz，OH-1），1.52（2H，m，H-2），1.29（50H，m，H-3～27），0.85（3H，m，H-28），13C-NMR（150MHz，CDCl3，TMS），δC：63.1（C-1），32.8（C-2），31.9（C-3），29.7（C4～24），27.1（C-25），25.7（C-26），22.7（C-27），14.1（C-28）。以上數據與文獻[20-22]報道一致，故鑒定化合物2為二十八烷醇（Octacosanol），化學結構見圖2B。

3討論

近年來艾葉以其溫經止血為療效被大量開發應用，其相關炮制品也廣泛用于臨床。傳統中醫藥理論中炒炭存性是指藥物只能部分炭化，更不能灰化，未炭化部分仍應保存藥物的固有氣味。艾葉炭由艾葉高溫炮制而來，利用傳統性狀和總黃酮含量的雙重綜合評價確定180℃為其最佳炮制溫度。炒炭后原指標性成分桉油精消失，無法用其含量評價艾葉炭質量。同時，難溶性草酸鈣簇晶大幅減少產生游離鈣離子增加止血作用，這與“炒炭止血”的傳統中醫藥理論相一致。因此，對于艾葉炭中化學成分尤其是指標性成分研究尤為迫切。本研究在從艾葉炭中分離出2個黃酮類化合物，分別為槲皮素和二十八烷醇，并對其進行了綜合光譜解析，通過1D&2D光譜對其進行了完整的結構歸屬，糾正了部分數據的歸屬錯誤，不僅為中藥炒炭存性理論提供依據，同時，為日后艾葉炭質量標準的進一步完善與提升奠定堅實基礎。

作者：谷樂 邵信婷 王雪鈺 楊昭怡 段明華 王燁 李勇 單位：長春中醫藥大學藥學院